关于β-兴奋剂酶联免疫检测试剂盒的使用组织尿样.docVIP

有关β-兴奋剂酶联免疫检测试剂盒的使用说明 主要是利用抗原与抗体的特异性免疫化学反应的基本原理来进行的，通俗而言，就是利用酶标记物与样品中的β-兴奋剂(Beta-Agonist)竞争微孔中的抗体。在整个反应当中，如果样品中的β-兴奋剂残留量越多，相对地就会竞争反应越多的酶标记物，导致能结合上抗体的酶标记物相对减少，用TMB底物显色，样品中的β-兴奋剂含量与样品的吸光度值呈反比，与标准曲线比较即可得出β-兴奋剂含量。 【 1、酶标板：8孔/条，12条/板 2、β-兴奋剂标准溶液(1.0 mL / 瓶)：0 ppb、0.1 ppb、0.25 ppb、 0.65 ppb、1.6 ppb、4.0 ppb 3、50倍浓缩酶标记物 ………………………………… 0.3 mL 4、10倍浓缩清洗液 …………………………………… 50 mL 5、酶标记物专用稀释液………………………………… 18 mL 6、显色液………………………………………………… 12 mL 7、反应终止液 ………………………………………… 13 mL 8、样品稀释液…………………………………………… 50 mL 【】0.3ppb 血清………………………………………………………0.2ppb 饲料………………………………………………………8.0 ppb 肉类………………………………………………………0. 5 ppb 交叉反应率： 克伦特罗…………………………………………………100% 沙丁胺醇………………………………………………… 95% 溴布特罗…………………………………………………70% 妥布特罗………………………………………………… 30% 特布它林………………………………………………… 5% 莱克多巴胺………………………………………………0.01% 回收率： 尿液………………………80~120% 血清………………………80~120% 饲料………………………80~120% 肉类………………………80~120% 批间、批内变异系数：CV≤10% 【】(单道20μl-200μl、100μl-1000μl、多道250μl) 所需试剂：99 % 甲醇﹙Methanol﹚1N及0.5 N 氢氧化钠溶液﹙NaOH Solution﹚1N及0.05 N 盐酸溶液﹙HCl Solution﹚ 【】/血清/饲料及肉类中残留的克伦特罗与沙丁胺醇。 1、尿液的检测，请按以下方法进行稀释（3倍稀释）。 取0.1 mL尿，加入0.2 mL样品稀释液以1:2（3倍）稀释待用。 若样品的透明度较差，或浊度较高，则建议过滤或以离心机离心10分钟（3000 rpm），取上清液30μL到微量微孔内进行测试分析。 2、血清的检测，请依以下方法进行。 取0.5 mL血清，加入0.5 mL样品稀释液以1:1（2倍）稀释。 震荡混合均匀，取30μL加入到微量微孔内进行测试分析。 3、待测物为饲料，则按以下方法进行分析。 取1 g已磨碎的待测饲料，加入1 mL 1N 盐酸以及9 mL 蒸馏水，用试管振荡器震荡混合约0.5分钟后再使用混和器混和15分钟。 离心15分钟（3000 rpm），取所有上清液到新离心管内，加入0.5 mL 1N氢氧化钠溶液。 震荡混合约0.5分钟，离心15分钟 （3000 rpm），取上清液0.5 mL与原倍清洗液3.5 mL以1:7（8倍）稀释。 取30 uL直接进行分析。 4、若待测物为组织样本（肉类、肝脏），则按以下方法进行分析。 取4 g已均质组织样品置入50 mL离心管中，再加入6 mL 0.05 M盐酸，用试管振荡器震荡混合约0.5分钟，接着使用混和器混和20分钟后，用离心机离心15钟（3000 rpm）。 取上清液0.5 mL到15 mL离心管后再分别加入0.25 mL 0.5 M氢氧化钠溶液及0.25 mL样品稀释液后，以试管振荡器震荡混合约0.5分钟。 用离心机离心15钟（3000 rpm）后取上清液30 uL加入至微量微孔内进行测试分析。 稀释倍数: 5 【】0, 0.10, 0.25, 0.65, 1.60与4.00 ppb）对应微孔按 序编号后分别加入0 μL标准溶液。2、在的微孔30 μL已完成前处理的尿液或血清检品。 3、再于每一微孔加入120 μL已稀释的酶标记物（见注意3）。 4、轻敲板架四周，使其充分混合后于室温下避光静置50分钟。 5、将微孔中的反应液甩掉，再将洗液加满每一微孔后甩掉， 重复洗3次。 6、最后一次甩掉后，在吸水纸上拍干。 7、于每一微孔加入显色液100μL后，轻敲板架四周，使其充分 混合。 8、于室温下避光静置20分钟。 9、加入反应终止液，每一