第二菌种的来源精要.ppt

* 3. 二级种子(种子罐) 培养条件：在种子罐中培养（容积为发酵罐的1%(10%)）， 32℃培养7-10个小时 培养基：和一级种子相似，其中葡萄糖用水解糖代替，浓度为2.5% 培养基的特点：长菌体，更接近于发酵培养基 种子扩大培养的目的与要求 2.4 微生物菌种的扩大培养 种子的质量要求： 108-109个/ml 大小均匀，呈单个或八字排列 PH 7.0-7.2时结束，6.8→8→7.0-7.2 活力旺盛 种子扩大培养的目的与要求 2.4 微生物菌种的扩大培养 二、青霉素生产的种子制备 制备过程 安培管 → 斜面孢子 → 大米孢子 → 一级种子 → 二级种子 → 发酵 种子扩大培养的目的与要求 2.4 微生物菌种的扩大培养 1、斜面孢子 培养基：甘油、 葡萄糖、 蛋白胨等 培养基特点：有利于长孢子，用量少而精细 培养条件：25℃、7天, 注意湿度50%左右 种子扩大培养的目的与要求 2.4 微生物菌种的扩大培养 2、大米孢子 培养基：大米及氮源（玉米浆） 培养基的特点：成本低、米粒之间结构疏松提高比表面积和氧的传质，营养适当（要求大米的白点小）有利于孢子的生长。 培养条件：25℃、7天，控制湿度 大米孢子的要求：1粒米含1.4*106个孢子 种子扩大培养的目的与要求 2.4 微生物菌种的扩大培养 3、一级种子 培养基：（葡萄糖、乳糖、蔗糖）、玉米浆 目的：长菌体 培养条件：27℃，40小时 接种量：200亿孢子/吨 4、二级种子 培养基：同上 培养条件：27℃、10-14小时 接种量：10% 种子扩大培养的目的与要求 2.4 微生物菌种的扩大培养 种子的质量要求 菌丝长稠呈丝状、菌丝团很少，有中小空孢，处于Ⅲ—Ⅳ期 青霉素发酵菌丝体的生长共分为6个期，1-4为年青期，4-6期合成青霉素的能力最强 种子扩大培养的目的与要求 2.4 微生物菌种的扩大培养 2.4.1 种子的制备 在发酵生产过程中，种子制备的过程大致可分为两个阶段： （1）实验室种子制备阶段 （2）生产车间种子制备阶段 实验室阶段：不用种子罐，所用的设备为培养箱、摇床等实验室常见设备，在工厂这些培养过程一般都在菌种室完成，因此现象地将这些培养过程称为实验室阶段的种子培养。 生产车间阶段：种子培养在种子罐里面进行，一般在工程归为发酵车间管理，因此形象地称这些培养过程为生产车间阶段。 2.4.1 种子的制备 2.4.1 种子的制备 实验室种子的制备 根据菌种的生理生长特性不同，菌种状态不同： -对于产孢子能力强的及孢子发芽、生长繁殖快的菌种可以采用固体培养基培养孢子，孢子可直接作为种子罐的种子，这样操作简便，不易污染杂菌。如：青霉素产生菌产黄青霉菌。 -对于产孢子能力不强或孢子发芽慢的菌种，可以用液体培养法。 目的：为种子罐提供种子。 2.4.1 种子的制备 实验室种子的制备 -对于不产孢子的细菌，如谷氨酸棒杆菌（Corynebacterium），斜面菌种经活化接入茄子瓶斜面或三角瓶液体培养，作为种子； -酵母菌：麦芽汁琼脂斜面逐级扩大培养到10ml液体试管、250ml三角瓶、1000ml三角瓶，即可作为100L麦芽汁种子罐的种子。 2.4.1 种子的制备 实验室种子的制备 （一）孢子的制备 细菌孢子的制备 细菌的斜面培养基多采用碳源限量而氮源丰富的配方。 培养温度一般为37℃。 细菌菌体培养时间一般为1~2天，产芽孢的细菌培养则需要5~10天。 霉菌孢子的制备 霉菌孢子的培养一般以大米、小米、玉米、麸皮、麦粒等天然农产品为培养基。 培养的温度一般为25~28℃。 培养时间一般为4~14天。 放线菌孢子的制备 放线菌的孢子培养一般采用琼脂斜面培养基，培养基中含有一些适合产孢子的营养成分，如麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些无机盐等。 培养温度一般为28℃。 培养时间为5~14天。 2.4.1 种子的制备 实验室种子的制备 （二）液体种子制备 好氧培养 对于产孢子能力不强或孢子发芽慢的菌种，如产链霉素的灰色链霉菌（S. griseus）、产卡那霉素的卡那链霉菌（S. Kanamuceticus）可以用摇瓶液体培养法。 将孢子接入含液体培养基的摇瓶中，于摇瓶机上恒温振荡培养，获得菌丝体，作为种子。其过程如下： 试管→三角瓶→摇床→种子罐 厌氧培养 对于酵母菌（啤酒，葡萄酒，清酒等），其种子的制备过程如下： 试管→三角瓶→卡式罐→种子罐 发酵罐种子 制备流程 ： ???????