微生物的培养与应用资料.ppt

归纳整合 土壤中纤维素分解菌的分离实验的具体操作步骤 1.土样采集 土样采集的方法与本专题课题2类似。土样的采集要选择富含纤维素的环境，这是因为在纤维素含量丰富的环境，通常会聚集较多的分解纤维素的微生物。如果找不到合适的环境，可以将滤纸埋在土壤中，过一个月左右也会有能分解纤维素的微生物生长。 2.选择培养 选择培养需要的仪器有：250mL锥形瓶、无菌称量瓶、药匙、1 mL和10 mL的移液管、天平、摇床、温度计等。 培养基的制备参照课本旁栏中的比例配制。在250 mL锥形瓶中装入30 mL培养基，用8层纱布做成瓶塞，将瓶口塞紧，再在瓶塞外包裹两层包装纸（或报纸），用线绳扎紧，在121 ℃下高压蒸汽灭菌20 min。 选择培养的操作：称取土样20 g，在无菌条件下加入装有30 mL培养基的摇瓶中。将摇瓶置于摇床上，在30 ℃下振荡培养1～2 d，至培养基变混浊。此时可以吸取0.1 mL培养液进行梯度稀释和涂布平板，也可以按课本中所述，重复选择培养的步骤一次，然后再进行梯度稀释和涂布平板。 3.刚果红染色法分离纤维素分解菌 这一步所需要的仪器有：无菌培养皿、涂布器、1 mL移液管、装有9 mL无菌水的20 mL大试管、温箱等。 培养基的制备参照课本旁栏中的比例配制。在500 mL三角瓶中装入200 mL培养基，在121 ℃下高压蒸汽灭菌20 min。 倒平板操作：将灭菌后的固体培养基溶化，按无菌操作的要求，在无菌的培养皿中倒入15～20 mL培养基，凝固后待用。 制备菌悬液：按照本专题课题1的稀释操作方法，将选择培养后的培养基进行等比稀释，稀释最大倍数至106。 涂布平板：将稀释度为104～106的菌悬液各取0.1 mL，滴加在平板培养基上，用涂布器将菌液涂布均匀，在30 ℃倒置培养，至菌落长出。每个稀释度下需涂布3个平板，并注意设置对照。 跟踪训练 配制的培养基成分是：纤维素粉、NaNO3、Na2HPO4、KH2PO4、MgSO4、KCl、酵母膏、水解酪素，该培养基能使下面哪种微生物大量繁殖（ ） A．酵母菌 B．自生固氮菌 C．各种细菌 D．纤维素分解菌 解析：该培养基内含有纤维素粉，故能够分解纤维素的菌类才能大量繁殖，故答案为D。 答案：D 热点聚焦 微生物培养的基本技术 （2009 年上海卷）氯苯化合物是重要的有机化工原料，因其不易降解，会污染环境。某研究小组依照下图所示实验方案筛选出能高效降解氯苯的微生物SP1菌。培养基配方如表1。 表1培养基的组成 3g 3g - 硝酸铵 适量 适量 - 无机盐（无碳） 20-80mg 50mg 5mg 氯苯 5g 5g 5g 氯化钠 - - 10g 蛋白质 - - 5g 牛肉膏 Ⅲ号 Ⅱ号 Ⅰ号 液体 培养基 1L 1L 1L 蒸馏 (1)配制Ⅱ号固体培养基时，除添加Ⅱ号液体培养基成分外，还应添加1％的__________。 (2)培养基配制时，灭菌与调pH的先后顺序是__________。 (3)从用途上来说，Ⅰ号培养基和Ⅱ号培养基分别属于__________培养基和__________培养基。在Ⅱ号培养基中，为SP1菌提供氮源的成分是__________。 (4)在营养缺乏或环境恶劣时，SP1的菌体会变成一个圆形的休眠体，这种休眠体被称为__________。 (5)将SP1菌接种在含不同浓度氯苯的Ⅲ号培养液中培养，得到生长曲线如下图所示。从图中可知，SP1菌在__________培养条件下最早停止生长，其原因是__________。 解析：第(1)问中还应添加1%的琼脂；培养基配制时，应先调pH，后灭菌；选择培养基是在培养基中加入某些生物因子或化学物质,对培养的细胞具有选择性,适应者存活,不适者死亡，从而达到选择的目的。Ⅰ号培养基是为了获得更多的菌株，属于通用培养基，Ⅱ号培养基是为选择出SP1菌株，属于选择培养基，Ⅱ号培养基成分中所含的N物质为硝酸铵，它为SP1菌株提供氮源；在恶劣环境下，一些菌体会形成芽孢休眠体来度过不良环境；SP1菌株是以氯苯为碳源，当氯苯消耗尽，菌株因缺少碳源而不能继续生存，故氯苯含量越少，SP1菌株越早停止生长。 答案: （1）琼脂（2）先调pH，后灭菌 （3）通用 选择硝酸铵 （4）芽孢 （5）20 mg/L氯苯氯苯最早耗尽 * 选修1 生物技术实践 专题2 微生物的培养与应用 考纲内容及能力要求 考向定位 1．微生物的分离与培养 2．某种微生物数量的测定 3.培养基对微生物的选择作用 4.利用微生物发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用 1．了解微生物所需要的营养要素 2．理解培