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微生物探究实验归类解法指导 谭家学（湖北省郧县第二中学442500） 微生物在生产、生活中有广泛的应用，它与人类关系密切，是近几年高考考查的重点，本文对有关微生物的探究实验进行例析，引导同学们掌握此类题的解法。 一、分离提纯微生物的实验 根据微生物的生长代谢特点，用不同种类的培养基进行分离提纯。如在基本培养基中加入青霉素可分离纯化酵母菌、霉菌；在基本培养基中加入高浓度的食盐可分离纯化金黄色葡萄球菌。 【例1】某同学在做微生物实验时，不小心把圆褐固氮菌和酵母菌混在一起。该同学设计下面的实验，分离得到纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌。 实验原理：圆褐固氮菌是自生固氮菌，能在无氮培养条件下生长繁殖而酵母菌则不能；青霉素不影响酵母菌等真菌的生长繁殖，而会抑制圆褐固氮菌的生长繁殖。材料用具：(略)主要步骤：制备两种培养基，将两种培养基各自分成两份，依次标A、a和B、b。______________________________，条件培养________天。 分别从A、B培养基的菌落中挑取生长良好的菌并分别接种到a、b培养基中，适宜条件下培养34天。⑷请回答：本实验中，______培养基B、b_________培养基根据上述原理配制的培养基属于_______________培养基。 根据所需目的配制上述培养基时除营养要协调外还应注意_______________。 实验步骤中第③步的目的是______________。圆褐固氮菌与酵母菌在结构上的主要差异为_________。 青霉素抑制圆褐固氮菌的生长繁殖，其作用机理是破坏或抑制其细胞壁的形成。请据此推测不影响酵母菌与真菌生长繁殖的原因是______________________________。圆褐固氮菌是自生固氮菌酵母菌青霉素不影响生长繁殖，而会抑制圆褐固氮菌的生长繁殖青霉素⑶②分别向A、B培养基中接种混合菌⑷①无氮含青霉素pH要适宜 ③分离得到纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌 ④圆褐固氮菌无成形的细胞核 ⑤圆褐固氮菌为原核生物，其细胞壁主要为糖类和蛋白质，而酵母菌则不同 二、测量微生物含量的实验 微生物的数量可以根据菌落的大小或亚甲基蓝溶液褪色快慢来判断，在相同时间内菌落越大或亚甲基蓝溶液褪色越快，细菌越多；反之越少。 【例2】空气中的含菌量是衡量空气质量的指标之一。为了检测学校生物实验室、教室、校长室、小树林四个地方空气中的含菌情况，请利用所提供条件设计一个简单的实验。 （1）请用100毫升量筒、四副培养皿、煮沸过的洗碗水设计取样的实验步骤。 （2）请用4支试管、滴管、0.01%亚甲基蓝溶液(蓝色，其可被分解而褪色)设计检测的实验步骤。 （3）实验结果的预测及分析。 （4）你所设计的实验检测到的是______________细菌的相对数量。 【解析】亚甲基蓝溶液是活体染色剂，呈蓝色，活体将其分解变为无色，根据褪色时间的长短判断微生物数量，褪色越快，说明微生物越多，反之越少。 【答案】（1） ①用量筒量取等量的煮沸过的洗碗水分别倒入4副培养皿中。②分别将以上4副培养皿暴露放置于4个场所。③静置1～3天后，同时加盖取回。 （2）①分别取等量放置过的洗碗水放入4支试管中。②在每支试管内滴加5～10滴0.01%亚甲基 蓝溶液置于温暖处。 （3）根据4支试管内洗碗水在相同时间内褪色的程度来判定空气中的 含菌量。褪色程度最大的 空气中的含菌量相对最高；褪色程度最小的，空气中含菌量最低。 （4）好氧性。 三、微生物遗传物质的探究实验 微生物的遗传物质是DNA或RNA，对于有细胞结构的生物遗传物质一定是DNA，对于病毒遗传物质是DNA或者是RNA，可以利用DAN酶或RNA酶处理核酸，观察有无病毒后代产生来确定。 【例3】某科研小组对禽感病毒遗传物质进行如下实验：实验原理：（略） 实验目的：探究禽感病毒遗传物质是DNA还是RNA。 材料用具：显微注射器，禽流感病毒核酸提取物， 活鸡胚，DAN酶，RNA酶，蛋白酶。 实验步骤：第一步：取等量活鸡胚两组，用显微注射技术分别向两组活鸡胚细胞中注射有关物质。 第二步：在适宜条件下培养。第三步：分别从培养后的鸡胚中抽取样品，检测是否产生禽流感病毒。 实验相关内容如下表： 注射的物质 实验现象预测（有无禽流感病毒） 相关判断（禽流感病毒的遗传物质） 第一组 核酸提取物＋ ________________ 1.如果有 1.则RNA是遗传物质 2.如果无 2.则DNA是遗传物质 第二组 核酸提取物＋ ________________ 3.如果有 3.则DNA是遗传物质 4.如果无 4.则RNA是遗传物质 ⑴完成表格中有关的内容的填空。 ⑵该科学探究过程所依据的生物学理论基础是a.______________________；b