转基因植物图要点.ppt

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * Copyright? Jiangyong 限制性核酸内切酶(限制酶) 来源：主要从原核生物中分离 化学本质：蛋白质 作用：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。 特性：特异性。即限制酶识别特定的脱氧核苷酸序列，切割特定位点 切割后的DNA末端：黏性末端；平末端 分子缝合针----DNA连接酶 种类 T4 DNA连接酶：既能“缝合”双链DNA片段互补的黏性末端，也能“缝合”双链DNA的平末端（效率低） E·coli DNA连接酶：只能将双链片段互补的黏性末端连接 常用载体 质粒 λ噬菌体的衍生物 动植物病毒 基因进入受体细胞的载体（分子运输车） * Copyright? Jiangyong * Copyright? Jiangyong (1)载体是基因运输工具，在基因操作过程中，使用载体有两个目的：一是用它作为运载工具，将目的基因送到宿主细胞中去；二是利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量复制。 (2)种类：质粒(既存在于原核生物细菌中，也存在于真核生物酵母菌中)、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒。 (3)本质：DNA(其中质粒为环状DNA分子) (4)作为载体必须具备三个条件： ①能在宿主细胞内稳定保存并大量复制。 ②有1个或多个限制酶切点，以便与外源基因连接。 ③具有某些标记基因，以便进行筛选。 * Copyright? Jiangyong * Copyright? Jiangyong 注意问题 (1)一般来说，天然载体往往不能同时具备载体必须具备的条件，所以在基因工程中需要根据不同的和需要，对载体进行人工改建。现在所使用的质粒载体几乎都是经过改建的。 * Copyright? Jiangyong (2)作为载体必须具有多个限制酶切点，而且每种酶的切点最好只有一个。因为某种限制性内切酶只能识别单一切点，若载体上有一个以上的酶切点，则切割重组后可能丢失某些片段，若丢失的片段含复制起点区，则进入受体细胞后便不能自主复制。一个载体若只有某种限制酶的一个切点，则酶切后既能把环打开接纳外源DNA片段，又不会丢失自己的片段。 * Copyright? Jiangyong (3)大肠杆菌、枯草杆菌、土壤农杆菌等细菌中都有质粒。它存在于细菌的细胞质中，上面一般含几个到几百个基因，控制着细菌的抗药性、固氮、抗生素合成等性状。由于土壤农杆菌很容易感染植物细胞，使细胞生有瘤状物。所以科学家培育转基因植物时，常常用土壤农杆菌中的质粒做载体。 (4)注意与细胞膜上载体的区别，两者的化学本质和作用都不相同。 操作 在绿色纸上写上 …GGCTCCCGGGAATTCATTTTG… …CCGAGGGCCCTTAAGTAAAAC … 在红色纸上写上 … TCCCGGGAATTCCCGGGAATTCTA … … AGGGCCCTTAAGGGCCCTTAAGAT … 如果用EcoRⅠ限制酶，情况? 用什么酶连接？ 如果用SmaⅠ限制酶，情况? 用什么酶连接？ 操作中涉及到的用具和材料分别 绿色纸 红色纸 剪刀 透明胶条 连接好的绿红纸条 归纳 什么是基因工程? P1 什么水平? 原理？变异种类？基因重组种类？ 几种酶DNA连接酶、聚合酶、限制酶、解旋酶（解旋哪里断开，复制哪里接上去，什么时候用到？） * Copyright? Jiangyong 基因工程的别名 基因拼接技术或DNA重组技术 操作环境 生物体外 操作对象 基因 操作水平 DNA分子水平 基本过程 剪切→拼接→导入→表达 结果 人类需要的基因产物 基因工程的基因操作步骤 * * * * * * * * * 转基因印度芥菜成功地吸收了土壤中过量的硒。 * * * * Copyright? Jiangyong * Copyright? Jiangyong 转基因西红柿 * Copyright? Jiangyong 抗虫害作物 * Copyright? Jiangyong * Copyright? Jiangyong 番木瓜优良抗病品种 * Copyright? Jiangyong 金大米 * Copyright? Jiangyong 地雷探测草 拟南芥 * Copyright? Jiangyong 　不会引起过敏的大豆 * Copyright? Jiangyong 转基因芥菜可减轻土壤污染 * Copyright? Jiangyong 彩色玉米 * Copyright? Jiangyong 巨型鲑鱼 * Copyright? Jiangyong 荧光鱼 * Copyright? Jiangyong