14章棒状杆菌(检验)分析.ppt

共同特性 G+杆菌、一端或两端膨大成棒状 染色不均匀，两端浓染或有异染颗粒 无鞭毛、无芽胞 排列不规则，呈栅栏状 白喉棒状杆菌——致病菌 所致疾病 ——白喉（急性呼吸道传染病） 传染源：患者及带菌者 传播途径：飞沫或污染的物品 临床表现： 局部炎症：炎性渗出，坏死，纤维蛋白 →→假膜→→窒息 全身中毒症状 外周N---N炎：膈肌麻痹---呼吸困难 声带麻痹---声音嘶哑 咽肌麻痹---吞咽困难 心肌---心肌炎 白喉假膜 二、生物学特性 ㈠形态与染色: G+细长微弯的杆菌 一端或两端膨大呈棒状 常排列呈V、L、X等文字形 异染颗粒——形态上的鉴别特征 无荚膜、无芽胞、无鞭毛 ㈡培养特性 营养要求高 吕氏(Loeffler)血清斜面或鸡蛋斜面： 形成灰白色、湿润、有光泽的光滑型菌苔/菌落 三、微生物学检验 ㈠检验程序 见图14-3 ㈡标本采集 分泌物，取双份 ㈢直接涂片染色镜检： 2～3张涂片→革兰染色、异染颗粒染色 镜检——初报“直接涂片检出形似白喉杆菌”——早期诊断 用无菌棉拭子浸以动物血清，采集标本，37℃10h，涂片染色镜检——提高阳性率 ㈣分离培养与鉴定 1、分离培养 吕氏血清斜面： 37℃、8～12h →→涂片染色镜检 --检出率要比直接涂片高，有助于快速诊断 亚碲酸钾BAP： 37℃、24～48h，黑色菌落 BAP： 轻型有β溶血环，应注意与溶血性链球菌鉴别 2、鉴定 形态染色、菌落特点、生化反应 糖发酵试验、尿素酶、硝酸盐还原 —鉴别棒状杆菌属不同的种 3、毒力试验（鉴定致病菌株的重要依据） 体外法： 琼脂平板毒力试验（Elek平板毒力测定） SPA协同凝集试验 对流电泳 体内法 ： 用豚鼠作毒素-抗毒素中和试验 （五）免疫力测定 1、锡克试验（Schick test）——白喉外毒素皮内试验 调查人群在感染或预防接种后对白喉是否产生免疫力 根据外毒素与抗毒素中和的原理，以少量白喉外毒素测定机体有无相应抗毒素 缺点—观察时间长、操作繁琐，不易进行广泛测试 * * 种类 白喉棒状杆菌（C.diphtheriae） 假白喉棒状杆菌（C.pseudodiphtheriticum） 干燥棒状杆菌（C.xerosis） 化脓棒状杆菌（C.pyogenes） 溃疡棒状杆菌（C.ulcerans） 假结核棒状杆菌（C.pseudotuberculosis） 溶血棒状杆菌（C.haemolyticum） J-K群棒状杆菌（C.jeikeium-CDC group JK） 第14章 棒状杆菌属 致病物质 1、白喉外毒素 毒力强 抗原性强 编码外毒素的tox基因——β-棒状杆菌噬菌体 一、临床意义 第一节 白喉棒状杆菌 C.diphtheriae 作用机制： ----影响蛋白质的合成 作用特点： 作用于多种细胞，心肌、神经细胞均有毒素受体 肿瘤细胞对此毒素敏感 2、索状因子 细菌表面的一种糖脂，能破坏细胞的线粒体，影响细胞的呼吸与磷酸化 3、K抗原 细胞壁外面的一种不耐热糖蛋白 抗吞噬 有利于细菌在黏膜表面的定植 感染后机体可获得牢固的免疫力 机体还可通过其它方式获得免疫力： 六月以下婴儿---------母亲 成人-----------隐性感染、人工主动免疫 易感者： 2~4岁儿童 成人---也有可能 免疫性： 白喉棒状杆菌异染颗粒 1000× BAP中菌落 BAP（血琼脂平板） 菌落灰白色、光滑型， 直径1～2mm、有狭窄β溶血环（轻型） 多次传代后菌体变为球形 亚碲酸钾BAP（选择鉴别培养基） 黑色菌落——鉴别依据 根据菌落特征及生化反应特点可将本菌分为：重型、中间型、轻型 不同菌型还原能力不同，呈现黑色或灰黑色菌落 白喉棒状杆菌 在亚碲酸钾BAP中菌落 毒力试验 患者或带菌者咽喉、鼻咽拭子等 直接涂片染色镜检（单染或G 染色+异染颗粒染色） 吕氏血清斜面35℃12～18h 亚碲酸钾BAP、35℃24～48h BAP35℃16-18h 涂片染色镜检(G染色和异染颗粒染色） 观察菌落特点 吕氏血清斜面 生化反应 涂片染色镜检 检验程序 对流免疫电泳 琼脂平板毒力试验-Elek平板 白喉抗毒素 待测菌 白喉抗毒素 标准产毒株 阴性菌(-) 待测菌(+) 待测菌(-) 2、致敏红细胞凝集试验 测定血清中抗毒素水平 0.1ml血清，倍比稀释+外毒素致敏红细胞，37℃、1h后观察结果 敏感度可达10-4单位，简便快速 （二）结膜干燥棒状杆菌（C. xerosis） （三）化脓棒状杆菌（C.