分子遗传学试题吐血版.docVIP

1．何为DNA变性与复性？那些因素可影响DNA的变性与复性？ 变性;加热或用碱处理双链DNA，使氢链断裂，结果DNA变成为单链，此称为DNA的变性。高温 、 酸 、碱 、尿素 、甲酰胺。 DNA的复性指变性DNA 在适当条件下,二条互补链全部或部分恢复到天然双螺旋结构的现象,它是变性的一种逆转过程。 影响复性反应的因素 (1) DNA片段的大小：片断小复性快，移动碰撞机会多 (2) DNA的浓度：高浓度复性快 (3) DNA复杂性： 简单序列复性快 (4) 温度：过低温度减少互补链的碰撞机会最佳复性温度一般比Tm低25°C。 (5) 盐的浓度：过低盐浓度使复性后的DNA又变性复性时要求盐的浓度达到足够高; 2.简述转录的基本概念，DNA的双链与转录产物是何关系？ 转录：以DNA为模板，在依赖于DNA的RNA聚合酶催化下，以4种rNTP为原料合成RNA的过程。包括RNA链的起始、延伸和终止三个过程。 DNA双链与其转录产物(RNA链)的关系 正义链(编码链)：非转录模板的DNA单链 反义链(模板链) ：作为模板转录的DNA单链 ? 正(+)链：单链DNA病毒所含的DNA。(正义链) ? 负(-)链：单链DNA为模板所复制互补的链，再由此互补链为模板转录形成RNA。（反义链） 3.何为顺式作用元件与反式作用因子？反式作用因子上与DNA结合的结构域主要有那些特征？ 顺式作用元件：对基因表达有调控活性的DNA序列，仅在原位影响物理上相连的基因。不编码，多位于基因旁或内含子中。 反式作用因子：是基因编码的可扩散的产物。蛋白质、RNA（tRNA和rRNA） 转录因子上与DNA结合的结构域 转录因子是一类由非组蛋白组成的序列特异性DNA结合蛋白 对转录因子的氨基酸序列分析， 发现其基序（motif）的共同点是都能与DNA结合。 基序通常很短，仅为蛋白质结构中的一小部分氨基酸序列。特定的基序与DNA结合，激活转录 1、锌指基序（zinc finger motif） ? 蛋白质中保守氨基酸的小基团与锌离子结合形成的相对独立结构域。 2、螺旋-转角-螺旋基序（The helix-turn-helix motif ）The helix-turn-helix motif _ 最早发现于噬菌体阻抑蛋白的DNA结合功能域中。 3、、螺旋-环-螺旋基序 4、亮氨酸拉链（leucine zipper） 4.何为真核生物mRNA的剪接？其中核基因mRNA内含子拼接的一般规则是什么？ 真核生物mRNA的剪接从初始转录产物中去除内含子而将外显子连接产生成熟RNA分子的过程。 核基因mRNA内含子拼接的一般规则 ? 不同的内含子其拼接方式不同 ? 内含子有4个保守的反向重复10－12核苷酸，产生的二级结构有9个区域，剪接点就 发生在二级结构处。因二级结构有利于磷酸脂键的切断和再连接。 ? 内含子末端连接可能是RNA本身固有的特征，使剪接实际上仅发生在同一个内含子的5‘和3’剪接点之间。 5何为真核生物自主转座与非转座？试述玉米AC/DS转座系统的结构？ （1）自主元件（autonomous elements）: 有切除和转座的能力。 因为自主元件持续的活性，在任何基因位点，它的插入产生一个不稳定的或易变的等位基因。元件本身的丧失或其转座能力的丧失，使一个不稳定的等位基因转化为一个稳定的等位基因。 （2）非自主元件（nonautonomous elements）:它们是稳定的，不转座或在某种条件下不发生自发性的改变。只有当同一家族的一个自主元件存在于该基因组的其他部位时，它们才变得不稳定。当一个自主元件反式互补时，一个非自主元件可以显示一个自主元件相关的活性，包括转座到新的位点。非自主元件是由自主元件丧失转座所需的功能而产生的。 AC/DS转座系统的结构： 自主Ac元件序列的大部分被一个由5个外显子组成的单一基因所占据，其产物为转座酶。 Ds元件的各个成员在长度和序列上并不相同，但皆与Ac相关。它们有相同的11bp反向重复末端。它们较Ac短，但缺失的长度有差异。 Ac（Activator）/Ds（Dissociator）的转座通过非复制型机制发生，伴随着Ds在原供体位置上的消失。 6 简述真核生物RNA聚合酶的种类及其各自的特征与功能。 DNA聚合酶α DNA聚合酶β DNA聚合酶γ 相对分子质量 110～220 45 60 位置 核内 核内 核和线粒体内 功能 DNA复制 DNA损伤修复 可能与线粒体DNA的复制有关 相对活性 约80% 10%～15% 2%～15% 亚基数 多个 1个 1个 7.概括典型原核生物启动子的结构与功能 （1）转录起始点： ? 多数情况下（90%）为嘌呤，常见序列为CAT，其中A为转录起始点。 （2）-10区序列（Pri