乙肝两对半精要.ppt

HBV感染的实验室检测是目前国内最为常见的检验项目，也是医患纠纷产生较多的领域之一。 乙肝两对半： 　HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb。 检测结果：定性、半定量、定量。 试剂原材料：抗原（天然抗原、重组抗原）、抗 　体（单抗、多抗、Fab）。 检测技术： 　ELISA、化学发光、时间分辨荧光、免疫层析等。 检测方法：夹心法（一步法，两步法），竞争法（固相－液相竞争法，液相－液相竞争法等）。  一、HBsAg 检测原理 （ELISA法） 方法：双抗体夹心法：两步法。 试剂原材料： HBsAb（ PcAb）或其酶解产物 Fab 。 双抗体夹心法模式： 固相载体 Ab Ag 标记Ab 　两步法检测： 　 固相载体 Ab 标本Ag 标记Ab 阳 性 结 果 形成复合物 　两步法检测： 　 固相载体 Ab 标记Ab 阴 性 结 果 洗版分离洗掉抗原 二、HBsAb检测原理 （ELISA法） 方法：双抗原夹心法：一步法 试剂原材料：预包被HBsAg,配以酶标记抗原（ HBsAg-HRP）及TMB等其他试剂。 双抗体夹心法模式： 固相载体 包被Ag Ab 标记HBsAg 　一步法检测： 　 固相载体 Ag HBsAb 阳 性 结 果 形成复合物 标记HBsAg 洗板 三、HBeAg检测原理 （ELISA法） 方法：双抗体夹心法：一步法 试剂原材料：预包被HBeAb,配以酶标记抗原（ HBseAb-HRP）及TMB等其他试剂。 双抗体夹心法模式： 固相载体 包被Ab 标记HBeAb HBeAg 　一步法检测： 　 固相载体 Ab 血清Ag 标记Ab 阳 性 结 果 形成复合物 洗板 四、HBeAb检测原理 （ELISA法） 方法：竞争抑制法：一步法 固相抗体＋标本＋中和试剂＋标记抗体→分离游离 抗原、抗体→测定固相抗体－抗原－标记抗体提供 的检测信号，判读结果。 竞争抑制法模式： 固相载体 包被Ab 标记HBeAb 中和Ag 血清HBeAb 两抗体共同竞争中和Ag . 固相-液相-液相竞争法 固相载体 rHBeAg 中和试剂 HBeAb（标本） 固相HBeAb 标记HBeAb 阳 性 结 果 固相-液相-液相竞争法检测HBeAb 固相载体 HBeAb HBeAb（标本） 标记HBeAb rHBeAg 中和试剂 阳 性 结 果 固相-液相-液相竞争法检测HBeAb 固相载体 HBeAb 标记HBeAb rHBeAg 中和试剂 阴 性 结 果 　固相-液相-液相竞争法检测HBeAb时，标本中的HBeAg及中和试剂rHBeAg对检测结果的干扰 固相载体 HBeAb（包被） HBeAg(标本） rHBeAg 中和试剂 标记抗体 　固相-液相-液相竞争法检测HBeAb时，标本中的HBeAg及中和试剂rHBeAg对检测结果的干扰 固相载体 HBeAb（包被） HBeAg(标本） rHBeAg 中和试剂 标记抗体 假 阳 性 结 果 五、HBcAb检测原理 （ELISA法） 方法：竞争抑制法：一步法 固相包被抗原＋标本＋标记抗体→分离游离 抗原、抗体→测定固相抗原－标记抗体提供 的检测信号，判读结果。 竞争抑制法模式： 固相载体 包被Ag 标记HBeAb 血清HBeAb 两抗体共同竞争中和Ag 　一步法检测： 　 固相载体 包被Ag HBcAb 阳 性 结 果 形成复合物 标记HBcAb 洗板 　一步法检测： 　 固相载体 包被Ag 阴 性 结 果 形成复合物 标记HBsAg HBcAb的稀释 在乙型肝炎病毒感染过程中,于急性期即可测到很高的抗-HBc,而在急性期过后,核心抗体水平仍保持一定高度,并持续若干年。在慢性感染状态的携带者或病人,核心抗体也常保持高水平。 表面抗原已呈阴性的病人,还可查出抗-HBc阳性。因此单项抗-HBc阳性,难以确定病人是近期感染,还是以前有过感染。通常在乙肝表面抗原出现后3~5周肝炎症状出现前即可在血清中检出。高浓度的乙肝核心抗体阳性常标志乙肝病毒正在复制,有传染性。可持续存在数年至数十年。低浓度的乙肝核心抗体表示乙肝病毒既往感染,常与HBsAb阳性并存。 中国作为乙肝高发区,感染率比较高,再加上前期血源性疫苗的大量应用,一部分接受血源性疫苗的正常人群,在表面抗体产生的同时,核心抗体也会低浓度存在,血清用1/30或者1/50稀释后就为阴性,这有利于统计乙肝感染率,做流行病学调查使用,而急性或慢性乙肝感染者等即使用1/30或者1/50稀释后仍然高浓度存在,这样更有利于临床诊断。 继续添加其他项目的解释！ * * 继续添加其他项目的解释！