专题五,专题六.要点.ppt

2．(2014·北京，5)关于高中生物学实验的基本原理，叙述不正确的是 (　　) A．噬菌体须在活菌中增殖培养是因其缺乏独立的代谢系统 B．提取组织DNA是利用不同化合物在溶剂中溶解度的差异 C．成熟植物细胞在高渗溶液中发生质壁分离是因为细胞壁具有选择透(过)性 D．PCR呈指数扩增DNA片段是因为上一轮反应的产物可作为下一轮反应的模板 3．(2013·江苏，4)某同学用洋葱进行了DNA粗提取和鉴定实验，操作错误的是(　　) A．加入洗涤剂后用力进行快速、充分的研磨 B．用蛋白酶纯化过滤后的研磨液中的DNA C．加入酒精后用玻璃棒轻缓搅拌 D．加二苯胺试剂摇匀后沸水浴加热 　 一、DNA和蛋白质技术 1．DNA的粗提取与鉴定 (1)提取原理：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中________不同，在NaCl溶液浓度为__________时，DNA的溶解度最小；DNA不溶于________，但是细胞中某些蛋白质则溶于酒精。 DNA与蛋白质在不同NaCl溶液中溶解度不同 1)DNA溶解度与NaCl浓度的关系(如图)。 2)两次用蒸馏水的目的不同：第1次是使红细胞吸水涨破。第2次是降低NaCl浓度，析出DNA。 (2)具体步骤： ①选取实验材料：选取富含_____的组织，如鸡血细胞、菜花等。 ②破碎细胞，________：如用鸡血细胞就置于清水中使之________，并用玻璃棒________搅拌，过滤取滤液。 ③去除滤液中的杂质：高浓度的_________溶解细胞核内的DNA；加蒸馏水降低NaCI溶液浓度，使________析出、过滤；将DNA丝状物再溶解、过滤。 ④DNA的初步纯化：向滤液中加入体积分数为95%的________溶液进行提纯。 (2)结果： ①PCR一般要经历________多次循环，每次循环可以分为________、复性和________三步。 ②两引物间固定长度的DNA序列呈________扩增(即____________)。 .比较细胞内DNA复制与体外DNA扩增(PCR) 3．血红蛋白的提取和分离实验 (1)常用的分离方法：________法、凝胶电泳法等。 (2)基本原理： ①凝胶色谱法：也称____________，是根据____________________分离蛋白质的有效方法。 ②电泳：利用待分离样品中各种分子________的差异以及分子本身的大小、________的不同，使带电分子产生不同的迁移速度。 (4)血红蛋白的分离方法及相关原理 3.分离DNA、PCR技术、分离蛋白质三者比较(p299) 3．胡萝卜素的提取 (1)胡萝卜素性质：________水，微溶于乙醇，________石油醚等有机溶剂。 (2)提取方法及流程： ①方法：________法，________最适宜作萃取剂。 ②实验流程： 胡萝卜→粉碎→______→萃取→______→浓缩→胡萝卜素。 (3)鉴定方法：________法。 1.(2015·南京质检)下列关于DNA粗提取与鉴定实验的叙述，正确的是(　　) A．洗涤剂能瓦解细胞膜并增加DNA在NaCl 溶液中的溶解度 B．将DNA丝状物放入二苯胺试剂中沸水浴后冷却变蓝 C．常温下菜花匀浆中有些酶类会影响DNA的提取 D．用玻棒缓慢搅拌滤液会导致DNA获得量减少 答案　C 解析　洗涤剂可瓦解植物细胞膜，利于释放DNA ，但不能增加DNA在NaCl溶液中的溶解度，A项错误；含DNA的丝状物应先溶解在物质的量为2 mol/L的NaCl溶液中，再加入二苯胺试剂在沸水浴条件下检测，冷却后观察变成蓝色，B项错误；用玻璃棒缓慢搅拌滤液可使DNA分子充分溶解，可提高DNA的获得量，D项错误。菜花匀浆中含有多种酶，可影响到DNA的提取，C项正确。 2．辣椒素作为一种生物碱广泛用于食品保健、医药工业等领域。辣椒素的获得途径如图。 (1)图中①和②分别表示辣椒组织培养中细胞的________和________过程。 (2)图中培养外植体的培养基中常用的凝固剂是________。培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值________(填“高”或“低”)时，有利于芽的分化。对培养基彻底灭菌时，应采取的灭菌方法是________。 (3)图中外植体的消毒所需酒精的体积分数是________。用酶解法将愈伤组织分离成单细胞时，常用的酶是________和纤维素酶。 (4)提取辣椒素过程中，萃取加热时需安装冷凝回流装置，其目的是________________________。 1.DNA的粗提取实验 ①哺乳动物成熟的红细胞中不含细胞核，也没有DNA，不适于作DNA提取的材料，但却是提取血红蛋白的理想材料。②实验过程中两次用到蒸馏水；第一次目的是使成熟的鸡血红