乙酰二茂铁的柱层析分离.docVIP

乙酰二茂铁的柱层析分离 1. 拌样 称取上述粗产品20mg置于干燥小烧杯中，滴加乙酸乙酯使溶解，加入约200mg硅胶（ – 300目），搅拌均匀得桔黄色浆状物，红外灯下干燥得松散的颗粒状物。2. 湿法装柱 从柱的顶端用玻棒将少许棉花推到柱的底部，将色谱柱垂直固定在铁架台上，夹子夹在柱端。向柱中加入石油醚至柱高1/8。加入一层约3mm厚的石英砂。柱活塞下接一干净的锥形瓶。 在小烧杯中称取约g硅胶（0 – 300目），加入～5mL石油醚调匀。 打开柱下活塞，控制流出速度1～2滴/秒。将烧杯中硅胶糊状物加入柱内，硅胶自然沉降，将流下的洗脱剂倒入未倒完的吸附剂中，搅匀后再倒入柱中，反复多次，待所有的吸附剂全部转移完，用滴管吸流下的洗脱剂将黏在柱内壁的硅胶淋洗下去，然后用轻轻敲击柱身，使柱面平整，无气泡产生，装填紧密而均匀，在顶部加一层约3mm厚的石英砂。 将上述拌有粗产品的硅胶～装入柱中，轻敲柱管，使柱面平整，上层再覆一层约3mm厚石英砂。 装置图 3. 洗脱 首先用石油醚：乙酸乙酯（体积比）= ：1作洗脱剂从柱顶加入，控制洗脱剂的滴速在1～2滴/秒，逐渐展开得到黄色、橙色分离的色谱带。黄色的二茂铁带首先从柱下流出，用干燥的锥形瓶收集洗脱溶液。当黄色谱带完全洗脱下来时，改用石油醚：乙酸乙酯（体积比）= ～5：1洗脱剂，橙色谱带往下移动，用另一只已干燥的锥形瓶收集洗脱液。两种谱带都有比较明显的拖尾现象。 4. 收集产品 收集到的黄色洗脱液中是有二茂铁；橙色洗脱液中主要是乙酰二茂铁。将黄色洗脱液倒入已称重的干燥茄形瓶中，旋转蒸发除去溶液。将橙色洗脱液倒入已称重的干燥茄形瓶中，旋转蒸发除去溶液。 . 使用薄层层析分析初样品与分离样品（展开剂：石油醚：乙酸乙酯（体积比）= ：1