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如何采用SDS-Hb法进行血红蛋白测定? 1.HiCN法绘制标准曲线 2.SDS-Hb法标准工作曲线绘制 1)取4份不同浓度抗凝血或溶血液用HiCN法 测定吸光度,并求出其Hb浓度。 2)再用SDS-Hb法测定4份标本的吸光度。 3)以4份标本Hb浓度为横坐标,SDS-Hb法测得 的吸光度为纵坐标,绘制标准工作曲线。 * 分析前质量控制:同红细胞计数 分析中质量控制 技术误差:稀释倍数、分光光度计波长、光缝、比色杯光径需校正 HiCN转化液:棕色玻璃瓶 HiCN参考液:关键 质控物:室内质控 分析后质量控制:同红细胞计数 质量控制 * ①成年:男性:120~160g/L; 女性:llO~150g/L。 ②新生儿:170~200g/L。 ③老年(70岁以上): 男性:94~122g/L;女性87~112g/L。 参考值 * ①轻度贫血,成年男性Hb<120g/L, 成年女性<110g/L; ②中度贫血<90g/L; ③重度贫血<60g/L; ④极度贫血<30g/L。 临床意义 * 三、红细胞形态检查 红细胞大小、形态、染色和内涵物的是否异常 1.显微镜分析法 采用人工显微镜法血涂片染色观察, 是仪器法校准的参考方法和检测的复核方法。 2.计算机图像分析 建立统计模型,以正常红细胞形态 为参比、作出分析, 可用于与红细胞形态变化疾病的辅助诊断。 3. 血液分析仪法 提供红细胞数量及其他相关参数,对异 常结果报警, 但不能提供确切信息,需用镜检血涂片核实。 检测原理和方法学评价 1.有合格的血液细胞形态检验人员 2.选择细胞分布均匀区域进行镜检 3.注意完整规范的检查顺序 低倍镜 细胞分布和染色 油镜 细胞形态,是否存在其他异常细胞 4.减少人为影响因素 全片浏览 质量保证 * * 正常红细胞 双凹圆盘形 大小均一, 平均7.2μm (6.7-7.7μm); 淡粉红色, Hb充盈良好, 中央部位为生理性淡染区,大小约为直径的1/3; 胞质内无异常结。 * 外周血红细胞形态变化 红细胞大小异常 小、大、巨、大小不均 红细胞性状异常 球、椭圆、靶、口、镰、棘、钝锯齿、泪滴、裂片、形态不整 血红蛋白充盈度与着色异常 低色素、高色素、嗜多色、着色不一 红细胞内异常结构 嗜碱性点彩、豪焦小体、卡波环、寄生虫 、疟色素 红细胞排列异常 缗钱状形成、自凝现象 有核红细胞 1.红细胞大小异常 (1)小红细胞: 指直径小于6μm的红细胞。提示血红蛋白合成障碍,见于缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血。 (2)大红细胞:指直径大于l0μm的红细胞,常见于巨幼细胞性贫血,也可见于溶血性贫血、恶性贫血等。 (3)巨红细胞:指直径大于15μm的红细胞。最常见于巨幼细胞性贫血 。 (4)红细胞大小不均:指同一患者的红细胞之间直径相差一倍以上。大者红细胞直径可达12μm,小者直径仅2.5μm。常见于严重的增生性贫血,巨幼细胞性贫血时尤为明显 2.红细胞形态异常 (1)球形细胞:该红细胞在血液中为球形,而在涂片上则显示细胞中心着色深浓,体积较小,有球形之立体感。 (2)椭圆形细胞:红细胞呈椭圆形、杆形,两端钝圆,长轴增大,短轴缩短。见于遗传性椭圆形细胞增多症、大细胞性贫血;偶见于缺铁性贫血、骨髓纤维化、巨幼细胞贫血、镰形细胞性贫血。正常人血液中约占l%,但不超过15%。 (3)靶形细胞:红细胞中心部位和细胞周缘染色较深,其间为不染色的苍白区环,形如射击之靶 。常见于各种低色素性贫血,尤见于珠蛋白生成障碍性贫血、HbC病,也见于阻塞性黄疽、脾切除后状态。 (4)口形细胞:红细胞中央有裂缝,中心苍白区呈扁平状,颇似张开的口形或鱼口。常见于口形红细胞增多症,小儿消化系统疾患引起的贫血,也可见于乙醇中毒、某些溶血性贫血及肝病患者等。正常人偶见(4%)。 (5)镰形细胞:红细胞外形呈镰刀状、线条状。镰状细胞贫血(HbS-S,HbS-C)和镰状细胞特性(HbA-S)的血标本,在缺氧的条件下,有大量镰细胞。 (6)棘形细胞:红细胞表面有针尖状突起,其间距不规则,突起的长度和宽度可不一。多见于遗传性或获得性β-脂白缺乏症,可高达70%~80%;也可见于脾切除后、酒精中毒性肝脏疾病、尿毒症。 血液常用检查 一、红细胞计数 二、血红蛋白测定 三、红细胞形态学检查 四、白细胞计数 五、白细胞分类计数 六、白细胞形态学检查 七、血小板计数 八、血小板形态学检查 红细胞计数 一 血红蛋白测定 二 红细胞形态检查
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