02第二章药物的鉴别试验详解.ppt

药物的鉴别试验 药物的杂质检查 药物定量分析与分析方法验证 Identification test of drug 鉴别试验的内涵 鉴别试验的项目 鉴别试验的方法 鉴别试验的条件 ChP(2010)凡例中对药物的鉴别的定义为：鉴别项下规定的实验方法，仅反应该药品某些物理、化学或生物学等性质特征，不完全代表对该药品化学结构的确证。 ChP(2010)收载三种熔点的测定方法： 第一法 测定易碎固体药品 第二法 测定不易粉碎固体药品 （脂肪酸、石蜡） 第三法 测定凡士林或其他易碎物 要求报告初熔和终熔的温度 例如：维生素C的比旋度测定： 取本品，精密称定，加水溶解，并定量稀释成C为0.10g/ml的溶液，依法测定旋光度为+2.05°至2.15°，求 =？ 吸收系数：在给定的波长、溶剂和温度等条件下，吸光物质在单位浓度、单位液层厚度时的吸收度称为吸收系数。中国药典收载是 。 这两种物理常数可用以区别药品、检查纯度或测定制剂的含量。 吸收系数 吸光物质在单位浓度、单位液层厚度时的吸收度 摩尔吸收系数 溶液浓度 ε 液层厚度 百分吸收系数 溶液浓度 液层厚度 A=ECL E=A/CL C=1%或1mol/L 例如 盐酸甲氧明 “取本品，精密称定，加水溶解并定量稀释成每1ml含30ug的溶液，照分光光度法，在290nm波长处测定吸收度，吸收系数（为 133-141） 阴阳离子的特殊反应 阴阳离子的特殊反应 有机氟化物 样品经氧瓶燃烧法进行有机破坏后，用水和碱氢氧化钠溶液吸收为无机氟化物，与茜素氟蓝和硝酸亚铈在PH=4.3溶液中形成蓝紫色络合物。 反应原理 FeCl3 反应 酒石酸盐 取供试品的中性溶液于试管中，加氨制硝酸银溶液几滴，于水浴中加热，有银镜生成。 例子 巴比妥类药物：苯巴比妥含有苯环，司可巴比妥含有双键，硫喷妥钠含有硫原子。根据取代基的不同，采用各自专属的反应进行鉴别。 例子 甾体激素类药物含有环戊烷并多氢菲母核，主要差别在A环和D环的取代基不同，可利用这些结构特征确证。 紫外法 在指定溶剂中测定2-3个特定波长处的吸收度比值（峰值与峰值比，峰谷与峰谷比），以提高专属性。 例 地蒽酚的鉴别 取含量测定下的溶液，照分光光度法测定，于240-400nm的波长范围测定吸收度,在257,289,356处有最大吸收. 规定A257/= A289为1.06-1.10 A356/= A289为0.90-0.94. 紫外光谱鉴别法 (1) 最大吸收波长和最小吸收波长 (2) - A (3) -吸收系数 (4) - A1/A2 (5) 化学处理后测定产物的吸光度值 不同国家测定方法略有不同 USP(32) 采用对照品法,把样品与对照品按同法处理,在200-400nm波长范围扫描，要求相同波长处有最大吸收，最小吸收，相同的吸收系数，或吸收比在规定的限度内。 JP(15)与ChP(2010)的UV测定方法相似。 BP(2009)规定在一定波长范围内扫描，寻找最大吸收，测定吸收系数。 红外光谱法是一种专属性很强，应用较广（固、液、气）的鉴别方法，主要应用于组分单一，结构明确的原料药，特别适合于其他方法不易区分的同类药物，如磺胺类、甾体激素类、半合成抗胜素。 ChP和BP均采用标准图谱法 例中国药典对某药物的鉴别：本品的红外吸收图谱应与对照的图谱（光谱集XX图）一致。 USP采用对照品法 例阿莫西林的鉴别试验：取本品，经干燥后用溴化钾压片法测定，所得的图谱与USP阿莫西林参考标准品图谱一致。 JP采用规定条件下测定一定波数处的特征吸收峰 例氯羟去甲安定的测定：取本品，干 燥后用KBr压片法测定，其红外吸收光谱图中3440cm-1,3220cm-1,1695cm-1,1614cm-1,1324cm-1,1132cm-1,828cm-1处有吸收。 试样制备方法： 1、压片法----用于固体 2、糊法----用于固体 3、膜法----用于液体 4、溶液法----用于液体 制剂的鉴别（2005版增加） （1）辅料无干扰，与原料药标准图谱对照 （2）辅料干扰不能完全消除，用指纹区特征峰鉴别 药物鉴别方法新动向 仪器用于药物鉴别的数量大大增加，尤其是红外和HPLC法。