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高三生物测试题27
细胞工程章节概述目标认知学习目标重点难点知识精讲重点知识讲解 (1)培养基
成分 主要内容 作用 水 水(H2O) 为细胞代谢提供条件,参与细胞代谢 无机盐 大量元素:N、P、S、K、Ca、Mg。微量元素:Fe、Mn、Mo、B、Cu、Zn 满足植物对各矿质元素的需求,参与各种物质合成、代谢调节,生长必需 碳源 蔗糖 重要营养成分:愈伤组织不光合,利用蔗糖异养生活 大气CO2 重要碳源:完成组织分化,形成营养器官后,叶片能进行光合自养 氮源 NH4+、NO3— 合成核酸、蛋白质、辅酶、核苷酸等 生长因子 细胞分裂素、生长素 必不可少的调节物质:诱导脱分化形成愈伤组织,诱导愈伤组织再分化成植株 维生素 明显促进离体组织的生长 状态 固体培养基或半固体培养基 形成植物地上、地下部分,利于生长 培养要求 无菌操作条件常温培养光照条件更换培养基 细菌繁殖速度快,会产生污染植物细胞在常温下生长正常满足愈伤组织,及植株的光照需求防止代谢废物积累,满足营养需求 (2)过程: 脱分化:高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程 再分化:愈伤组织继续培养,重新分化成根或芽等器官的过程 愈伤组织:排列疏松、无规则,高度液泡化的无定型状态的薄壁细胞植物体细胞杂交 概念: (1)来自两个不同植物的体细胞融合成一个杂种细胞(植物细胞融合) (2)把杂种细胞培育成植株(植物组织培养) 过程: 植物细胞工程的应用: (1)植物繁殖的新途径①微型繁殖技术,快速繁殖优良品种;②作物脱毒,利用分生区部分进行组织 培养,获得脱毒苗;③生产人工种子。 (2)①单倍体育种:通过花药离体培养获得单倍体植株,再经过染色体加倍形成稳定的遗传新品种。 ②突变体的利用:筛选出组织培养中产生的突变体,培育新品种。 (3)通过组织培养技术培育植物细胞,获取细胞产物。如紫杉醇的工业生产。动物细胞培养 概念:从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后放在适宜培养基中,让这些细胞生长和增殖。 过程: 条件:无菌、无毒的环境、适宜的温度和pH和气体环境(一定浓度的CO2) 营养(碳源:葡萄糖;氮源:氨基酸;生长因子:维生素和动物血清;无机盐;水) 应用:获得有价值的生物制品,作为基因工程的受体细胞,培养细胞用于生理、病理或药理实验。动物细胞融合 灭活病毒的作用:凝集蛋白质,使膜分子重新排布。 比较植物体细胞杂交和动物细胞融合的异同:
细胞工程 植物体细胞杂交 动物细胞融合 基本原理 细胞生物学和分子生物学的原理和方法,工程学手段改造细胞 操作水平 细胞整体水平、细胞器水平 实质内容 改变遗传物质、产生新的性状,获得细胞产品或个体 技术手段 植物细胞杂交、植物细胞融合植物组织培养 动物细胞培养、动物细胞融合、单克隆抗体制备、胚胎移植、核移植 理论基础 植物细胞的全能性、膜的流动性 膜的流动性、细胞增殖 诱导手段 物理:离心、振动、电激化学:聚乙二醇 物理:电激化学:聚乙二醇生物:灭火病毒(灭火仙台病毒) 诱导过程 (1)去细胞壁:纤维素酶、果胶酶(2)原生质体融合获得杂种细胞(3)植物细胞培养获得植株或用于发酵 (1)胰蛋白酶处理获得分散的单个动物细胞(2)诱导融合获得杂交细胞(3)动物细胞培养获得细胞产品 应用 白菜——甘蓝杂交植物 单克隆抗体的制备(杂交瘤细胞) 单克隆抗体 概念:单个B淋巴细胞进行无性繁殖获得的细胞群,产生化学性质单一,物质特异性强的抗体 基本原理:(1)一种淋巴细胞克隆只产生一种特异性抗体 (2)细胞融合技术产生的杂交瘤细胞可以保持亲代双方的特性 (3)杂交瘤细胞的筛选,体外培养大量增殖,获得所需抗体 优点:
项目 分泌 特点 生产 单克隆抗体 杂交瘤细胞 特异性强、灵敏度高 产量高,易纯化分离 常规抗体 各淋巴B细胞 特异性差、灵敏度低 产量低,分离困难 制备过程: 杂种细胞的筛选: 单克隆抗体制备过程中,总共有两次筛选,第一次筛选出杂交瘤细胞,第二次筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞,两次筛选的原理和方法是不相同的。 第一次筛选的原理与方法:细胞融合后,杂交瘤细胞的选择性培养是第一次筛选的关键。普遍采用的HAT选择性培养液是在普通的动物细胞培养液中加入次黄嘌呤(H)、氨基喋呤(A)和胸腺嘧啶核苷酸(T)。在HAT培养液中,未融合的效应B细胞和两个效应B细胞融合缺乏在体外培养液中增殖的能力,一般10d左右会死亡。对于骨髓瘤细胞以
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