气相色谱应用培训-培训班李言教程.ppt

填充柱和毛细管柱的比较 （3）内标法 * * 内标物要满足以下要求： 不与试样发生化学反应； 与样品完全互溶； 与样品完全分离且内标峰位置应与被测组分接近； 内标物的含量要接近待测组分含量。 试样配制：准确称取一定量的试样W，加入一定量内标物mS， 计算式： 内标法特点 * * 内标法的准确性较高，操作条件和进样量的稍许变动对定量结果的影响不大。 每个试样的分析，都要进行两次称量，不适合大批量试样的快速分析。 Tel: 010应用支持部） * * * * 三、填充柱制备 1、柱管的清洗 2、固定相的制备 3、固定相的填充 4、填充柱的老化与评价 * * 色谱柱的老化 须老化的色谱柱： 新柱 出现峰形变化，基线不稳定，出现异常鼓包等现象 长时间未使用 色谱柱标牌内容 固定相名称、长度、内径、老化温度、最高使用温度 色谱柱的保存 填充柱用胶帽将其两端封住； 毛细柱用进样垫将其两端封住，放入原包装内。 * * 注意事项 载气：用氮气，不能用氢气 老化温度：比最高使用温度低20-30度（色谱柱标牌上有相应的老化温度） 老化时间：根据柱子长度，大约在4-8小时 新色谱柱老化时必须将色谱柱与检测器断开； 老化时注意柱箱中的其他色谱柱，如果老化温度高于某根色谱柱的最高使用温度，则必须把这根色谱柱拆掉。 毛细管柱推荐使用程序升温。 * * 第四节 毛细管色谱法 一、毛细管色谱的优点 （1）分离效率高：比填充柱高10～100倍； （2）分析速度快：用毛细管色谱分析比用填充柱色谱速度 （3）色谱峰窄、峰形对称。较多采用程序升温方式； （4）灵敏度高，一般采用氢焰检测器。 （5）涡流扩散为零。 * * 二、毛细管柱的种类 涂壁开管柱（wall coated open　tubular，WCOT柱）： 将固定液直接涂敷在管内壁上。柱制作相对简单，但柱制备的重现性差、寿命短。 多孔层开管柱（porous layer open tubular，PLOT柱）： 在管壁上涂敷一层多孔性吸附剂固体微粒。构成毛细管气固色谱。 载体涂渍开管柱（support coated open tubular，SCOT柱）：将非常细的担体微粒粘接在管壁上，再涂固定液。柱效较WCOT柱高。 化学键合或交联柱：将固定液通过化学反应键合在管壁上或交联在一起。使柱效和柱寿命进一步提高。 * * 三、毛细管色谱的分流与尾吹 毛细管柱内径很细，因而带来三个问题： （1）允许通过的载气流量很小。 （2）柱容量很小，允许的进样量小。需采用分流技术。 （3）分流后，柱后流出的试样组分量少、流速慢。解决方法：灵敏度高的氢焰检测器，采用尾吹技术。 * * 分流：把进入注样器中的样品大部分分到仪器外面， 只有小部分流经色谱柱。 作用：减小柱负荷，减小柱污染。 分流比＝（柱流量＋分流流量）/柱流量 分流比越大出峰越小，峰之间的分离度明显改善，柱污染小，但含量低的组分会不出峰。 补充气（尾吹）：增加柱出口到检测器的载气速度，以减小这段死体积的影响，使仪器的灵敏度与峰形有所改善。 补充气越大，样品进入检测器速度加快，峰变尖锐，灵敏度提高，但点火困难。 * * 四、毛细管柱的规格 （1）固定液 名称 非极性：SE-30, OV-1 ，OV-101 ，SE-54 ，OV-1701 中等极性：XE-60 ，OV-17 极性：FFAP ，PEG-20M （2）毛细管柱长度 5—12m 短柱：分离少于10个组份（不包含难分离物质对）的简单样品。 25—30m 中长柱：分离10—50个组份的样品。 50m 长柱：分离大于50个组份或含有难分离物质对的复杂样品。 （3）毛细管柱内径 0.53mm 具有近似填充柱的负荷量，分析时间快, 可采用柱上进样或直接进样技术，适合于分析不太复杂的样品，是填充柱理想的替代柱。 * * 0.32mm 柱效稍低于0.25mm常规柱，负荷量大于常规柱的60%，用特制注射针可做柱上进样。 0.25mm 最常用的内径规格。有较高的柱效，负荷量较低，必须分流进样或无分流进样。用于复杂多组份样品分析. 0.20mm 柱效高,负荷量低，流失较小，适合与质谱等灵敏检测器联用。 （4）膜 厚 0. 1—0. 2um 薄液膜 低负荷量，高温下流失较小，适合于高沸点化合物的分析，适于配高灵敏检测器。 0.25—0.33um 标准液厚 一般商品柱的标准液膜。 0.5—5.0um 厚液膜 较高的样品负荷量，在高温下流失较大，适于分析低沸点样品。 * * 20