植物生理学实验(修改格式)_65069_new重点解读.doc

植物生理学实验指导 内蒙古大学生命科学学院植物生理实验室 目 录 实验一 植物组织水势的测定（小液流法）实验二 植物组织渗透势的测定（质壁分离法）实验三 小孔的扩散（示范）实验四 植物灰分常量元素分析实验实验 叶绿体色素的提取与分离 实验 光合色素的的性质 实验 叶绿素a和b含量的测定（分光光度法） 实验 环境因素对光合作用的影响 实验十 改良半叶法测大田光合作用强度 实验十植物呼吸强度的测定（小篮子法） 实验十 种子生命力的快速测定（TTC法） 实验十 种子生命力的快速测定（红墨水法） 实验 脯氨酸含量的测定 实验＊氮蓝四唑（NBT）法测定 超氧物歧化酶（SOD）活力 实验 植物组织中丙二醛含量的测定 实验＊过氧化物酶活性的测定 实验＊植物抗逆性的测定（电导仪法） 实验一 植物组织水势的测定（小液流法） 实验目的 了解小液流法测定植物组织水势的原理，掌握其测定方法。 实验原理 水势（ψw）表示水的化学势，像电流由高电位处流向低电位处一样，水从水势高处流向水势低处（代表水的能量水平）。植物组织的水分状况可用水势表示。植物体组织之间、细胞之间以及植物体与环境间的水分移动方向都由水势差决定。当植物细胞或组织放在已知水势的一系列溶液中时，如果植物的水势（ψw）小于某一溶液的渗透势（ψπ），则组织吸水而使溶液浓度变大；反之，则植物细胞失水而使溶液浓度变小；若植物组织的水势与溶液的渗透势相等，则二者水分保持动态平衡，外部溶液浓度不变，此溶液的渗透势即等于所测植物组织的水势。根据溶液的浓度不同其比重亦不同的原理确定与植物组织等水势的溶液浓度。然后按公式计算其水势。 【实验用品】 1．仪器： 剪刀 镊子 解剖刀 打孔器 　 试管 移液管 毛细吸管（尖端弯成900） 2．试剂： 1mol/L蔗糖溶液；次甲基蓝粉末， 3．材料： 胡萝卜块根 （或小麦幼苗、燕麦幼苗、菠菜叶片） 【实验方法】 1. 取8支试管并编号，按编号顺序放在试管架上，用1mol/L蔗糖溶液配制0.1，0.2，0.3，0.4，0.5，0.6，0.7，0.8mol/L蔗糖溶液各10mL,各管都加上橡胶或软木塞子。 2．另取8支试管并编号，按编号顺序放在试管架上，作为试验组。然后由对照组之各试管中分别取蔗糖溶液4mL移入相同编号的试验组试管中，再将各试管都加上塞子。 3．将胡萝卜块根刷洗干净，用打孔器钻取柱状条，然后再将柱状条切成２～３mm的薄片（菠菜叶片需要用剪刀将叶片避开主脉剪成大小相等的小块）。向试验组每一试管中各加数目相等的２０片胡萝卜薄片（或２０片叶小圆片），塞好塞子，放置30 min（每３～５min 轻轻摇动1次）。到时间后，向每一试管中各加入次甲基蓝粉末少许，充分振荡使溶液着色均匀。 4用毛细吸管从试验组的各试管中依次吸取着色的液体少许，然后伸入对照组的相同编号试管的液的中部，缓慢放出一滴蓝色试验溶液，观察小液流（蓝色溶液）移动的方向，并依次记录。 小液流移动的方向 蔗糖浓度 （mol/L) 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 0.8 液滴流动方向 （↑、↓） 结果与计算 根据小液流不动时蔗糖溶液的浓度，按公式：ψw=－RTiC　计算水势值。 R ： 气体常数0.008314（L·MPa/mol·K）； T ： 绝对温度（273+t）K； C ： 蔗糖溶液的浓度（mol/L）； I ： 解离常数（蔗糖＝1.0）； 思考题 1．测定水势时，同一植株上部叶片与下部叶片的水势有何差别？ 2． 用小液流法测定植物组织水势与用质壁分离法测定植物细胞渗透势都是以蔗糖溶液的浓度计算出溶质势为根据，两种方法之间的区别何在？ 实验二 植物组织渗透势的测定（质壁分离法） 【实验目的】 1观察植物细胞质壁分离的形式； 2观察植物细胞的质壁分离复原； 3掌握质壁分离法测定植物组织渗透势的方法 【实验原理】 成长的植物细胞是一个渗透系统，当把细胞置于一定浓度溶液中时，植物组织内的汁液与其周围的某种溶液处于渗透平衡状态，且此时植物细胞内的压力势为零，那么细胞汁液的渗透势就等于该溶液渗透势。该溶液的浓度为等渗浓度。 当用一系列梯度浓度溶液观察细胞质壁分离现象时，细胞的等渗浓度介于刚刚引起初始质壁分离的浓度和与其相邻的尚不能引起质壁分离的浓度梯级之间的溶液浓度。代入公式即可计算渗透势。 【实验用品】 1．仪器： 显微镜 载玻片 盖玻片 镊子