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垂吊矮牵牛的组织培养 陆燕 （甘肃农业大学生命科学技术学院生物制品专业，甘肃 兰州，730070） 摘要：研究了不同浓度配比的NAA,6-BA对垂吊矮牵牛组织培养过程中愈伤组织增殖,芽分化和生根的影响。结果表明: MS+NAA0.2mg/L+6-BA1.0mg/L培养基对愈伤组织增殖效果最好;最佳的分化培养基MS+6-BA1.0+NAA0.5;而生根的培养基可选1/ 2MS+NAA1.0 关键词:垂吊矮牵牛;植物组织培养;NAA;6-BA Tissue Culture of Petunia hybrida LU Yan (Major in biology in the College of of Gansu Agricultural University,Gansu Lanzhou,730070) Abstract: The effects of different concentration NAA and 6-BA on callus proliferation ,bud initiation and striking root of Petunia in tissue culture are analyzed in this paper. The result showed that:MS medium suppaimented with 0.2mg/L NAA and 3.0mg/L 6-BA had the best effect on callus growth ;the preferable media is MS medium supplemented with 1. 0~1.5mg/L 6-BA and 0.3~0.5mg/L NAA and the preferable medium of rooting is 1/2MS medium supplemented with 0.5~1.0mg/L NAA Key words: Petunia hybrida;plant tissue culture;NAA;6-BA 前言 矮牵牛(Petunia hybrida)又名碧冬茄,为茄科一、二年生草本花卉;早春及初夏开花不断,花团锦簇,颜色丰富多彩,是常用的花坛布置或盆栽室内装饰布置、立体装饰花卉。 随着城市绿化中使用花卉的比重越来越大,因矮牵牛具有良好的装饰效果及栽培管理较为粗放等特点,使其备受人们的青睐,市场需求量持续上升。 矮牵牛的常规繁殖采用种子繁殖或扦插。但用种子繁殖,其后代性状易分离退化;使用扦插法繁殖系数低、出苗不整齐。而组织培养以其繁殖系数大、繁殖周期短、成本较低、可周年进行生产等优点,弥补了常规繁殖的不足,能在较短的时间内生产量多、质优的苗木,满足市场的需要。因此,选择适宜的培养条件进行矮牵牛的组织培养研究,对推动其组培的产业化,达到苗木生产的快速、经济的目的具有非常重要的意义。 一、材料与方法 （一）材料 垂吊矮牵牛植株从花卉市场购买，试验时尽量选用生长健壮、干净无病虫害的幼嫩叶片作为试验材料。 （二）方法 1、外植体制备 取生长健壮、洁净且无病虫害的厚实肥壮的垂吊矮牵牛幼叶, 用自来水冲洗6小时, 然后转移到超净净工作台，用75%的酒精浸泡15s，用无菌水冲洗3次。再用0.1%升汞液处理5min，并用无菌水冲洗3次，无菌吸水纸吸干，然后切割成8mmⅹ8mm 的叶块。 2、培养基配置 2.1 愈伤组织培养基的配置 培养基编号 6-BA浓度 NAA浓度 1 1.0mg/L 0.2mg/L 2 2.0mg/L 0.2mg/L 3 3.0mg/L 0.2mg/L 4 1.0mg/L 0.3mg/L 5 2.0mg/L 0.3mg/L 6 3.0mg/L 0.3mg/l 上述培养基均以MS为基本培养基, 培养基中蔗糖含量为3%, 琼脂含量为0.8%, pH值为5.8-5.9。通过利用6-BA和NAA两种激素的浓度不同来配置垂吊矮牵牛愈伤组织的诱导培养基。 2.2 芽增殖培养基的配置 利用不同激素种类对芽进行增殖，将诱导阶段中得到的芽体转接到分化增殖培养基中,在不同的培养基中重复两次，观察其生长。 （1）、1/2MS （3）、1/2MS+6-BA1mg/（2）、1/2MS+kt1mg/ (1)1/2MS+NAA0.05mg/L (2)1/2MS+IBA0.05mg/L (3)1/2MS+C 3、培养条件 培养在25℃±1℃的恒温光照培养箱里。 二、 结果与分析 （一）不同浓度的NAA、6-BA1、23、4、5、6,切口周围出现浅绿色的愈伤组织，且叶片整体变厚呈拱形弯曲。经过进一步观察发现3、45、615天左右后，1、23、45、6NAA、6-BA对矮牵牛愈伤组织增殖的影响 培养