工业微生物学实验试卷B08-09答案.docVIP

题号 一 二 三 四 五 六 七 八 总成绩 得分 得分 一、名词解释（共16 分，每小题4分） 1．大肠菌群 大肠菌群系指一群在37℃、24h能发酵乳糖，产酸、产气，需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。 2．培养基 是人工配制的能满足微生物生长繁殖和积累代谢产物的营养基质。 3．无菌操作 培养基经灭菌后，用经过灭菌的接种工具在无菌条件下接种含菌材料于培养基上，这一操作称为无菌操作。 4．假菌丝 酵母生长旺盛时，出芽形成的芽细胞尚未脱离母细胞又长出了新芽，容易形成成串的细胞。如果各细胞之间连接处面积小于细胞直径，形成的这种藕节状的细胞串称为假菌丝。 得分 二、填空题（共30分，每空1分） 1. 微生物培养基的分类方法和种类很多，如按培养基中凝固剂含量的多少可分为 固体 、 半固体 和 液体 培养基；按照培养基的原料来源可分为 天然 、 合成 和 半合成 培养基，如PDA培养基根据其原料来源属于其中的 半合成 培养基。 2. 培养基的灭菌一般多采用高压蒸气灭菌，灭菌压力为0.1Mpa，即 121 ℃，时间为20min，若培养基中含糖成分的含量较高，一般多采用过滤除菌或减压灭菌，灭菌温度为 115 ℃。 3. 对不同的微生物进行斜面接种时，常根据需要采用不同的接种方法，如细菌和放线菌多采用密波状蜿蜒划线，酵母菌多采用 中央划线 法，用来观察菌种的形态和培养特征；霉菌多用 点接 法。 4. 显微测微尺主要由 目镜 测微尺和 镜台 测微尺组成. 在进行细胞大小测定之前, 目镜 测微尺要先进行标定。 5．枯草芽孢杆菌经过革兰氏染色后，菌体部分呈 紫 色，芽孢颜色为 无色 。 6．三糖铁高层琼脂斜面中含有的糖主要有葡萄糖、乳糖和蔗糖三种，培养基中加入了指示剂酚红, 它在pH小于6.8时为黄色, 大于8.4时为红色。伤寒沙门氏菌在该培养基里生长时，只能利用 葡萄糖 产酸，产酸量也小。处于高层琼脂斜面表面的有机酸有的挥发，有的被氧化，很快消失。因此，表面黄色在短时间内也消失了。又因伤寒沙门氏菌分解氨基酸等产生 碱性 物质，所以高层琼脂斜面表面又转成 红色 。而底层在比较短的培养时间为 黄 色。而大肠杆菌在该培养基中生长时，能利用其中所有的糖，培养基上下全为 黄 色。 7．根据微生物菌种保藏的原理，一般微生物菌种保藏常需满足的条件是： 低温 、 干燥 、__缺氧（隔绝空气） 。 8．糖发酵实验中加杜氏管的目的是便于观察 产气 现象。 9. 乳糖胆盐发酵培养基（大肠菌群测定）中加入胆盐的目的是 抑制革兰氏阳性菌的生长 。 10．革兰氏染色中对染色标本进行固定的目的是：杀死微生物固定细胞结构、防止标本被水冲掉、改变染料对细胞的通透性。 得分 三、判断题（共8分，每小题1分） 1．使用手提灭菌锅灭菌后,为尽快排除锅内蒸汽,可直接打开排气阀排气镜台测微尺每小格的实际长度是10微米实验室做固体培养基常加2%的琼脂作凝固剂做半固体培养基时琼脂加入量通常是1%。血球计数板计数区的面积是1mm2。霉菌 麦芽汁（或察氏培养基） 28－30℃ 6.6－6.7 乳酸苯酚油做 介质制片，高倍镜观察 2. 简述酵母菌死亡率测定的原理。 答：死亡率测定的原理：活的微生物，由于不停的新陈代谢，使细胞内氧化还原值低，且还原能力强。当某种无毒的染料进入活细胞后，可以被还原脱色；当染料进入死细胞后，这些细胞因无还原能力或还原能力差而被着色。在中性和弱酸性条件下，活的细胞原生质不能被染色剂着色，若着色则表示细胞已经死亡，故可以此来区分活菌和死菌。 方法：取0.05%美蓝液一滴，置载玻片中央，然后取酵母液少许加入美蓝液中混匀，染色2~3分钟，加盖片，于高倍镜下进行观察，并计数已变蓝的细胞（可计5~6个视野的细胞总数）。 计算公式： 3. 简述湿热灭菌比干热灭菌更有效的原因。 答：在同一温度下，湿热的杀菌效力比干热大，其原因有三：一是湿热中细菌菌体吸收水分，蛋白质较易凝固，因蛋白质含水量增加，所需凝固温度降低，二是湿热的穿透力比干热大；三是湿热的蒸汽有潜热存在，每1克水在100时，由气态变为液态时可放出2．26kJ（千焦）的热量。这种潜热，能迅速提高被灭菌物体的温度，从而增加灭菌效力。⑴ 产酸：细菌发酵乳糖产酸，使石蕊变红。 ⑵ 产碱：细菌分解酪蛋白产生碱性物质，使石蕊变蓝。 ⑶ 胨化：细菌产生蛋白酶，使酪蛋