实验一 动物实验基本操作技术01.doc

石河子大学教案续页 （内容与进程） 实习一 实验动物的一般操作技术 一、目的和意义 毒理学研究需要用实验动物来进行各种实验，通过对动物的实验观察和分析来研究毒作用，获得毒物的毒性、剂量—反应关系、毒作用机制等方面的资料，因此动物实验是毒理学研究中重要的手段之一。 通过本次实习学习毒理学实验中有关动物实验的基本操作技术，掌握实验动物的选择、动物抓取、染毒方法和生物材料的采集等技术。 二、内 容 (一)健康动物的选择 我们在做动物实验时，无论选择哪种种属、品系的动物进行实验，均要求选择健康的实验动物。因为机体的健康状态直接影响毒物对机体产生的毒性作用，从而对实验的结果产生影响，干扰我们对结果的准确性的判断，有可能会造成严重的后果。 总的来看，一只健康的动物应该外观体形丰满，被毛浓密有光泽、紧贴体表，眼睛明亮，行动迅速，反应灵活，食欲及营养状况良好。 重点检查项目： 1.眼睛：明亮，瞳孔双侧等圆，无分泌物。 2.耳：耳道无分泌物溢出，耳壳无脓疮。 3.鼻：无喷嚏，无浆性粘浓分泌物。 4.皮肤：无创伤、无脓疮、疥癣、湿疹。 5.颈部：要求颈项端正，如有歪斜提示可能存在内耳疾患。 6.消化道：无呕吐、腹泻，粪便成形，肛门附近被毛洁净。 7.神经系统：无震颤、麻痹。若动物(大鼠、小鼠)出现圆圈动作或提尾倒置呈圆圆摆动，应放弃该动物。 8.四肢及尾：四肢、趾及尾无红肿及溃疡。 (二)实验动物的性别鉴定 动物性别不同对毒物的敏感性也不同，这可能与性激素、肝微粒体羟基化反应有关，也随受试物而异，相关内容在毒作用影响因素讲过。因此，要根据实验要求选择性别，一般实验如对性别无特殊要求者，宜选用雌雄动物各半。 石河子大学教案续页 （内容与进程） 1.大鼠、小鼠 主要依肛门与生殖孔间的距离区分，间距大者为雄性，小者为雌性。成年雄鼠卧位可见到睾丸，雌性在腹部可见乳头。 2.家兔 将家免头轻轻夹在实验者左腋窝下，左手按住腰背部．右手拉开尾巴并将尾巴夹在中指和无名指中间，然后用拇指和食指稍稍把生殖器附近的皮肤扒开。 ♂可见到一圆孔中露出圆锥形稍向下弯曲的阴茎(但幼年雄兔看不到明显的阴茎，只能看到圆孔中有凸起物，即是阴茎)。 ♀此处则为一条朝向尾巴的长缝，呈椭圆形的间隙，间隙越向下越窄，此即为阴道开口处。 （三）实验动物的抓取方法 在进行实验时，为了不损伤动物的健康，不影响观察指标，并防止被动物咬伤，首先要限制动物的活动，使动物处于安静状态，工作人员必须掌握合理的抓取固定方法。抓取动物前，必须对各种动物的一般习性有所了解。操作时要小心仔细、大胆敏捷、熟练准确、不能粗暴，不能恐吓动物，同时，要爱惜动物，使动物少受痛苦。正确地抓取固定动物，是为了在不损害动物健康、不影响观察指标、并防止被动物咬伤的前提下，确保实验顺利进行。 1.小鼠的抓取方法 先用右手抓取鼠尾提起，置于鼠笼或实验台上向后拉，在其向前爬行时，用左手拇指和食指抓住小鼠的两耳和颈部皮肤，将鼠体置于左手心中，把后肢拉直，以无名指按住鼠尾，小指按住后腿即可。（演示） 固定：在一些特殊的实验中，如进行尾静脉注射时，可使用特殊的固定装置进行固定,如尾静脉注射架或粗的玻璃试管。如要进行手术或心脏采血应先行麻醉再操作,如进行解剖实验则必须先行无痛处死后再进行。 2.大鼠的抓取方法 大鼠的抓取基本同小鼠，大鼠的门齿很长，性情凶猛，在抓取方法不当而受到惊吓或激怒时易将操作者手指咬伤。所以，不易用袭击方法抓取。为避免咬伤，可带上帆布或棉纱手套。 固定：采用左手固定法，右手轻轻抓住其尾巴后提起，置于实验台上，用玻璃钟罩扣住或置于大鼠固定盒内，这样即可进行尾静脉取血或注射。如要作腹腔注射或灌胃等操作时，实验者应戴上棉纱手套(有经验者也可不戴)，右手轻轻抓住大鼠的尾巴向后拉，但要避免抓其尖端，以防尾巴尖端皮肤脱落，左手抓紧鼠两耳 石河子大学教案续页 （内容与进程） 及背部的皮肤，并将大鼠固定在左手掌心中，右手即可进行操作。 3.兔的抓取方法 用右手抓住兔颈部的毛皮提起，然后左手托住其臀部或腹部，让其体重的大部分重量集中在左手上。 注意：不要抓取双耳或抓提腹部。因家兔耳大，故人们常误认为抓其耳可以提起，在实验工作中常用兔耳作采血、静脉注射等用，所以家兔的两耳应尽量保持不受损伤。用手挟住其腰背部提起均为不正确的操作。 固定方法：盒式固定和台式固定。 盒式固定适用于采血和耳部血管注射； 台式固定适用于测量血压、呼吸和进行手术操作等。 1.称重 大、小鼠秤的感应量需在0.1g以下。根据实验的不同要求，选择一定数量的大、小鼠，体重要求在同一组内、同性别动物体重差异应小于平