第三次网织红细胞压积血沉精要.ppt

网织红细胞计数 目的 掌握计数原理、操作方法、注意事项 原理 胞质内残存核糖核酸等嗜碱性物质，经煌焦油蓝等染液活体染色后，在显微镜下呈蓝色网状或点状结构，可与成熟红细胞相区别。 器材 显微镜、试管、玻片、推片、香柏油、拭镜纸、清洁液、（Miller窥盘） 试剂 煌焦油蓝染液（10g/l） 标本 新鲜全血 操作步骤 1 加染液 将Ret染液2滴加至小试管中，做好标记 2 加血 在已加入染液的小试管内注入新鲜全血2滴，立即混匀 3 染色 室温下染色10min 4 涂片制备 取染色血1小滴推制成薄血涂片，自然干燥 5 观察 低倍镜下选择红细胞分布均匀、着色好、背景清晰的部位进行计数 6 计数 常规法 7 计算 Ret百分数=（1000个RBC中的Ret数/1000）×100% 8 结果报告 网织红细胞百分数：X.X% 注意事项 1. 试剂准备 推荐使用新亚甲蓝染液，试剂应定期配制，用前过滤。 2. 染色 染液与血液比以1:1为宜。 3. 标本 应及时染色，及时测定。 4. 计数 选择红细胞分布均匀，网织红细胞着色好的、背景清晰的部位计数，注意与HbH包涵体相鉴别。 作 业 试分析本实验的关键环节。 * * 血液沉降率、血细胞比容测定、网织红细胞计数 临床检验诊断学教研室 目的 掌握魏氏法测定血沉的原理及方法。 原理 将一定量的枸橼酸钠抗凝全血置于魏氏血沉管中，直立于血沉架上，由于红细胞比重大于血浆，克服血浆阻力而下沉，1h后读取上层血浆高度的毫米数。 器材 魏氏管、血沉架、洗耳球。（血沉管） 试剂 109mmol/L枸橼酸钠溶液。 标本 外周血。 一、血液沉降率测定（魏氏法） 1.加抗凝剂 取109mmol/L枸橼酸钠溶液0.4ml加入试管中 2.采血 采静脉血1.6ml加入含抗凝剂的试管中，混匀 3.吸血 混匀血吸入血沉管内至刻度“0”处，拭去管外残余血 4.立血沉管 将血沉管直立于血沉架上 5.读数 1h末准确读取红细胞下沉后露出的血浆高度 6.报告方式 XX mm/h 操作 一、血液沉降率测定（魏氏法） 注意事项 1.严格控制采血量，使抗凝剂与血液比例为1：4。 2.血沉管放置要垂直，不得倾斜。 3.测量时，血沉架应避免直接光照、移动和振动。 4.本实验最适宜温度为18～25℃，并要求在采血后2h内完成。 5.红细胞沉降率在1h沉降过程中，并不是均衡等速度的沉降，绝不可以只观察30min沉降率，将结果乘以2作为1h血沉结果。 一、血液沉降率测定（魏氏法） 参考值 ①成年男性：0～15mm／h。 ②成年女性：0～20mm／h。 一、血液沉降率测定（魏氏法） 二、血细胞比容测定（温氏法） 目的：掌握温氏法的原理、操作方法及注意事项 原理：将定量的抗凝血以一定的速度和时间离心后，血液中的各种成分互相分离，计算压实红细胞占全血的比值，即为血细胞比容。 器材 专用离心机、专用毛细管、微量吸管、胶吸头、棉签 标本 EDTA或肝素抗凝静脉血 操作步骤 1 采血 将抗凝血吸入专用毛细管中，避免气泡产生 2 加血 用细长毛细滴管吸取混匀的抗凝血，插入温氏管底部，然后将血液缓慢注入至刻度“10”处，并用小橡皮塞塞紧管口 3 离心 RCF2264g离心30min，读取压实红细胞层柱高的毫米数，然后再以同样速度离心10min，至红细胞层高度不再下降为止 4 读数 以还原红细胞层表面为准，读取红细胞层柱高的毫米数，乘以0.01，即为HCT值 5 报告结果 血细胞比容：0.XX 操作步骤 注意事项 1 抗凝剂 2 标本采集 3 标本处理 4 溶血的情况 *