秀丽隐杆线虫剖析.doc

分类号 编号 烟 台 大 学 毕 业 论 文 利用秀丽隐杆线虫筛选抗白色念珠菌活性物质 Screening anti-Candida albicans substances using Caenorhabditis elegans 利用秀丽隐杆线虫筛选抗白色念珠菌活性物质 摘要：以秀丽隐杆线虫作为模型生物进行抗菌物质筛选。用白色念珠菌感染线虫后，采用不同浓度的已知抗菌药物治疗，观察线虫存活情况，确定合适用药浓度；采用微拟球藻提取物对白色念珠菌感染线虫治疗，观察线虫存活情况，与已知抗菌药物作用效果对比，从而筛选出可用于治疗白色念珠菌活性物质。实验发现，添加10~20mg/L的氟康唑对感染白色念珠菌的秀丽隐杆线虫治疗效果较好，在一定剂量范围内，治疗效果和剂量成线性关联；微拟球藻提取物不具备抗菌活性。 关键词：秀丽隐杆线虫；白色念珠菌；抗菌物质 Abstract: In the study, Caenorhabditis elegans were used as model organism to screen antibacterial agents. C.elegans were infected by Candida albicans and treated by different concentrations of antibacterial agents which had been known and extracts from Nannochloropsis OZ-1, observating the survival situation and comparing the effects of the two antibacterial agents, thus, the bioactive substance could be screened which cured the Candida albicans. The result showed that Candida albicans could be treated by 10~20 mg/L Fluconazole, moreover within the scope of the dose, treatment effect and the dose of a linear correlation. And the results showed that extracts from Nannochloropsis OZ-1 did not have antibacterial activity. Key words: C.elegans；Candida albicans；Antibacterial substances 目录 1 文献综述 1 1.1 秀丽隐杆线虫 1 1.2 秀丽隐杆线虫研究进展 1 1.2.1 环境毒理学的研究 2 1.2.2 程序性细胞死亡的研究 2 1.2.3 秀丽隐杆线虫感染模型的建立 2 1.2.4 抗菌物质作用机制的研究 2 1.2.5 病菌致病机制和线虫免疫机制的研究 3 1.3 白色念珠菌 3 1.4 抗菌物质的筛选 4 1.5 实验研究意义 5 2 材料和方法 6 2.1 材料 6 2.1.1 实验药品 6 2.1.2 实验仪器 6 2.1.3 线虫和菌株 7 2.1.4 培养基 7 2.1.5 试剂 7 2.2 方法 7 2.2.1 线虫培养和保存 7 2.2.2 线虫同步化 8 2.2.3 线虫真菌感染 8 2.2.4 线虫抗感染治疗 8 2.2.5 观察 8 3 实验结果分析 9 3.1 氟康唑用药浓度的选择 9 3.2 筛选可用于治疗白色念珠菌的微拟球藻提取物 9 4 结论 12 致谢 13 参考文献 14 1 文献综述 1.1 秀丽隐杆线虫 秀丽隐杆线虫[1]（Caenorhabditis elegans）（图1）是一种多细胞真核生物，个体很小，以细菌为食，可独立生存在温度恒定环境中，对人、动植物没有危害。成虫1 mm左右，通体透明，在普通显微镜下可观察。秀丽隐杆线虫有很少的雄性个体，大多数为雌雄同体。秀丽隐杆线虫生命周期很短，从卵到成虫需要3.5 d，平均寿命约为2~3周[2]。雌雄同体个体产卵孵化后，会经历四个幼虫期（L1-L4），L4期生有精子，并在成虫期产卵。雄性也能使雌雄同体受精，且雌雄同体优先选择雄性的精子。当族群拥挤或食物不足时，秀丽隐杆线虫会进入dauer幼虫期，dauer能对抗逆环境，而且不会老化。秀丽隐杆线虫基因组测序完成，是第一个完成的多细胞动