5.2多聚酶链式反应扩增DNA片段 课件(人教版选修1).ppt

解析：从冰箱中放置的缓冲液和酶取出后应放在冰块上缓慢融化，而不能迅速融化。 答案：C 情景导入 知识梳理 方法突破 栏目链接 专题5　DNA和蛋白质技术　　　　　　　　　　　　　 　　　　　课题2　多聚酶链式反应扩增DNA片段 情景导入 知识梳理 方法突破 栏目链接 情景导入 知识梳理 方法突破 栏目链接 在刑事侦破案件中常需要对样品DNA进行分析，PCR技术能快速扩增DNA片段，在几个小时内复制出上百万份的DNA拷贝，有效地解决了因为样品中DNA含量太低而难以对样品进行分析研究的问题。现在PCR技术已广泛应用于遗传病的诊断、刑侦破案、古生物学、基因克隆和基因测序。 情景导入 知识梳理 方法突破 栏目链接 请思考： 1．PCR技术的基本原理是什么？ 2．PCR反应过程是怎样的？ 情景导入 知识梳理 方法突破 栏目链接 情景导入 知识梳理 方法突破 栏目链接 1．生物体内DNA复制的条件 (1)原料：___________________________________________________。 (2)模板：解旋后的每一条____________。 (3)酶：打开DNA双链的________和合成DNA单链的____________。 (4)引物：为DNA聚合酶的起始提供________末端。 一、PCR的原理及反应过程 4种脱氧核苷酸　 DNA母链　 解旋酶　 DNA聚合酶　 3′ 情景导入 知识梳理 方法突破 栏目链接 2．PCR扩增的原理 (1)概念：PCR即多聚酶链式反应，是一种体外________________的技术。它能以极少量的DNA为模板，在几小时内复制出上百万份的DNA拷贝。 (2)原理： ①DNA变性：在__________的温度范围内，DNA的________结构将解体，双链分开，这个过程称为变性。 迅速扩增DNA片段　 80 ～100 ℃　 双螺旋　 情景导入 知识梳理 方法突破 栏目链接 ②DNA复性：当温度缓慢降低后，两条彼此分离的DNA链又会重新____________，这个过程称为复性。 ③DNA合成：DNA聚合酶从引物____________端开始延伸DNA链，DNA的合成方向总是从子链的________端向________端延伸。 结合成双链　 3′　 5′　 3′　 情景导入 知识梳理 方法突破 栏目链接 (3)条件： ①模板：解旋后的每一条___________。 ②引物：能分别与____________结合的两种引物。 ③原料：____________________________________________________。 ④酶：________DNA聚合酶。 ⑤其他条件：需要稳定的__________和能自动调节温度的温控设备。 DNA母链 　 两条模板链　 4种脱氧核苷酸　 耐热的　 缓冲溶液 情景导入 知识梳理 方法突破 栏目链接 90 ℃　 50 ℃　 碱基互补配对　 情景导入 知识梳理 方法突破 栏目链接 72 ℃　 DNA聚合酶　 碱基互补配对原则 情景导入 知识梳理 方法突破 栏目链接 1．实验用具 (1)PCR仪：该仪器能自动调控________，实现DNA的扩增。如果没有PCR仪，可用3个________水浴锅代替，操作时按程序在3个水浴锅中来回转移PCR反应的微量离心管。 (2)微量离心管：总容积为________mL，实际上是进行PCR反应的场所。 (3)微量移液器：用于向微量离心管中转移PCR配方中的液体，每吸取一种试剂后其上的一次性吸液枪头都必须更换。 二、PCR的实验操作 温度　 恒温　 0.5 情景导入 知识梳理 方法突破 栏目链接 2．实验步骤 用微量移液器　 轻轻弹击　 情景导入 知识梳理 方法突破 栏目链接 10 情景导入 知识梳理 方法突破 栏目链接 3．DNA含量的测定 (1)原理：利用DNA在________的紫外线波段有一强烈的吸收峰。 (2)计算公式： DNA含量(μg/mL)＝__________________×稀释倍数。 点拨：在PCR实验操作中，常用微量离心管作为反应场所，在操