天然药物化学第二,第三节,色谱分离.ppt

第三节 色谱分离法 假设我们要分离一些结构很相似的物质，性质相似的物质，能用之前的几种分离方法吗？ 根据色谱原理不同，色谱法主要有| (单选题 1分) A. 硅胶和氧化铝色谱 B. 聚酰胺和硅胶色谱 C. 分配色谱、吸附色谱、离子交换色谱、凝胶过滤色谱 D. 薄层和柱色谱 E. 正相和反相色谱 分类 吸附色谱——利用固定相中吸附剂表面对各组分 不同的物理吸附能力(液—固色谱） 分配色谱——不同组分在两相中有不同的分配系 数(液—液色谱) 离子交换色谱——利用离子交换原理(离子色谱) 凝胶色谱——利用多空性物质对不同大小分子的 排阻作用(液-固色谱) 2、大孔树脂的分离原理是： A、吸附与分子筛 B、分配 C、氢键吸附 D、分子排阻 3、凝胶过滤法分离物质的原理是：A、分子筛 B、分配 C、氢键吸附 D、离子交换 一、吸附色谱法 吸附色谱法三要素： ①吸附剂(固定相） ②溶剂（流动相） ③被分离化合物的性质 铺好的薄层板在100－110的温度下半小时，这一过程称： A 、干燥 B 、脱水 C 、 活化 D 、烘干 （4）流动相的选择 用硅胶或氧化铝作色谱分离时，如被测成分极性较大，用活性较低的吸附剂，极性较大的流动相；被测成分极性较小，选用活性较强的吸附剂，极性较小的冲洗剂 4.洗脱顺序 吸附弱的组分先被洗脱，吸附强的组分后被洗脱。吸附的强弱与组分的性质(极性、取代基的类型和数目、构型）有关。一般规律是： ①极性大，， ②碳原子数目少 ③双键和共轭双键多 ④取代基的极性基团多 烷与烯，谁的吸附强？ 常见化合物的吸附能力的顺序如下： 烷烃(-CH3、-CH2-)烯烃(-CH=CH-)醚类(-OCH3)硝基化合物(-NO2)酯类(-COOR)酮类(C=O)醛类(-CHO)硫醇(-SH)胺类(-NH2)酰胺(-NHCOCH3)醇类(-OH)酚类(Ar-OH)羧酸类(-COOH) 硅胶吸附柱色谱常用的洗脱方式是（ ） A．洗脱剂无变化 B．极性梯度洗脱 C．碱性梯度洗脱 D．酸性梯度洗脱 E．洗脱剂的极性由大到小变化 薄层色谱法 2.固定相和流动相 要求： 固定相→机械吸附在惰性载体上的液体,常用的固定液有水、稀硫酸、甲醇、甲酰胺等强极性溶剂 载 体→惰性物质，无吸附性性质稳定，不与固定相和流动相发生化学反应常用的有吸水硅胶、纤维素粉、多孔硅藻土，滤纸等。★ 流动相→必须与固定相不为互溶石油醚、醇类、酮类、酯类、卤代烷及苯等。 8. 液-液分配柱色谱用的载体主要有（ ）（ ）（ ）（ ）（ ） A. 硅胶 B. 聚酰胺 C. 硅藻土D. 活性炭 E. 纤维素粉 3.洗脱顺序 正相色谱 固定相极性大于流动相极性,主要分离极性样品.极性弱的组分先被洗脱，极性强的组分后被洗脱。 反相色谱 固定相极性小于流动相极性,主要分离非极性样品和中等极性样品.极性强的组分先出柱，极性弱的组分后出柱。 7．用正相柱色谱法分离天然药物化学成分时（ ）（ ）（ ）（ ）（ ） A．只适于分离水溶性成分B．适于分离极性较大成分如苷类等 C．适于分离脂溶性化合物如油脂、高级脂肪酸等 D．极性小的成分先洗脱出柱 E．极性大的成分先洗脱出柱 8. 液-液分配柱色谱用的载体主要有（ ）（ ）（ ）（ ）（ ） A. 硅胶 B. 聚酰胺 C. 硅藻土D. 活性炭 E. 纤维素粉 纸色谱法 定义： 纸色谱分离法又称纸层析法，是根据不同物质在两相中的分配比不同而进行分离的一种微量分离方法。 实验步骤 实验原理 实验原理 本实验分离和鉴定的氨基酸混合液：异亮氨酸、赖氨酸和谷氨酸。 氨基酸是无色的，在层析后需在纸上喷洒显色剂茚三酮，斑点呈现蓝紫色。 仪器试剂 主要仪器： （1）玻璃层析筒 150mm×300mm(φ×h)。 （2）层析纸条 100mm×240mm 。 （3）毛细管 直径1mm左右。 （4）喷雾器 仪器试剂 主要试剂： （1）展开剂 正丁醇:甲酸:水＝60:12:8。 （2）氨基酸标准溶液 2 g·L-1水溶液。 （3）茚三酮 1 g·L-1乙醇溶液。 （4）氨基酸混合试液