微生物限度检查操作规程(中国药典2015版四部通则)详解.doc

标 题 微生物限度检查操作规程 编码：KF-SOP-07-13-2 共 19 页 第 1 页 起 草 人 审 核 人 批 准 人 起草日期 审核日期 批准日期 起草部门 质量管理部 颁发部门 办公室 生效日期 一、范围：本标准规定了微生物限度的检查方法和操作要求；适用于检品需氧菌总数霉菌和酵母菌总数控制菌的检查1105：非无菌产品微生物限度检查：微生物计数法微生物计数法控制菌检查法非无菌药用原料及辅料的微生物限度标准需氧菌总数(cfu/g 或 cfu/ml)霉菌和酵母菌总数(cfu/g 或 cfu/ml)控制菌 药用原料及辅料103 102 * *未做统一规定。微生物限度 品 名 法 定 标 准 内 控 标 准 需氧菌总数(cfu/g 或 cfu/ml)霉菌和酵母菌总数(cfu/g 或 cfu/ml)控制菌需氧菌总数(cfu/g 或 cfu/ml)霉菌和酵母菌总数(cfu/g 或 cfu/ml)控制菌 大肠埃希菌 沙门菌 大肠埃希菌 沙门菌 乳糖 ≤1000 ≤100 — 无 ≤100 ≤50 — — 无水乳糖 ≤100 ≤10 —/10g —/100g ≤100 ≤10 —/10g —/100g 蔗糖 无 无 无 无 ≤100 ≤50 — — (1)．“—”为不得检出。 (2)．目测霉变者以不合格论。 (3)．“无”为标准依据或无相应规定。 标 题 微生物限度检查操作规程 编码：KF-SOP-07-13-2 共 19 页 第 2 页 1.2工艺用水微生物限度 品 名 法 定 标 准 内 控 标 准 需氧菌总数控制菌需氧菌总数控制菌lOO 不得检出 ≤80 不得检出 1.3内包装材料微生物限度 品 名 (单位) 需氧菌总数霉菌和酵母菌总数控制菌需氧菌总数霉菌和酵母菌总数控制菌100cm2) ≤1000cfu ≤100cfu — ≤100cfu ≤10cfu — 说明： 1．“—”为每100 cm2中不得检出。2．目测霉变者以不合格论。3．“无”为标准依据或无相应规定。 2．设施、仪器及用具 2.1、设施： 2.1.1．微生物限度检查室及相关设施：微生物计数试验环境应符合微生物限度检查的要求。检验全过程必须严格遵守无菌操作，防止再污染，防止污染的措施不得影响供试品中微生物的检出。单向流空气区域、工作台面及环境应定期进行监测。 2.1.2．其他设备：高压蒸汽灭菌器；细菌培养箱（30~35℃）；霉菌培养箱（25~28℃）；电炉（或其他适宜的加热装置）；恒温水浴；电热干燥箱（250~300℃）；电冰箱。生化试剂储存箱。 2.2仪器及器皿 2.2.1．菌落计数器；显微镜（1500X）；电子天平或药物天平（感量0.1g）；pH系列比色计。 2.2.2．玻璃器皿：锥形瓶（250~300ml，内装玻璃珠若干）、研钵（玻璃或陶瓷制，∮10~12cm）、培养皿（∮9 cm）、量筒（100 ml）、试管（18×180mm）及塞、吸管（1ml分度0.01， 10 ml分度0.1）、载玻片、盖玻片、玻璃消毒缸（带盖）。 2.2.3新购的玻璃器皿的清洁：先用流水冲洗，浸泡于1%~2%盐酸（工业用）液中约2~6小时，除去游离碱质，再用流水冲洗。用于化学分析的玻璃仪器，需用重铬酸钾清洁液浸泡数分钟后，再用流水冲洗，最后以纯化水涮洗2~3次，晾干备用。 2.3用过的玻璃器皿： 2.3.1未被病原微生物污染的器皿：可随时洗涤。用清水冲洗（或浸泡），除容量仪器外，可用毛刷和肥皂粉，内外刷洗，再用清水涮洗干净，晾干备用。容量仪器宜用清洁液浸泡或涮洗，再用流水冲洗，最后以纯化水涮洗2~3次。 标 题 微生物限度检查操作规程 编码：KF-SOP-07-13-2 共 19 页 第 3 页 2.3.2已被病原微生物污染的器皿：需先经过灭菌处理后再按常法洗涤。 试管及培养皿：先正放或直立于高压蒸汽灭菌器内，经121℃灭菌30 分钟。趁热倾出培养物，再以清水或用毛刷及肥皂粉刷洗，最后以流水涮净。 吸管：全部直立浸没于清洁液的长筒形容器中，筒底应衬有棉或橡皮垫，以防管尖损坏。24小时后，逐支用流水反复冲洗洁净，晾干后包扎灭菌备用。 载、盖玻片：应分别浸泡于清洁液12~24小时后，取出用流水冲洗，再放入3%~5%肥皂水或5%碳酸钠液内煮沸10~15 分钟，待自然冷却后，再用流水冲洗。沥干后置95%乙醇中浸泡，晾干备用。 2，3，3玻璃器皿用前应洗涤干净，无残留抗菌物质。吸管口上端距0.5 cm处塞入约2cm的适宜疏松棉花，置吸管桶内或牛皮纸袋中。锥形瓶、量筒、试管均应加