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绪论 1 组织培养的定义 指无菌和人工控制的环境条件下，利用适当的培养基，对离体的植物器官、组织、细胞及原生质体进培养，使其再生细胞或完整植株的技术与方法，常又称为植物离体培养 2 组织培养的类型 根据外植体来源和培养对象的不同植物组织培养的研究类型可以分为 组织培养;对植物体的各部分组织进行离体培养的方法。包括分生组织、形成层组织、薄壁组织、韧皮部组织、愈伤组织等。 器官培养:对植物体各种器官及器官原基进行离体培养的方法。包括根、茎、叶、花、果实、种子等的培养。 胚胎培养:对植物成熟和未成熟胚以及具胚器官进行离体培养的方法。包括幼胚、成熟胚、胚乳、胚珠、子房等的培养。 细胞培养: 对单个细胞或较小细胞团进行离体培养的方法。常用的细胞有性细胞、叶肉细胞、根尖细胞、韧皮部细胞等。 原生质体培养: 对植物的原生质体进行培养的方法。包括原生质体、原生质体融合体和原生质体的遗传转化体的培养等。 3 植物组织培养的任务（了解）和研究意义 任务：研究离体培养条件下，细胞、组织或器官所需营养条件和环境条件，细胞、组织或器官的形态发生和代谢规律，植物脱毒方法和机理，植物特别是一些难繁殖植物的大量快繁方法，细胞融合方法和机理，再生个体的遗传和变异，种质资源的离体保存机理和方法等。从而改良植物品种，创造新的植物种类，为人类造福。 意义：（1）基础理论研究：试验体系的准确性和可重复性，广泛用于细胞、组织的代谢生理及其它生化等方面的研究（如分化问题）。 （2）应用研究：无性繁殖系快速繁殖的生产、试管苗的商品化，遗传育种，种质保存，克服远缘杂交，种质资源创新，获得转基因植株。 第一章 实验室和基本操作 1 列举几类有代表性的培养基，各有何特点。 植物组织培养使用的培养基，根据物理形状，大致可以分成两类，即固体培养基和液体培养基。在培养基中按培养要求加入一定量的凝固剂（如琼脂、明胶等）即为固体培养基。在培养集中不加入琼脂等凝固剂的即为液体培养基。这两类培养基各有其优点和缺点，我们可以按培养目的的要求不同分别选择采用。 根据培养基的成分和浓度，可以把它们分为含盐量较高的培养基、硝酸钾含量较高的培养基、中等无机盐含量的培养基、低无机盐含量的培养基四个基本类型。 有代表性的培养及种类 （1）MS 培养基：无机盐类浓度较高，尤其是铵盐和硝酸盐含量高，能够满足快速增长的组织对营养元素的要求，是一种应用广泛的培养基。但它不适合生长缓慢、对无机盐类浓度要求比较低的植物，尤其是不适合铵盐过高易发毒害的植物。 （2）B5培养基：铵的含量比较低，较高的硝酸盐和盐酸硫胺素 （3）N6培养基：KNO3和（NH4）2SO4含量较高，但不含元素钼。 （4）White培养基：无机盐浓度较低，在生根培养、胚胎培养中有良好的效果 2 培养基的基本组成要素有哪些， 培养基的构成要素通常可分为：①水分；②无机盐类；③有机营养成分；④植物生长调节物质；⑤天热物质；?⑥pH；⑦凝固剂 培养基的组成大致可分为两个部分，即基本培养基，如MS,Nitsch,N6,B5等和附加成分，如植物激素和天然附加物等。 生长素类物质有利于促进细胞伸长和分裂、促进生根、抑制器官脱落、性别控制、延长休眠、顶端优势、单性结实、诱导愈伤组织形成。 常用的生长素： IAA(吲哆乙酸 NAA (萘乙酸) 2,4-D(2,4，二氯苯氧乙酸) IBA(吲哆丁酸) 细胞分裂素主要作用是促进细胞分裂和器官分化，促进侧芽分化和生长，抑制顶端优势，延缓组织衰老等，用于离体成花的调控。 常用的细胞分裂素有：KT (激动素) BA(6-卞基腺嘌呤 2-ip(异戊烯氨基嘌呤) ZT（玉米素） 生长素能促进细胞的纵向伸长，它的作用具有两重性：既促进生长，又能抑制生长、甚至杀死植物；既促进发芽，又会抑制发芽；既能防止落花落果，又可疏花疏果。这取决于浓度、细胞的年龄和器官的种类。一般低浓度促进生长，中浓度抑制生长，高浓度则杀死植物。 细胞分裂素能促进细胞分裂和扩大、延迟衰老和保鲜、诱导芽的分化、促进侧芽发育，防止果树生理落果、打破种子的休眠，促使其发芽等作用。 3 配置培养基的步骤 (一）培养基母液的配置 配制母液原则：相同类型的试剂混合；易形成沉淀的药品分开；母液浓度要适宜；用量要认真计算和核对；药品要准确称量。 1 基本培养基母液 注意事项：在配制母液时，应该把Ca2＋、SO42－、Ca2＋和PO43－放在不同的母液中，以免发生沉淀。配制母液的数量可以根据实际情况而定，如MS培养基通常可以配制三液式、四液式、五液式等。一般而论，有机营养成分、大量元素、微量元素可以分别配成一个母液，铁盐和钙盐为单独母液。 配制好的母液，