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无菌检查:将灭菌的培养基放入37℃的温室中培养24~48小时,观察是否有菌落存在以确定是否被污染或灭菌是否彻底。 5.怎么确定所倒平板未被杂菌污染? 单个 或少数菌体 1.定义: 固体培养基上 大量繁殖 子细胞群体 (肉眼可见) ※菌落 2.特征: 大小、形状、光泽度、颜色、透明度等。 (二)纯化大肠杆菌 单个细胞 单个菌落 从混杂的微生物群体中获得只含某一种微生物的过程。 何为分离纯化? 如何纯化? 接种常见方法 平板划线法 操作核心 防止杂菌污染,保持培养物纯度 如何分散成单个细胞? 稀释涂布平板法 斜面接种 穿刺接种 微生物群 分散 1.平板划线法: 分区划线法 连续划线法 (1)概念与原理: 聚集的菌群 连续划线 稀释分散 单个细胞 菌落 生长繁殖 (2)“平板划线”实验操作 第一区划线 灭菌接种环 第二区划线 灭菌接种环 第三区划线 灭菌接种环 灭菌接种环 (1)为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环?在划线操作结束时,仍然需要灼烧接种环吗?为什么? 杀死接种环上残留的菌种,避免细菌污染环境和感染操作者 杀死上次划线时残留菌种,使下一次划线的菌种直接来源上次划线的末端,从而使每次划线时菌种数目逐渐减少,直至得到单个细胞 杀死接种环上原有微生物 目的 接种结束后 每次划线前 取菌种前 灼烧时期 (2)在灼烧接种环之后,为什么要等其冷却后再进行划线? 答:以免接种环温度太高,杀死菌种。 (3)在作第二次以及其后的划线操作时,为什么总是从上一次划线的末端开始划线? 答:线条末端细菌的数目比线条起始处要少,每次从上一次划线的末端开始,能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少,最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。 * . . . * . . . * . . . * . . . * . . . 专题2 微生物的培养与应用 课题1 微生物的实验室培养 1.能够描述出培养基的一般成分、种类及用途; 2.能够区别消毒和灭菌的不同之处; 3.写出培养基制作的一般的步骤; 4.能够说出在微生物分离纯化实验中可以选用 平板划线法或系列稀释和涂布平板法。 以“杀死禽流感病毒”为背景材料,设计问题,导入新课;首先直接阐明培养基的概念,类型,基本成分,配置原则;再提出无菌技术,列表比较消毒和灭菌的区别,接着以牛肉膏蛋白胨固体培养基配制过程为例讲解培养基的配制;然后讲解纯化大肠杆菌的实验,以图文结合的形式了解平板划线法的有关实验操作,稀释涂布平板法的操作过程;最后通过课堂检测,完善内化课堂知识。 通过图文结合,实验演示,对培养基的配置有全面的了解,通过熟悉的日常生活中的有关消毒和灭菌的情况,掌握更科学的消毒和灭菌的技术。以制备牛肉膏蛋白胨固体培养基为例讲解培养基的配制过程,通过设计问题,引发学生思考,学习实验操作过程;对于平板划线法也是教学中的一个重点和难点,在教学中老师先演示实验的具体操作,再结合课本知识融会贯通,以此突破本节重难点内容。 杀死禽流感病毒 1.微生物有哪些营养方式(代谢类型)? 你能各举一例? 2.含C、H、O、N的大分子有机物可做异养微生物的碳源、氮源、能源 ? 3.你能说出几种灭菌方法? 微生物研究和应用的前提: 如何获得纯净培养物 防止杂菌入侵,获得纯净的培养物 ①合适的营养和环境条件 ②确保其他微生物无法混入 1.概念: 人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。 2.类型: 按物理性质划分: 按化学成分划分: 按用途划分: 一、培养基 有 无 凝固剂琼脂 固体培养基 液体培养基 分离 鉴定 工业 生产 (1)按物理性质划分: 单个 或少数菌体 2.特征: 大小、形状、光泽度、颜色、透明度等。 3.意义: 1.定义: 鉴定菌种的重要依据 固体培养基上 大量繁殖 子细胞群体 ※菌落 天然培养基 合成培养基 化学成分不恒定的天然有机物 如:牛肉膏蛋白胨培养基、马铃薯培养基 化学成分完全了解的物质配制而成的培养基 如:高氏1号培养基、查氏培养基。用于分类和鉴定 (2)按化学成分划分: 基础培养基 鉴别培养基 含有一般微生物生长繁殖所需的基本营养物质 将某种类微生物从混杂的微生物群体中分离出来 用于鉴别不同类型微生物的培养基 选择培养基 (3)按用途划分: ※几种选择培养基 ①加入青霉素的培养基 分离酵母菌、霉菌等真菌 ②不加氮源的无氮培养基 分离固氮菌 ③不加含碳有机物的无碳培养基 分离自养型微生
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