第八免疫学应用精要.ppt

第八章 免疫学应用 免疫学检测技术 抗原或抗体检测 免疫细胞及其功能检测 免疫学预防 人工主动免疫 人工被动免疫 免疫治疗 免疫增强剂 免疫抑制剂 第一节 免疫学检测技术 一、抗原或抗体检测 抗原抗体反应的特点： 特异性 可逆性 可见性 抗原抗体反应的影响因素 １、凝集反应： 颗粒性抗原＋相应抗体 →凝集块 细菌、细胞等颗粒性Ag或表面包被抗原的颗粒状物质与相应Ab在电解质存在的情况下结合，出现肉眼可见的凝集团现象。 包括：直接凝集反应、间接凝集反应、反向间接凝集反应、协同凝集反应等。如血型鉴定、肥达试验等。 3、免疫比浊法 　　抗体（Ab）与可溶性抗原（Ag）反应，形成一定结构的免疫复合物，成为悬浮于反应溶液中的微粒。在沉淀反应中形成的复合物微粒具有特殊的光学性质，可用仪器检测，提高了检测的速度、灵敏度和易操作性。 4、免疫标记技术 　　免疫标记技术是将已知抗体或抗原标记上易显示的物质，通过检测标记物来反应抗原抗体反应的情况，从而间接地测出被检抗原或抗体的存在与否或量的多少。常用的标记物有荧光素、酶、放射性核素及胶体金等。免疫标记技术具有快速、定性或定量甚至定位的特点，是目前应用最广泛的免疫学检测技术。 二、免疫细胞及其功能检测 1、T细胞及其亚群检测： 目前多采用荧光免疫法，通过检测T细胞表面的CD抗原来了解外周血T细胞及其亚群的百分率。 2、淋巴细胞转化试验： T细胞受到特异性抗原或有丝分裂原刺激后发生增殖，可通过以下方法检测： 形态计数法：活化细胞体积增大、形态不规则、胞质增多、细胞核松散及出现较多核仁； 3H-TdR或125I-UdR掺入法：3H-TdR能掺入到合成的DNA中，用液体闪烁仪检测样品的放射活性，特点是灵敏可靠，但须特殊仪器，易有放射性污染。 3、B细胞检测 采用免疫荧光技术直接法，通过检测Smlg来了解B细胞的数量。 4．细胞因子检测 （1）免疫学检测法 （2）生物活性检测法 （3）分子生物学检测法 第二节 免疫学预防 根据特异性免疫应答的原理，采用人工方法将Ag/Ab制成各种制剂，接种于人体，使其产生/获得特异性免疫力，达到预防某些疾病的目的。 分为：人工主动免疫 人工被动免疫 一、人工主动免疫： 是给机体输入疫苗或类毒素等抗原物质，剌激机体产生特异性免疫力。 1、死疫苗：用物理或化学的方法将病原微生物杀死制备而成的制剂。又称灭活疫苗。如乙脑疫苗、百日咳疫苗。 2、活疫苗：用人工变异或从自然界筛选获得的减毒或无毒的活的病原微生物制成的制剂。又称减毒活疫苗。如卡介苗、麻疹疫苗、风疹疫苗、脊髓灰质炎疫苗等 3、亚单位疫苗：如乙肝疫苗、流感疫苗。 4、基因工程疫苗:重组疫苗(乙肝疫苗);重组载体疫苗; DNA疫苗;转基因植物疫苗 5、合成疫苗： 6、类毒素：如白喉类毒素、破伤风类毒素。 二、 人工被动免疫 人工被动免疫注意事项： 注意防止超敏反应 早期和足量 不滥用丙种球蛋白 应用范围：易感人群、患者 人工主动免疫与人工被动免疫的区别 第三节 免疫治疗 概念： 根据免疫学原理，应用物理、化学和生物学的方法增强或抑制机体的免疫机能，人为地纠正免疫异常状态，达到治疗的目的的措施。 主要用于抗移植排斥反应、超敏反应性疾病、自身免疫性疾病及感染性炎症。 复习题： 1、ELISA间接法的检测原理 2、比较人工主动免疫与人工被动免疫的区别 一、免疫增强剂（IPA） 是增强、促进和调节机体免疫功能的生物或非生物制剂。主要用于恶性肿瘤、免疫缺陷病和传染病的辅助治疗。 免疫增强剂分类 茯苓多糖、人参多糖 多糖类制剂 左旋咪唑、西咪替丁 化学药物 卡介苗、短小棒状杆菌、脂磷壁酸 微生物制剂 IL-2、TNF、IFN 细胞因子制剂 举 例 分 类 二、免疫抑制剂