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色素的提取与分离2
实验:提取和分离叶绿体中的色素
一、实验原理
1.叶绿体中的色素能溶解在丙酮(有机溶剂:酒精、汽油、苯、石油醚等)中,所以用丙酮可提取叶绿体中色素。
2.色素在层析液中溶解度不同,溶解度高的色素分子随层析液在滤纸条上的扩散得快,溶解度低的色素分子随层析液在滤纸条上的扩散得慢,因而可用层析液将不同的色素分离。
二、实验步骤
1、提取色素
2、制备滤纸条
3、画滤液细线
4.分离色素(纸层析法)
观察结果
三、注意事项:
1、选材时应注意选择鲜嫩、色浓绿、无浆汁的叶片。如菠菜叶、棉花叶、洋槐叶等。
2.在研磨时要加少许二氧化硅,目的是为了研磨充分,有利于色素的提取;加少许碳酸钙的目的是为了防止研磨过程中,叶绿体中的色素受到破坏。
3、画滤液细线时应以细、齐、直为标准,重复画线时必须等上次画线干燥后再进行,重复2-3次。
4、层析时不要让滤液细线触及层析液。这是因为色素易溶解在层析液中,导致色素带不清晰,影响实验效果。
5、在叶绿体色素的提取和分离实验中:
(1)研磨绿叶时为防止叶绿素被破坏而加入CaCO3的原理是中和细胞中的有机酸。
(2)滤纸可以吸附色素,降低滤液中色素含量,影响实验结果,应用单层尼龙布。
(3)定性滤纸进行干燥处理的目的是使层析液在滤纸条上均匀扩散。
(4)对滤纸剪去两角的目的是使层析液同时到达滤液细线。
(5)所画滤液细线越细越齐越好,这样可避免 色素带部分重叠 以取得较好的分离效果。
(6)层析装置加盖的目的是避免层析液挥发影响效果并引起中毒。
(7)滤纸条上色素带最宽的颜色是蓝绿色,相邻色素带间距离最近的是叶绿素a与叶绿素b。
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