牛膝不同炮制品中多糖研究.docVIP

中 药 炮 制 研 究 实 验 设 计 牛膝不同炮制品中多糖的研究 摘要：通过探讨牛膝的炮制目的，炮制方法以及不同的炮制方法对牛膝中所含多糖的影响和牛膝现代炮制研究从而更方便于我们对牛膝的炮制研究。 关键词：牛膝 炮制目的 炮制方法 多糖 现代研究 牛膝为苋科植物牛膝的干燥根,其药效生用散瘀血、消肿痛、引血下行,制过后有补肝肾、强筋骨,可增强活血祛瘀、通经止痛的功效。是临床常用中药。在汉代至清代以及现代的医药文献中,记载和保留了大量有关牛膝的炮制研究资料。本文在文献的基础上进一步的进行牛膝的炮制目的，方法，不同炮制品所含多糖的差异及现代化的研究。 1 牛膝的炮制目的 中药炮制是指在中医理论的指导下,按中医用药要求将中药材加工成饮片的传统方法和技术,是中医临床用药的必备工序。通过炮制可对中药起到减量作用、增量作用、杀酶保苷作用、产生新化合物、去除结晶水等作用。从而更符合治疗需要,充分发挥药效进而符合疾病的实际治疗需要。牛膝含糖类、皂苷类、甾类成分。多糖是牛膝中的重要成分, 在对牛膝化学成分和药理作用的研究中占有很大的比例。临床上牛膝常以生牛膝、酒牛膝、盐牛膝、牛膝炭炮制品入药, 其中生牛膝具有补肝肾，强筋骨，引血下行的功效；酒牛膝可增强活血通络的作用；盐牛膝能引药下行入肾，增强补肾养筋的作用而牛膝炭主要是止血作用。通过研究牛膝不同炮制品中多糖的差异, 为阐明牛膝临床应用提供了依据。 2 牛膝的炮制方法 牛膝:取原药材，除去杂质，洗净，润透，除去芦头，切断（10-15 mm），晒干或者低温干燥。 酒牛膝: 取净牛膝段,加黄酒拌匀,闷润，待酒被吸尽后，置锅内,用文火加热,炒干,取出,放凉。每100g牛膝用黄酒10g。 盐牛膝: 取净牛膝段,加盐水拌匀,闷润，待盐水被吸尽后，置锅内，用文火加热,炒干,取出,放凉。每100g牛膝用食盐2g 。 牛膝炭: 取净牛膝段,置锅内,用武火炒至外表黑色,断面深棕色, 取出,晾干。 3 牛膝不同炮制品中多糖的差异（苯酚-硫酸法） 3.1 材料 Spectrumlab54 型紫外可见分光光度计，离心机，中草药粉碎机。D-无水葡萄糖对照品( 中国药品生物制品检定所, 批号: XXXXXX-XXXXXX),浓硫酸、苯酚、乙醇等均为分析纯,牛膝的不同炮制品：酒牛膝，盐牛膝，牛膝碳。 3.2 方法与结果 3.2.1　对照品溶液的配制: 取D -无水葡萄糖对照品约4 mg ,精密称定,置100mL量瓶中,加蒸馏水溶解并稀释至刻度,即得。 3.2.2　5%苯酚溶液的配制: 将结晶的苯酚置55℃水浴锅中加热溶解,然后常压蒸馏收集25mL,置500mL量瓶中,加蒸馏水稀释至刻度,放入冰箱中备用。 3.2.3　供试品溶液的制备: 取牛膝粉末10g,精密称定,置500mL圆底烧瓶内,加蒸馏水250mL,加热提取1h,提取液离心去除残渣,取上清液加热浓缩至100mL,加适量的95%乙醇,静置12h,离心。分离沉淀,干燥后用蒸馏水溶解并定容至500mL,用氯仿-正丁醇(4∶1)与溶液按体积比4∶1脱蛋白,分取上清液,精密量取1.0mL,加无水乙醇至乙醇体积分数达70%,冷藏,再次离心,取沉淀,依次加乙醚、无水乙醇洗涤3次,挥干,沉淀加水溶解,定容至100mL备用。 3.2.4　最大吸收波长的选择: 精密量取葡萄糖对照品溶液0.6mL,加蒸馏水至2.0mL,加入5%苯酚溶液1mL,混匀,迅速加入浓硫酸5mL,振摇然后置沸水浴中加热,取出后立即置冷水浴中冷却30min，精密量取蒸馏水2.0mL,同法制得空白溶液，在紫外-可见分光光度计上于200～800nm扫描,确定最大吸收波长为490nm。 3.2.5　线性关系考察: 精密量取葡萄糖对照品溶液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL,分别加蒸馏水至2.0mL,加入5%苯酚溶液1mL,按照苯酚-硫酸法处理,于490nm处测定吸光度值。以吸光度为纵坐标,质量为横坐标,绘制标准曲线,得回归方程。结果表明葡萄糖在X～X mg/mL与吸光度呈良好的线性关系。 3.2.6　精密度试验: 精密量取供试品溶液0.6mL,加蒸馏水至2.0ml,按照苯酚-硫酸法处理,测定吸光度值,重复操作测定5次,计算RSD为X.XX% 。 3.2.7　稳定性试验: 精密量取供试品溶液0.6mL,加蒸馏水至2.0mL，按照苯酚-硫酸法处理,测定吸光度值,每隔20min测定1次,结果在2h内测定结果稳定。 3.2.8　重现性试验: 精密量取牛膝生品,共6份,制备供试品溶液,每份0.6mL,分别加蒸馏水至2.0mL,按照苯酚-硫酸法处理,测定吸光度值,计算多糖的质量分数,RSD为X.XX%。 3.2.9　回收率试验: 精密称取牛膝生品约5g左右,加入定量的葡萄糖对照品,制备供试品溶液,按照苯酚-硫酸法处理,测定吸