分子生物学第三章RNA转录.docVIP

第三章 RNA转录(RNA transcription) 3.1. ?Basic concept 3.2. Trancription survey 3.3. Promoter in Eukaryotes and Prokaryotes 3.4. Transcription Termination 3.5. Pre-RNA processing in Eukaryotes 3.1.??? 基本概念（P64） Basic concept ● 基因表达的第一步 ● 以D. S. DNA中的一条单链作为转录的模板 某一基因只以一条单链DNA 为模板进行转录（不对称转录） ● 在依赖DNA的RNA聚合酶的作用下 ● 按A U，C G 配对的原则，合成RNA分子 ● 模板单链 DNA的极性方向为3’ → 5’, 而非模板单链 DNA的极性方向与RNA链相同，均为5’ → 3’. ● RNA的转录包括promotion, elongation, termination 三个阶段 ● 从启动子（promoter）到终止子（terminator）的DNA 序列称为转录单位 （transcriptional unit） ● 原核生物中的转录单位多为 polycistron in operon 真核生物中的转录单位多为monocistron, No operon ● 转录原点记为+1，其上游记为负值，下游记为正值 ● RNA的主要种类及功能：mRNA——携带编码多肽的遗传信息 tRNA——将核苷酸信息转化为aa信息 转运aa进入核糖体 rRNA——参与多肽合成 3.2.RNA转录概况 3.2.1转录的基本过程 1. 模板识别：RNApol与启动子相互识别并结合的过程 （形成封闭的二元复合物） 启动子（promoter）：DNA分子上结合RNApol并形成转录起始复合物的区域，通常也包括促进这一过程的调节蛋白结合位点rich A/T，易发生DNA呼吸现象形成单链区 2转录起始：启动子区解链，转录起始 （封闭的二元复合物 开放的二元复合物 三元复合物） 通常在这一过程中RNApol移动较慢，且易发生脱落——流产式起始 ——决定启动子的强弱 3延伸： 延伸过程中的延宕现象（Eukaryotes）：Euk genome G/C分布不均匀 σ脱离全酶（Pro）/RNApol脱离转录起始复合物（Euk） 4终止：在终止子（terminator）处停止转录 3.2.2 RNApolymerase 1 RNA polymerase in Prokaryotes（以E.coli为例） 1）构成 核心酶(core enzyme)：2αββ’ 全酶（holoenzyme)2αββ’σ α： 核心酶组建因子/ 启动子识别 β： RNA合成的活性中心 β’：与β共同构成活性中心 σ ：识别启动子，增加酶与DNA的亲和力 σ因子可减少RNApol与非启动子DNA序列的亲和力，而增加RNApol与启动子的亲和力，一旦转录起始， σ因子将脱离RNApol再次引导新的RNApol进行转录 ρ ：参与转录终止 Rifamycin（利福霉素）及Streptolydigin（利链菌素）对Pro转录的影响 Rif可结合β，阻止NTP的进入I位点（Initiation site )（一旦形成三元复合物Rif不再起抑制作用）；利链菌素结合β的延伸位点(Elongation site)，抑制延伸。 ——β包含两个活性中心：I位点（起始位点Initiation site） 专性结合ATP或GTP E位点（延伸位点 Elongation site ） 2 RNA polymerase in Eukaryotes RNApol的种类： 酶 细胞内定位 转录产物 对α-鹅膏蕈碱的敏感性 RNApolⅠ 核仁 rRNA resistant RNApolⅡ 核质 mRNA /snRNA