总杞菊地黄丸定性鉴别和含量测定研究_new重点解读.doc

杞菊地黄丸中各药材的定性鉴别及含量测定 处方 枸杞子40g 菊花40g 熟地黄160g 酒萸肉 80g 牡丹皮60g 山药80g 茯苓60g 泽泻60g 制法 以上八位味，取酒萸肉、牡丹皮、山药粉碎成细粉;泽泻、茯苓加水煎煮两次，第一次3小时，第二次2小时，滤过，滤液合并浓缩至相对密度为1.30—1.35（60—80℃）的稠膏；熟地黄切片，加水煎煮三次，第一次3小时，第二次2小时，第三次1小时，滤过，滤液合并浓缩至相对浓度为1.30—1.35（60—80℃）的稠膏；枸杞子以45%乙醇作溶剂，剩余的酒萸肉和牡丹皮及菊花已70%乙醇作溶剂，浸渍24小时后分别进行渗漉，收集渗漉液，合并上述渗漉液，回收乙醇浓缩至相对浓度为1.30—1.35（60—80℃）的稠膏；与上述细粉与稠膏混匀，制成浓缩丸，干燥，打光，即得。 性状 本品为棕色至棕黑色的浓缩丸，微甜而酸。 四、各药材的定性鉴别及含量测定 1、枸杞子 定性鉴别研究 实验仪器：冷凝管3个，圆底烧瓶3个，离心管6个，硅胶G薄层板，分液漏斗1个 实验试剂：乙酸乙酯，甲醇，甜菜碱对照品，甲苯 薄层板：硅胶G薄层板 展开剂：甲苯-乙酸乙酯-甲酸（15:2:1)的上层溶液 供试品溶液的制备方法： 取本品15g，研碎，加水100ml，加热回流30分钟3次，放冷，离心，取上清液，用乙酸乙酯50ml振摇提取3次，分取乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液 。 对照药材溶液的制备： 取枸杞子对照药材0.5g，加水50ml，加热回流30分钟3次，放冷，离心，取上清液，用乙酸乙酯30ml振摇提取3次乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解 ，作为对照药材溶液。 对照品溶液制备： 取甜菜碱对照品，加甲醇制成每lml含lmg的溶液。 阴性对照溶液的制备： 取阴性样品（缺枸杞子药材的样品），按照供试品溶液制备的条件制备样品，得阴性对照溶液。 操作方法： 照薄层色谱法（通则0502)试验，吸取上述两种溶液各10微升，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸（15:2:1)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。 2、山药 定性鉴别研究 实验仪器：冷凝管1个，圆底烧瓶1个，分液漏斗1个，蒸发皿1个，硅胶G薄层板2个，离心管2个 实验试剂：95%乙醇，乙酸乙酯，二氯甲烷，甲醇，浓氨试液，氯仿，10%磷钼酸乙醇溶液，香兰素硫酸溶液 薄层板：硅胶G薄层板 展开剂：乙酸乙酯-甲醇-浓氨试液（9：1：0.5）；氯仿:甲醇:水（64:50:10） 显色剂：10%磷钼酸乙醇溶液；香兰素硫酸溶液 供试品溶液的制备： 取本品8粒研碎，加二氯甲烷30ml，加热回流2小时，滤过，滤液蒸干，残渣加二氯甲烷1ml使溶解，作为对照药材溶液。 对照药材溶液的制备： 取山药对照药材5g，加二氯甲烷30ml，加热回流2小时，滤过，滤液蒸干，残渣加二氯甲烷1ml使溶解，作为对照药材溶液。 操作方法（薄层色谱法） 吸取上述2种溶液各4μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲醇-浓氨试液（9：1：0.5）或氯仿:甲醇:水（64:50:10）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以显色剂：10%磷钼酸乙醇溶液或香兰素硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。 茯苓 定性鉴别研究 实验仪器：冷凝管1个，圆底烧瓶1个，分液漏斗1个，硅胶G薄层板2个 实验试剂：甲醇，乙醇，乙酸乙酯，乙醚，10%硫酸乙醇溶液，2%香草醛酸溶液-乙醇（4: 1)，三氯甲烷，茯苓多糖对照品。 薄层板：硅胶G板 展开剂：三氯甲烷-甲醇（3 : 1)或正丁醇-冰乙酸-水（4:1:5上层）或甲苯-乙酸乙酯-甲酸（20:5:0.5） 显色剂：10%硫酸乙醇溶液或2%香草醛酸溶液-乙醇（4: 1)混合溶液 供试品溶液的制备： 取本品杞菊地黄丸（浓缩丸）15g，研碎，加水100mL，加热回流30分钟，放冷，离心，取上清夜，用乙酸乙酯50mL振摇提取3次，分取乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液。 对照品溶液的制备： 取茯苓多糖加甲醇溶液1ml制成对照品溶液。 阴性对照品溶液的制备： 取阴性样品（缺茯苓药材的样品），按照供试品溶液制备的条件制备样品，得阴性对照溶液。 对照药材溶液的制备； 取茯苓对照药材1g，加乙醚50ml，超声处理10分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，制成对照药材溶液。 操作方法： 照薄层色谱法（通则0502)试验，吸取上述供试品溶液,对照药材