YK1302005-00微生物限度检查SOP.docVIP

起 草： 日期： 审 核： 日期： 批 准： 日期： 生效日期： 签字： 拷贝号： 变更记载： 制定（变更）原因及目的： 规范微生物限度检查方法，保证检验结果的准确。 修订号 批准日期 生效日期 分发部门 副 总 办 [ 0 ]份 质量管理部 [ 1 ]份 质量管理部QC [ 1 ]份 质量管理部QA [ 1 ]份 生产技术部 [ 0 ]份 固体制剂车间 [ 0 ]份 物 资 部 [ 0 ]份 设备动力办 [ 0 ]份 财 务 部 [ 0 ]份 财务总监办 [ 0 ]份 总 助 办 [ 0 ]份 行政人事部 [ 1 ]份 微生物限度检测SOP 适用范围 本操作规程适用于本公司各品种微生物限度检测。 职责 QC卫生学检验员：严格按SOP进行检验。 QC主管：监督检查执行情况。 内容 抽样和样品保存 按批号随机抽样，抽样量为检验用量（2个以上最小包装单位）的3倍量。 抽样时，凡发现有异常或可疑的样品，选取有疑问的样品，但机械损伤、明显破裂的包装不得作为样品。 凡能从药品瓶口（外盖内侧及瓶口周围）外观看出长螨、发霉、虫蛀及变质的药品可直接判为不合格品，无须再抽样检验。 供试品在检验之前，按产品贮存要求保存，严禁开启，勿冷藏或冷冻。 供试品在检验之前，保持原包装状态，严禁开启，已开启样品不得作为供试品。 主要仪器及设备 恒温培养箱、生化培养箱、恒温水浴锅、电冰箱、层流罩、生物显微镜、放大镜、微波炉、电热恒温干燥箱、高压灭菌锅、药物天平、紫外分析仪。 培养基、稀释剂、试液、指示液 培养基：干燥培养基根据说明配制。 0.9%氯化钠溶液：取氯化钠9.0g，加水溶解使成1000ml，121℃灭菌20分钟。 草酸铵试液：取草酸铵1g，加水溶解使成100ml。 亮绿试液：取亮绿0.1g，加水100ml使溶解。 盐酸试液：取盐酸8.4ml，加水稀释成100ml。 a-萘酚乙醇试液：取a-萘酚6.0g，加无水乙醇溶解使成100ml。 氰化钾试液：取氰化钾0.5g，加水溶解使成100ml。 靛基质试液：取对二甲氨基苯甲醛5.0g，加入戊醇（或丁醇）75ml，充分振摇，使完全溶解后，再取浓盐酸25ml徐徐滴入，边加边振摇，以免骤热异致溶液色泽变深，或取对二甲氨基苯甲醛1.0g，加入95%乙醇95ml，充分振摇，使完全溶解后，取浓盐酸20ml徐徐滴入。 中性红指示液：取中性红1.0g，研细，加95%乙醇60ml使溶解，再加水至100ml（变色范围：pH6.8~8.0（红→黄）。 甲基红指示液：取甲基红0.1g，加95%乙醇300ml，使溶解后，加水至500ml。 亚甲蓝指示液：取亚甲蓝0.5g，加水溶解使成100ml。 酚磺酞指示液：取亚甲蓝0.5g，加1mol/L氢氧化钠溶液2.82ml，使溶解，再加水至100ml（变色范围：pH6.8~8.4黄→红） 溴甲酚紫指示液：取溴甲酚紫1.6g，加95%乙醇溶解使成100ml（变色范围：pH6.0~7.6黄→蓝）。 酸性品红指示液：取酸性品红0.5g，加水100ml使溶解，再逐渐加1mol/L氢氧化钠溶液16ml，每加1滴均应将溶液充分摇匀后再加第2滴，直至溶液呈草黄色；于沸水内保持15分钟，再静置2小时，滤过，即得。（变色范围：pH6.0~7.4黄→红）。 曙红钠指示液：取曙红钠2.0g，加水溶解使成100ml。 结晶紫染色液：取结晶紫1.0g，溶于95%乙醇20ml中，与1%草酸铵水溶液80ml混合，静置48h，即得。 碘液：取碘化钾2.0g加少量水溶解后，再加碘片1.0g，待全部溶解后，加水稀释至300ml，即得。 脱色液：95%乙醇。 沙黄染液：取沙黄0.25g，溶解于95%乙醇中，待完全溶解后加水至100ml，即得。 3.4 试验前准备 3.4.1将供试品及所有已灭菌的平皿、吸管（1ml、10ml）、稀释剂等移至传递窗内。准备好足够用量，避免操作中出入操作间。 3.4.2 开启层流罩和臭氧发生器60min，关闭后30 min进入。 3.4.3操作人员用肥皂涂在双手上揉搓15s，用流水彻底冲洗，脱鞋，进入第一缓冲间，关上门，再用0.1%新洁尔灭溶液浸洗双手1 min，用消毒毛巾擦干。进入第二缓冲间，关门。穿戴无菌工作服（包括鞋、帽、口罩），进入操作室，关闭操作室门，从传递窗口移进用具及检品，关闭传递窗内侧门。 3.4.4 操作前先用75%乙醇棉球擦手，再用乙醇棉球擦拭供试品瓶、袋等的开口周围，待干后用灭菌剪刀或镊子将供试品启封。 3.5 供试液的制备：按供