第五章 维生素类药物的分析.ppt

第五章　维生素类药物的分析The Analysis of Vitamines 维生素是维持人体正常生理机能所必需的生物活性物质。 ＊如果人体缺少某种维生素，就会引起维生素缺乏症，而影响人体的正常生理机能。 例如: VA 缺乏—夜盲症 VB1缺乏—脚气病 脂溶性： 水溶性： 　第一节 维生素A的分析 一．结构与性质 1 ．化学结构 （1）环己烯+共轭多烯侧链； （2）天然VA侧链为全反式； （3）天然来源主要是鱼肝油，为醋 酸酯，棕榈酸酯等,目前多由人 工合成。 a.?紫外吸收 ＊具有共轭多烯侧链—紫外吸收。 ＊最大吸收波长在325~328nm，随VA存在状态以及所用的溶剂，最大吸收波长的位置有所不同 ＊ 不溶于水 ＊ 溶于乙醚，氯仿，异丙醇，环己烷，脂肪和油。 ★ 鉴别 ★ 含量测定 二. 鉴别试验 1.?三氯化锑反应 2. 紫外吸收光谱 VA的无水乙醇溶液在326nm有最 大吸收。 确认醇或酯，是醋酸酯或其他酸酯， ▲例：VA和其标准品用环己烷溶解 展开剂：环己烷—乙醚（80：20） 板：硅胶G 显色：SbCl3T.S. Rf： VA 醇 0.08 VA 醋酸酯 0.41 VA棕榈酸酯 0.75 三．含量测定 ?1：维生素A的?max ?2、?3：分别在?1两侧 ⅰ．等波长差法： ⅱ．等吸光度法：　 ⅰ．最大吸收波长确认 ?max 在326~329nm，第一法测定。 ?max不在326~329nm，第二法测定。 ⅱ．计算吸收度比及比值差 ⅲ．计算校正吸收度 ⅳ换算因数 1IU 0.344?g全反式维生素A醋酸酯， 1g的维生素A醋酸酯就相当于 维生素A醋酸酯 练习题：维生素AD胶丸中维生素A的含量测定 已知：平均胶丸重为0.0815g 维生素A的标示量为10000IU/丸 取样： 首先计算吸收度比值和吸收度比值差。（填于上表） ★第二法（皂化法）： 消除植物油干扰：适合VA醇 b.在300，310，325和334nm处测定吸收度，找出λmax c.计算 d.校正公式 A325（校） 6.815A325-2.555A310- 4.260A334 e. 判断 5、注意事项 （1）VA遇光易氧化变质，操作应半暗室 中快速进行，所用试剂不得含氧化性物 质，以防VA紫外线或氧化性物质破坏。 （2）用三校正法测定时，一点在λmax处，其余两点均为吸收曲线的上升和下降陡坡处。对波长的正确性要求严格。340nm处，若波长误差±0.5nm，可影响结果-3.1~2.07%。所以测定时所用仪器的波长读数应注意，必要时应作标准。 维生素A醋酸酯胶丸含量测定:取内容物39.1 mg,加环 己烷溶解并稀释成100ml，在下列五个波长处测得吸 收度A值如下： 维生素A醋酸酯胶丸的含量测定，取内容物W，加环己烷溶解并稀释至10ml，摇匀，精密量取0.1ml,再加环己烷稀释至10ml ，使其浓度为9~15IU/ml。已知内容物平均重量为80.0mg,每丸标示量为10000IU。试计算取样量（ W ）的范围是多少？ 第二节 维生素E的分析 二、鉴别试验 1、硝酸反应： 本品，无水乙醇溶解，加硝酸，75℃加热约15分钟，显橙红色。 2、水解后氧化反应： 本品，在碱性条件下水解，得α—生育酚，在联吡啶和三氯化铁试液的作用下，反应产生血红色配离子。 3、UV吸收： VE的0.01%无水乙醇液： λmax 284nm λmin 254nm 三、杂质检查 检查游离生育酚: ChP2000 P798 取0.1g样品，按铈量法用Ce SO4 2 0.01mol/L 滴定，以二苯胺为 指示剂，消耗Ce SO4 2液不得超过1.0ml。 （一）铈量法 1、原理： VE用硫酸加热回流，水解成生育酚，用硫酸铈定量地氧化为对一生育醌，过量的硫酸铈氧化二苯胺指示剂而指示滴定终点。 终点：亮黄→灰紫 空白试验 2、反应条件 （1）VE在H2SO4酸性条件下水解为宜。 碱性溶液中游离生育酚易被氧化。Ce SO4 2液滴定在酸性溶液中进行,如在碱性中会生成碱式盐而影响测定。 （2）Ce SO4 2溶于酸水溶液，不溶于醇,α—生育酚溶于酸而不溶于水, 滴定过程中应有一定浓度的乙醇。 （3）本法适用于纯度高的VE供试品。 （二）气相色谱法：Chp2000 1、色谱条件及系统适应性试验 色谱柱：2m×4mmI.D.硼硅玻璃柱， 内装硅藻土（80~100目） 固定相：硅酮（OV-17） 涂布浓度 2% 载气：N2， 流速:含2%固定相：以18~20分钟为宜； 含5%固定相：以30~32分钟为宜 柱温：265℃ 内标：正三十二烷 检测器：FID（氢火焰离子化检测器） 性