小鼠急性毒性实验及文献资料.docVIP

苏贝止咳小鼠急性毒性实验【摘要】苏贝止咳颗粒组方来自民间验方，该方在临床使用多年，疗效确切，安全可靠。具有散寒宣肺，祛痰、止咳、平喘之功，用于急性气管、支气管炎（风寒袭肺证）所致的咳嗽、咳痰稀薄、咽痒、气急等症状。根据该方的功能主治、各味药材的理化性质和验方汤剂的临床应用实践，我们对其进行了止咳、祛痰、抗炎、解热、抗病毒、抗菌等主要药效学实验研究苏贝止咳颗粒苏贝止咳浸膏小鼠口服急性毒性实验测不出LD50，从而进行小鼠ig最大给药量实验，单次最大给药剂量164g生药/kg，单次最大给药容积为0.8mL/20g，24h内给药3次，连续观察13天，所观察的各项指标均正常，未见动物死亡。苏贝止咳浸膏小鼠一日口服最大给药剂量为492g生药/kg，相当于临床拟用量的424.1倍。表明苏贝止咳浸膏急性毒性较低提示苏贝止咳浸膏在临床上急性用药具有一定的安全性。 【实验目的】观察苏贝止咳浸膏的小鼠急性毒性。 【供试品】 1.名称：苏贝止咳浸膏，含量规格及配置：4.1g生药/每毫升浸膏，人用临床拟用剂量81g生药/d。采用小鼠灌胃给药，以最大给药剂量164g生药/kg，最大给药容积为0.8mL/20g，24h内给药3次。剂量、给药途径设置依据：参考临床拟用途径，中药、天然药物急性毒性研究技术指导原则。 2.提供单位：安徽省药物研究所中药二室 3.批号：。 4.单次剂量：164g生药/kg，给药容积为0.8mL/20g。 5.生理盐水组：氯化钠注射液，由安徽丰原药业股份有限公司无为药厂提供，批号：。按给药容积为0.8mL/20g给予生理盐水溶液。剂量、给药途径设置依据：参考临床拟用途径，中药、天然药物急性毒性研究技术指导原则。 6.配制：原药液直接给药。 【动物】 1.来源，种属，品系，合格证：由安徽省实验动物实验中心提供，SPF级昆明种小鼠，远交封闭系，动物合格证：。 2.体重：18～22g 3.性别：雌雄各半4.动物数：50只，每笼5只饲养； 5.实验环境：实验室温度20～26℃，相对湿度40%-70%，昼夜明暗交替。实验动物使用许可证号：SYXK（皖）20-001。 6.颗粒饲料：由南京安立默科技有限公司提供。 7.垫料：由南京安立默科技有限公司提供。 8.饮用水：饮用无菌水，来源安徽省药物研究所，LAWS实验动物无菌饮用水仪器编号：YQ-14。 【实验方法】 1.动物识别 年龄鉴别方法：见表二和表三 表二：小鼠出生后不同时间的外观及形态特征　表三：不同日龄的小鼠体重情况 日龄（d） 外观形态特征 1 仔鼠裸体鲜红 3 耳朵露出表皮 4 脐带疤痕脱落 5 能翻身 8 能爬行 10 能听到声音 9－11 全身被上白毛，门齿突出 13－15 眼皮张开，能跳跃，能抓到东西 18以后 能自行采食，独立生活 日龄（d） 体重（g） 初生 1.8 5 4.0 10 6.0 15 11.0 20 15.0 25 21.0 30 21.0 小鼠性别鉴别： 幼年：肛门与生殖器的距离远近，近的为雌性，远的为雄性。 成年：雄性可见明显的阴囊，生殖器突起较雌鼠大，肛门和生殖器之间长毛。雌性生殖器与肛门之间有一无毛小沟，距离较近，此外雌性小鼠2-13日龄可见乳头出现，此后乳头逐渐被毛遮掩。 2.小鼠LD50预试 随机取小鼠10只，雌雄各半,分笼饲养，禁食（自由饮水）12h后，每鼠ig给予苏贝止咳浸膏(164g生药/kg) 0.8mL/20g，如首次给药未见死亡，24h内可给药3次，饲养观察3天。 3.小鼠最大给药量实验 取小鼠40只，雌雄各半禁食（自由饮水）12h后，每鼠ig给予苏贝止咳浸膏（164g生药/kg) 0.8mL/20g，24h内以同等剂量重复给药3次，对照组给予等体积的生理盐水，连续饲养观察13天。毒性反应情况灌胃前1天 灌胃当天灌胃后第1天灌胃后第3天灌胃后第5天灌胃后第7天灌胃后第9天灌胃后第11天灌胃后第13天灌胃后第1天系统尸解和病理组织学检查 系统尸解 对进行。病理组织学检查。病理组织学检查 脏器病理组织学检查：脑、心、肝、胰腺、脾、肺、气管、唾液腺、胸腺、肾、肾上腺、食管、胃、小肠、前列腺、睾丸、附睾、卵巢、子宫、乳腺、膀胱、脊髓、胸骨骨髓。各器官样本均用10%甲醛固定，常规石蜡包埋切片，HE染色，光镜检查并摄片。【统计学处理】计量资料均以(s表示，比较组间差异用SPSS11.0软件包单因素方差分析。 【结果】 1.小鼠LD50预试 小鼠3次给予苏贝止咳浸膏(164g生药/kg) 0.8mL/20g后，未见小鼠死亡，提示小鼠一日3次给予苏贝止咳浸膏做不出半数致死量。 2.小鼠最大给药量实验 2.1 动物毒性反应情况：给药组小鼠在每次给药后活动相对减少，精神欠佳，饮食减少，大便次数增加，3～5小时后恢复，毛发