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微生物的实验室培养导学案
课题1 微生物的实验室培养
【学习目标】
了解培养基的基础知识,进行微生物培养和无菌技术的操作。
【学习重、难点】 无菌技术的操作
【活动过程】 学习活动一 培养基常识
【自主学习】阅读教材,思考填写下列内容:
1.概念:人们按照微生物对________的不同需求,配制出供其________的营养基质。
2.分类:按其培养基物理形态可分为________ 培养基和________培养基(含琼脂)等;
3.成分:a、基本成分:各种培养基一般都含有____ __、________ (供碳元素的物质)、________ (供氮元素的物质)和__________;
b、其他条件:此外还要满足微生物生长对 、 以及 的要求。
【合作探究】
从细胞的化学元素组成来看,培养基中为什么都含有这些营养成分?
学习活动二 了解无菌技术
【自主学习】 阅读教材,思考填写下列内容:
(一)获得纯净培养物的关键是________ ,具体操作如下:
1.对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行________ 。
2.将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行________ 。
3.为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在________ 附近进行。
4.实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与________ 相接触。
(二)消毒和灭菌
1、比较消毒和灭菌
比较项 理化因素A.是碳源的物质不可能同时是氮源 B.凡碳源都提供能量
C.除水以外的无机物只提供无机盐 D.无机氮源也能提供能量
2.细菌培养过程中分别采用了高压蒸气、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理,这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌A.接种针、手、培养基B.高压锅、手、接种针 C.培养基、手、接种针D.接种针、手、高压锅 1.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作步骤是:
、 、 、 、 。
2.倒平板:待培养基冷却至 ℃左右时在酒精灯火焰附近操作进行。其过程是:
①在火焰旁右手拿 ,左手 ;
②使锥形瓶的瓶口 ;
③左手将培养皿 ,右手 ,立刻盖上皿盖。
④待平板冷却凝固后,将平板 。
【合作探究】
1、锥形瓶的瓶口通过火焰的目的是什么?
2、倒平板后,将平板倒过来的目的是什么?
3、牛肉膏蛋白胨固体培养基配置过程中,PH该在何时控制在哪个范围内?
4、如何确定配制好的培养基灭菌是否合格? ________ 的目的。
④将冷却的接种环伸入到 ________ 。
⑤将菌种试管口再次通过火焰后塞上棉塞。
⑥将皿盖________ ,把接种环伸入平板内划________平行线,盖上皿盖不要___ 。⑦灼烧接种环,冷却后从第一区划线___ 开始向第二区域内划线。重复上述过程,完成三、
四、五区域内划线。注意不要将___ 相连。
⑧将平板___ 放在培养箱中 培养。
2.稀释涂布平板法则是将菌液进行___ ,然后将___ 分别涂布到___ 培养基上进行培养。当稀释倍数足够高时,即可获得___ 细菌形成的标准菌落。
系列稀释操作:
盛有___ mL水的无菌试管6支___ ,编号101、102、103、104、105、106。
灼烧冷却的移液管吸取___ mL菌液注入编号为101试管中,并吹打3次使之混匀。
101倍液中吸取___ mL菌液注入到编号为102试管内吹打均匀,获得102倍液。依此类推。
3.将接种后的培养基和一个未接种的培养基放入37℃的培养箱中培养12-24h,观察并记录
第三步:菌种的保藏
1、临时保藏: 接种到_______培养基上,待菌落长成,将试管放入____℃的冰箱内保藏。
保藏时间:_______月 缺点:时间______,菌落易_______________
2、长期保存: 采用_________法,将装有1mL甘油的甘油瓶先灭菌,冷却后与1mL菌液充分混合均匀,放在_____℃的冷冻箱内保存。
【合作探究】
1、取菌种前灼烧接种环的目的是什么?
2、取菌种和划线前都要求接种环冷却后进行
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