巴旦杏组织培养快速繁殖技术研究.doc

巴旦杏组织培养快速繁殖技术研究 陶秀东 吴春兰 王越铭 汪志军 王玉兰 Tao Xiu-dong Wu Chun-lan Wang Yue-ming Wang Zhi-jun Wang Yu-lan 新疆林科院经济林研究所 Institute of Economic Forestry, Xinjiang Forestry Academy Urumqi 830000 China 摘要：采用水培芽作为组织培养的外植体材料，并获得具根、茎、叶完整的巴旦杏试管苗，其中增殖培养接种在MS+6-BA1.0mg+NAA0.01mg/LR的培养基上，增殖倍数3倍左右。不定芽的生根培养接种在 MS+IBA0.3-0.5mg/L培养基上，或用100ppm的生长素IBA、IAA侵泡不定芽基部，接种在不加激素的培养基上，两种生根培养法，生根率都达95%以上。 关键词：巴旦杏；组织培养；快速繁殖； 巴旦杏又名扁桃（Amygdalus Communis l），属于蔷薇科、扁桃属的一种中等落叶乔木，高4-10米。它是世界著名的四大干果之一，在市场上售价很高，有着广阔的发展前景。新疆栽培巴旦杏历史悠久，是我国巴旦杏栽培面积较大的地区，并且成为我区的特产。巴旦杏的繁殖主要以嫁接和实生两种方法进行，采用嫁接方法进行繁殖能够保持品种的优良特性 ，遗传性状稳定，但可利用的优良品种穗条少，繁殖速度慢，限制了巴旦杏产业的发展。实生繁殖虽然数量大，但变异也较大。而组织培养能用较少的材料，在短时间内批量繁殖出优良的巴旦杏品种苗木。为此我们从1986年开始对新疆经济树种的组织培养技术进行了研究，经过科技人员近十年的努力取得了较好的研究结果。其中巴旦杏的研究被与会专家评为国际先进水平，该项研究成果荣获1996年自治区科技进步三等奖。现将巴旦杏的组织培养技术总结归纳如下。 材料与方法： 2月底-3月初从巴旦杏良种繁育基地采集未发芽的优质品种条。采回的种条经剪截处理后，在室内进行水培发芽。待芽长至2厘米左右时将嫩芽采下，在超净工作台上进行灭菌处理，先用70%的酒精处理一次，再用0.1%的升汞灭菌，经无菌水冲洗后剪切接种在全量MS增殖培养基上。当增殖培养基上的芽长至1厘米左右时，将其剪下接种至生根培养基中诱导生根，或将试管苗基部用生长素浸泡后，接种到无激素的培养基中诱导生根。生根的试管苗经自然光照锻炼后移栽到不同介质的苗床中，保温、保湿25天左右成活。 二、结果与分析： 外植体的取材与灭菌： 外植体灭菌时间不同对成活率的影响： 通过试验发现外植体灭菌时间不同，成活也不同。这是因为外植体是经水培后萌发的嫩芽，灭菌时间越长对芽造成的伤害就越大，成活率低，反之时间过短芽上的细菌灭不干净，造成接种后污染，成活率也低。根据试验得出水培芽用升汞灭菌4-6分钟即可，超过这一时间芽的成活率很低，当灭菌8分钟时芽全部死亡。 取材季节不同外植体成活率对比研究： 组织培养前期外植体成活率的高与低，决定着试管苗扩繁的数量及 生产周期的长短，因此外植体成活数量决定着试管苗的繁殖速度。试验 中我们对不同季节取材外植体的成活情况进行了对比研究，如表 1 ： 表1不同季节取材外植体成活对比研究 Table 1 collected in different season Study on the survival contrast of explants 取材时间 collecting tine 外植体 explants 接种数 inoculate number 成活数 survival number 成活率% survival rate 2月28日 February 28th 水培芽 buds cultured in water 30 22 73 5月8日 May 8th 春季萌发芽 buds germinate in the spring 50 19 38 7月16日 July 16th 夏季萌发芽 buds germinate in the summer 60 9 16 由表1可知冬季水培芽成活率最高达73%，其次是春季萌发芽成活率38%，夏季萌发芽最低16%。这是因为水培芽未受室外杂菌的严重侵染，芽本身含菌少，而且水培芽营养储藏丰富健壮，自身抗性强，萌发能力强，生长快，因而成活率高。春季萌发的芽，因环境温度不是很高，空气湿度较大，浮尘及细菌也少，相应对芽的浸染程度降低，灭菌较容易，所以成活率也相对较高。夏季采取打顶萌发取芽，因这时苗木处于生长旺盛期，植物体营养主要用于生殖生长，取芽后萌发不好，又因此时环境温度很高，杂菌多，灭菌非常困难，所以成活率低。 （二）不同激素浓度对试管苗增殖倍数的影响： 1、外植体的增殖诱导： 灭菌后的外植体接种在全量MS附加糖3%，琼脂0.45%，PH