09基因工程原理期中试题.doc

一、名词解释 1、限制内切酶 2、DNA连接酶 3、cDNA文库 4、DNA文库 5、限制酶的星号活性 6、穿梭载体 7、同裂酶 8、同尾酶 9、柯斯质粒载体 10、噬菌粒载体 二、填空题 1、DNA聚合酶I的Klenow大片段是用_____________切割DNA聚合酶I得到的分子量为76kDa的大片段，具有两种酶活性： (1)____________； (2)________________的活性。 2、pBR322是一种改造型的质粒，它的复制起始位点来源于 ，它的四环素抗性基因来自于 ，它的氨苄青霉素抗性基因来自于 。 3、可用T4 DNA聚合酶进行取代合成法标记DNA片段，因为这种酶具有____________和_____________的活性。 4、一个限制内切酶识别序列，并在箭头所指部位切开，所形成的末端是________突出的_________末端。 5、限制内切酶的命名由三部分构成即____________、____________、分离顺序。例 如EcoRⅠ就是从____________菌种中分离出来的第一个限制内切酶。 6、适用于原核细胞载体有____________，_____________，_______________。 7、保证转基因操作的顺利进行，至少必须具备四个必要因素_________________、____________________、______________________和__________________。 三、选择题 1、下面几种序列中你认为哪一个(哪些)最有可能是Ⅱ型酶的识别序列：（ ） A、GAATCG； B、AAATTT； C、GATATC； D、ACGGCA。 2、关于宿主控制的限制修饰现象的本质，下列描述中只有( )不太恰当。 A、由作用于同一DNA序列的两种酶构成 B、这一系统中的核酸酶都是Ⅱ类限制性内切核酸酶 C、这一系统中的修饰酶主要是通过甲基化作用对DNA进行修饰 D、不同的宿主系统具有不同的限制-修饰系统 3、下面有关限制酶的叙述哪些是正确的?( ) A、限制酶是外切酶而不是内切酶 B、限制酶在特异序列(识别位点)对DNA进行切割 C、同一种限制酶切割DNA时留下的末端序列总是相同的 D、一些限制酶在识别位点内不同的点切割双链DNA，产生黏末端；一些限制酶在识别位点内相同的位置切割双链DNA，产生平末端 4、在长模板链的指导下引物延伸合成长的DNA互补链时应选用( ) A、T4DNA聚合酶； B、Klenow酶； C、大肠杆菌DNA聚合酶I； D、T7DNA聚合酶。 5、下列哪一种酶作用时需要引物? ( ) A、限制酶 B、末端转移酶 C、反转录酶 D、DNA连接酶 6、基因工程中所用的质粒载体大多是改造过的，真正的天然质粒载体很少，在下列载体中只有( )被视为用作基因工程载体的天然质粒载体 A、pBR322 B、pSCl01 C、pUBll0 D、pUCl8 7、酶作用体系中不仅有Mg2+还要有Ca2+的核酸内切酶是（ ） A、S1核酸酶 B、Bal31核酸酶 C、exoⅦ D、λ exo 8、在作用体系中不需要金属离子的核酸酶是（ ） A、S1核酸酶 B、Bal31核酸酶 C、exoⅦ D、λ exo 9、在基因克隆中，为了防止质粒载体自身环化，一般用（ ）酶对线性质粒分子处理，然后再与目的基因连接。 A、S1核酸酶 B、Bal31核酸酶 C、末端转移酶 D、碱性磷酸酶 10、在cDNA技术中，所形成的发夹环可用( ) A、限制性内切核酸酶切除； B、用31外切核酸酶切除 C、用S1核酸酶切除； D、用51外切核酸酶切除 11、切口移位是指在( )作用下，使( )带上放射性标记。 A、DNA聚合酶I，RNA B、DNA聚合酶I，DNA C、DNA聚合酶Ⅲ，RNA D、DNA聚合酶Ⅲ，DNA 12、在下面对pBR322 质粒载体的描述中，选出需要再进行重新改建的不足之处（ ）