野生型和嵌合体矮牵牛的倍性鉴定及抗旱性比较剖析.ppt

专业：生物科学 作者： 指导老师： 2014年6月12日 野生型和嵌合体矮牵牛倍性鉴定及抗旱性比较 矮牵牛(Petunia hybrida Vilm.),又名碧冬茄, 为茄科矮牵牛属多年生草本植物。花朵硕大，花色艳丽, 花期长, 整个夏、秋季节花开不断，具有较高观赏价值。目前，矮牵牛在国际上已成为主要的盆花和装饰植物。 植物嵌合体是自然界中广泛存在的一种遗传镶嵌形式, 性状通常在花瓣、叶片或枝条上出现, 但不遗传给后代。我们需要研究清楚矮牵牛嵌合体的形态特征、遗传机理、生理特性等，才能更好的指导广泛栽培 。 国外对矮牵牛的遗传规律及杂交育种研究较早，并有一整套完善的F1代育种程序。目前市场上的矮牵牛种子资源多来自国外，价格较高，因此有必要自主开展我国矮牵牛的育种工作。 实验以野生型和嵌合体矮牵牛为材料，结合其形态学特征（叶色、叶厚以及花瓣、花柱）的变化以及遗传分析、细胞学鉴定等方法进行初步的研究，筛选出突变体的优良性状；在室外条件，给植株以干旱处理，采集野生型矮牵牛和嵌合体新鲜叶片分别测叶绿素含量，超氧化物歧化酶(SOD)等抗氧化酶活性，可溶性蛋白（pr）和游离脯氨酸(Pro)含量，超氧阴离子和过氧化氢(H2O2)含量，丙二醛(MDA)和质膜透性，以此来研究野生型与嵌合体矮牵牛抗旱性的差异，进而筛选出抗旱性强和环境适应能力较强的矮牵牛株型。 1 材料与方法 1.1材料 　　　以陇东学院生农科技园花圃里生长良好无病虫害的野生型和嵌合体矮牵牛为实验材料。一周不浇水即干旱处理，采集植株叶片，每次实验设置3个重复。 野生型 嵌合体 1.2 方法 1.2.1形态学鉴定 游标卡尺测野生型和嵌合体矮牵牛的叶长、叶宽、叶厚及花开度、花柱的长和直径、花丝的长和直径。 1.2.2气孔鉴定 　　　制片用OLYMPUS显微镜上的测微系统测量气孔长度、宽度并观察气孔密度。 1.2.3细胞学鉴定—核型分析 　　　制片，用光学显微镜观察染色体，并用OLYMPUS显微镜上的照相系统拍照。 1.2.5 生理指标测定 叶绿素含量测定参照王韶唐等的方法,超氧化物歧化酶(SOD)活性测定参照Beyer和Fridivich的方法,过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性测定参照Aebi的方法,抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性测定参照Beyer和Fridivich的方法,可溶性蛋白(Pr)含量测定参照Bradford的方法,游离脯氨酸(Pro)含量测定参照Bradford的方法，超氧阴离子自由基含量测定参照Sergiev的方法,过氧化氢（H2O2）含量的测定参照Sergiev的方法。丙二醛(MDA)含量测定参照Sergiev的方法,,质膜透性变化参照李合生的方法。 1.3数据统计及分析 实验中每个处理均设3个重复，测得的实验数据均采用SPSS16.0软件进行测验，做差异显著性分析并作图。 2 结果与分析 2.1矮牵牛形态特征比较 叶长(cm) 叶宽(cm) 叶厚(μm) 茎粗(cm) 野生型 3.92 2.92 288.17 0.53 嵌合体 5.41* * 3.59* * 356.08* * 0.66* * 花开度(cm) 花柱长(cm) 花柱直径(cm) 花丝长(cm) 花丝直径(cm) 野生型平均值 6.41 2.26 0.05 1.56 0.06 嵌合体平均值 8.19* * 1.95* * 0.14* * 1.35* * 0.08* * 表1 野生型和嵌合体矮牵牛叶形指数及茎粗比较 注：* *表示野生型和嵌合体矮牵牛在0.01水平有显著差异，下同。 表2 野生型和嵌合体矮牵牛花形指数比较 38% 22.95% 23.57% 24.53% 27.77% 18% 33.33% 15.9% 15.56% 1 2 图1，2分别为野生型和嵌合体矮牵牛叶厚比较 288.17μm 356.08μm 3 4 图3，4分别为野生型和嵌合体矮牵牛花及花丝比较 　　　在相同条件下（温度、水分以及PH等）嵌合体在叶长、叶宽、叶厚、茎粗及花开度、花柱直径、花丝直径等方面比野生型矮牵牛更具优越性，但在花柱长及花丝长方面野生型比嵌合体矮牵牛具有优越性，总体来说嵌合体矮牵牛要比野生型矮牵牛长的茁壮。 2.2野生型和嵌合体矮牵牛气孔特征比较 类别 平均气孔长度 (mm) 平均气孔宽度（mm） 平均气孔密度（个/ mm2） 野生型 1.00±0.12 1.00±0.11 30.2±4.1 嵌合体 1.64±0.11 1.21±0.17 60.3±5.5 野生型矮牵牛的平均气孔开度、气孔密度均比嵌合