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实验十强心苷对蛙心的作用
实验十、强心苷对离体蛙心的作用
[实验目的] 学习斯氏(Straub)离体蛙心灌流法,观察强心苷对离体蛙心收缩强度、频率和节律的影响以及强心苷和钙离子的协同作用。
[实验材料]
1、动物:蛙
3、药品和试剂:任氏液、低钙任氏液(所含CaCl2量为一般任氏液的1/4,其它成分不变 )、 5%洋地黄溶液(0.1%毒毛旋花子苷K溶液)、1%氯化钙溶液
[实验方法]
1、取蛙1只,用探针破坏脑及脊髓,背位固定于蛙板上。先剪开胸部皮肤,再剪除胸部肌肉及胸骨,打开胸腔,剪破心包膜,暴露心脏。
2、制备离体蛙心
(1)在主动脉分支处下穿一线,打好松结,备结扎套管之用。
(2)于左主动脉上剪一“ V ”形小口,插入盛有任氏液的蛙心套管,通过主动脉球转向左后方,同时用镊子轻提动脉球,向插管移动的反方向拉,即可使套管尖端顺利进入心室。见到套管内的液面随着心搏上下波动后,将松结扎紧并固定在套管的小钩上。用滴管吸去套管内血液,以防止血块堵塞套管。
(3)结扎右侧主动脉,剪断主动脉,持套管提起心脏,自静脉窦以下把其余血管一起结扎(切勿伤及或结扎静脉窦),分离周围组织,在结扎处下剪断血管,使心脏离体。并用任氏液连续换洗,至无血色,使插管内保留1.5ml左右的任氏液。
3、将蛙心套管固定于铁架台,用带有长线的蛙心夹在心舒期夹住心尖部,将长线连于张力换能器。
4、打开电脑及BL-410系统。记录一段正常心脏搏动曲线后,依次换加下列药液。每加一种药液后,密切注意心脏收缩强度、心率、房室收缩的一致性等方面的变化。
(1)换入低钙任氏液。
(2)当心脏收缩显著减弱时,向套管内加入5%洋地黄溶液0.1~0.2ml(或0.1%毒毛旋花子苷K溶液0.2ml)。
(3)当作用明显时,再向套管内加入1%氯化钙溶液2~3滴(过量)。
[报告要点] 打印或复印心脏的收缩曲线,图上注明加药、换药、心率、房室收缩的一致性、心室体积变化等方面的说明。
[讨论] 在本实验中可以看到强心苷的哪几种药理作用?
[注意事项]
1、本实验以青蛙心脏为好。因蟾蜍皮下腺体有强心苷样物质,可降低对强心苷的敏感性。
2、在整个实验过程中应保持套管内液面高度不变,以保证心脏固定的负荷。
3、在实验过程中,基线的位置、放大倍数、描记速度应始终一致。
4、在实验中以低钙任氏液灌注蛙心,使心脏的收缩减弱,可以提高心肌对强心甙的敏感性。
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