降钙素原的临床意义教案.ppt

降钙素原的临床意义 检验科 主要内容 PCT概述 PCT的检测方法 降钙素原的敏感性和特异性 PCT检测的影响因素 临床抗生素的使用 PCT的临床意义 PCT检测在临床科室的应用 PCT概述 降钙素原（PCT）是一种用于严重细菌感染诊断与治疗监测的非创伤性临床实验室指标，自1993年国外首次报道血清降钙素原（PCT）水平与细菌感染有关以来，各类研究表明，PCT正在越来越多地被认为是细菌感染和脓毒血症的良好标记物，从而成为临床诊断中的一个重要工具。PCT浓度的增长反映了从一个健康状态到细菌感染的最严重后果（脓毒血症、严重脓毒症、脓毒性休克）的持续发展，呈现正相关性。因此，对于细菌感染和脓毒血症，高灵敏度、全定量PCT检测不仅可以进行早期的临床诊断，而且能够指明疾病的进程、预后以及对治疗方法进行指导，而目前研究的更长远的应用是将PCT作为抗生素管理的有效工具。 与其他细菌感染的传统诊断指标如白细胞计数、血沉、C-反应蛋白、细菌培养等比较，PCT拥有早期、快速、更高的灵敏度和特异性，从临床应用鉴别诊断中可知，PCT在细菌感染特别是脓毒症方面的诊断的特异性明显由于传统诊断指标，目前在国内已广泛应用于临床各科室。 PCT的检测方法 放免法 免疫荧光法 免疫化学发光法 金标法 放免法 放免法是利用由人工合成的57个氨基酸部分制成R2B7特异性多克隆抗体，R2B7直接作用于PCT的57个氨基酸部分，既能检测游离型PCT，又能检测结合型PCT，比免疫化学发光法提高了灵敏度，但所需时间较长，且标记的放射性元素存在污染，因而限制了此方法的临床应用。 免疫荧光法 免疫荧光法 此方法是一种定量的免疫学检测方法。 采用两种鼠单克隆抗体与PCT的两个不同的抗原结合位点（CT和下钙素）结合， 一种抗体经荧光标记（示踪剂）固定在管壁上，两种抗体分别与血浆或血清中PCT分子结合，形成“夹心复合物”。荧光标记抗体被缚在试管壁上，通过发光试剂，计算荧光标记物的含量。荧光信号的强度与标本PCT浓度成正比，同时测定已知PCT浓度的标准品，制成标准曲线，从而定量得到标本的PCT浓度。 免疫化学发光法 免疫化学发光法 该方法采用胶体金免疫层析技术， 在标准品上结合有胶体金（示踪）的小鼠单克隆抗降钙素抗体和绵羊多克隆抗降钙素抗体， 待检标本加上后，示踪元素即与标本中的PCT结合，这样标记的抗原抗体复合物就结合到固定的抗降钙素抗体上，形成一个“三明治式”的复合物，然后通过发光比色判断出PCT的浓度。该方法比较特异， 无交叉反应，批内、外变异系数分别为7%和8%，整个检测过程可以在2h完成。 金标法 金标法 近年来，实验室多采用一种半定量检测PCT 的金标法用于PCT的检测，是专门制备好的PCT-Q检测卡，简便快捷，整个检测过程不超过30min，结果分为＜0．5μg/L；≥0．5μg/L；≥2．0μg/L和≥10μg/L4个等级。正常人血清PCT值＜0．1μg/L，大多数文献以≥0．5μg/L为阳性阈值。血标本经离心后取20μl血浆或血清滴入反应孔中先与示踪物结合形成明显的抗原抗体复合物，该复合物经虹吸作用通过观察区再与固定的抗－降钙素抗体结合形成夹心复合物。当标本中的PCT浓度≥0．5μg/L时，夹心复合物呈红色带，且颜色深浅与PCT浓度成正比例。此法不依赖仪器、操作简便、快速。 降钙素原的敏感性和特异性 PCT的参考范围 健康人 0.5ng/ml 慢性炎症反应和自身免疫疾病 0.5ng/ml 病毒感染 0.5ng/ml 轻微至中度局部细菌感染 0.5ng/ml SIRS，多发伤，烧伤 0.5-2ng/ml 严重细菌感染，脓毒症，MODS 2ng/ml (通常10-100ng/ml) PCT检测的影响因素 受以下因素影响 * 甲状腺功能 是功能性甲状腺髓样癌的肿瘤标志物 * 肾功能 严重肾功能受损者中水平较高 不受以下因素影响 * 类固醇药物 * 自身免疫性疾病 * 年龄、性別 * 免疫功能低下状态:肝硬化、HIV感染 革兰氏阳性菌与阴性菌PCT浓度比较 临床抗生素的使用 PCT浓度 临床意义 建议 (ng/ml) 0.1 基本没有细菌感染的可能性 不使用抗生素 0.1-0.25 细菌感染的可能性不大 不建议使用抗生素 0.25-0.5 可能存在需要治疗的细菌感染 建议使用抗生素 0.5 很可能存在需要治疗的细菌感染 使用抗生素 PCT的临床意义 细菌感染早期的鉴别诊断。通常在发