组合化学、高通量筛选与合理药物设计结合的经典范例-索拉非尼.ppt

组合化学、高通量筛选与合理药物设计结合的经典范例 索拉非尼的发现 * 2 major isoforms: B-Raf C-Raf or Raf1 EGFR VEGFR Ras Raf MEK ERK Voie MAPK VEGF Ser/Thr Kinase PDGFR PDGF 最初药物靶点：Raf激酶 EGF expression of upstream growth factor or/ and their RTKs renal cell carcinoma (RCC) 50% hepatocellular carcinoma (HCC) 100% 索拉非尼的发现 1995年， Bayer公司和Onyx公司合作，开始Raf-1激酶抑制剂的发现。 通过200000个化合物的高通量筛选（HTS），发现一个活性微弱的3-噻吩基脲（1）。 索拉非尼的发现 系统的变换取代基和环系统（传统药物化学方法），结果发现3-噻吩基脲（1）的苯环对位引入一个甲基，可以提高活性10倍。 索拉非尼的发现 继续传统药物化学研究，未发现IC50低于1 μM的化合物。 于是，利用组合化学的平行合成技术，基于先导化合物（1），设计一个大约1000个双芳基脲的小分子化合物库。 目的： 研究3-噻吩基脲化合物的构效关系 改善对Raf-1激酶的抑制活性。 索拉非尼的发现 通过组合库的高通量筛选（HTS）发现了一个对Raf-1激酶IC50为1.1 μM的3-氨基异噁唑脲化合物（3）。 索拉非尼的发现 将3-氨基异噁唑脲化合物（3）尾端的苯基换为3-吡啶环，这个化合物（4）对Raf-1激酶IC50为0.23 μM。 脂溶性降低，水溶性提高，体外对HCT116肿瘤细胞活性增加；抑制MEK和ERK激酶的磷酸化。 HCT116移植动物模型口服给予（4）有效。 索拉非尼的发现 尽管噻吩环对抑制Raf-1激酶是必须的，但是用苯环替换噻吩环成为双芳基脲，则有更好的耐受性。最后发现索拉非尼（sorafinib，5），被FDA批准治疗肾癌。 索拉非尼的发现和发展 索拉非尼（Sorafenib） 双芳基脲类化合物 第一个口服有效激酶RAF抑制剂 索拉非尼的发现和发展 索拉非尼（Sorafenib）三个水平的临床前评价 第一个水平：激酶抑制作用（体外生化试验） 索拉非尼与激酶的相互作用 索拉非尼 Raf kinase, PDGFR, VEGFR, c-Kit, RET, etc… 索拉非尼的体外抑制活性 索拉非尼：靶向于细胞增殖 By inhibiting Raf which is: Central downstream of Ras ? Inhibit tumor growth 实体肿瘤 索拉非尼：靶向细胞增殖和血管生成 索拉非尼是一种多靶点激酶抑制剂 谢谢 Target sélection: Raf kinase Cette molécule a pour but d’inhiber RAF Pourquoi RAF? premières kinases de la cascades MAPKinases ( mitogen activated protein kinase) Raf initie une cascade de phosphorylation qui module l’expression des genes via la phosphorylation de facteur de transcription donc possède des effet sur prolifération cellulaire RAf en aval de plrs RTK En aval du Ras, souvent muté et hyper activée dans la casi totalité des cancers: NSCLC, pancréas, sein Activation de la voie des MAPK est un mecanisme important dans le developpement du cancer * Premier inhibiteur de kinase actif par VOIE ORAL, qui inhibe RAF Le Sorafenib se place dans la poche à Atp de la TK Empêche l’activité enzymatique de phosphorylation du substrat ( transfert d’un résidu phosptate proven