麻疹风疹腮腺炎水痘标本采集处理运送李芳彩教程方案.ppt

麻疹/风疹/腮腺炎/水痘标本采集、处理、保存及运送 李芳彩 湖南省疾病预防控制中心 微生物检验科 2012.11.29 主要内容 方案中关于标本的要求 病毒感染过程与机体免疫反应 操作流程 注意事项 每个散发病例都要采集血清学标本来确诊病例； 出疹后3天内采集的血标本检测麻疹IgM抗体阴性或可疑的病例，应在出疹后4-28天采集第2份血标本； 对每起麻疹暴发疫情至少采集5例暴发早期病例血清学标本（5例以下应全部采集）； 实验室血清检测结果7天内（从标本采集至网上结果录入）上报至麻疹监测信息系统。 麻疹消除前后血清学监测工作的要求 基因分型需要在有资质的实验室进行 –通过盲样考核 每个散发病例都要采集病原学标本鉴定病毒来源---消除阶段； 要在接触病例的第一时间采集标本； 每次爆发要针对每个可能的传播链都要采集标本，以鉴别每个传播链的传播来源； 各省要提高散发和暴发疫情病原学标本采集率、病毒分离率和基因型别的及时鉴定率-引入分子生物学方法； 强调病毒分离的重要性：仍要进行病毒分离！ 各项指标严格按照麻疹监测方案执行：病毒株的及时上送； 有能力进行基因分型的省份，须及时将原始序列峰图结果上报NML, 同时按月上送病毒分离物至NML进行复核； 麻疹消除前后病毒学监测工作的要求 每年采集10份左右典型散发病例病原学标本，并同时采集血清学标本，分离分析野病毒株特征，获得基因特征本底资料 每次爆发从爆发的早期和晚期采集5－10份标本，分析野毒株，监测它们的分布和流行 腮腺炎、水痘病毒学监测工作的要求 没有并发症的首次感染麻疹病毒的过程 天 过程 0 呼吸道飞沫中的麻疹病毒接触鼻咽部的上皮细胞表面。感染上皮细胞和病毒复制。 1-2 病毒传播至局部淋巴结 2-3 初次病毒血症 3-5 麻疹病毒在呼吸道上皮，局部淋巴结和远端组织的复制 5-7 第2次病毒血症 7-11 感染皮肤和其他组织，包括呼吸道 11-14 病毒到达血液，呼吸道，皮肤和其他器官 15-17 病毒血症减轻以至停止，随着免疫屏障的建立，病毒及其产物迅速减少。 急性麻疹病毒感染的免疫反应 典型风疹病毒感染的临床特征——疾病发生的时间进程 天 进程 0 患者呼吸道分泌物中的风疹病毒侵入接触者鼻咽上皮表面而感染易感者。在呼吸道上皮组织中建立局部感染，然后病毒传播到局部淋巴结。 1-22 病毒在鼻咽部和局部淋巴结复制 3-8 病毒首次从鼻咽部排出 6-20 病毒血症 8-14 在皮肤和其它部位出现感染灶 10-17 大量的病毒血症和病毒尿症 10-24 大量的病毒自鼻咽部排出（在出疹前3天至疹后7天） 17-19 病毒血症减少，随后停止 典型风疹病毒感染的免疫反应 麻疹/风疹控制和消除阶段中实验室的作用 阶段 监测活动 控制 *通过IgM检测，在暴发期间证实最初的病例 *从选择的病例中分离分析野病毒株特征，获得基因特征本底资料 预防暴发和消除 *证实可疑病例的临床诊断，早期发现病毒循环。 *从选择的病例中分离分析野病毒株，鉴定正在循环的基因型，追溯病毒传播途径，了解全球麻疹和风疹病毒基因型分布和循环，帮助评估免疫策略的效果 *在必要的情况下，建立人群血清流行病调查，帮助预测暴发。 由于出疹后3-5天内采集的标本病毒分离率较高，因此用于病毒分离标本的采集不能等到对疑似病例进行实验室证实之后才开始 ，建议在首次接触病人时同时采集血清学标本、咽拭子标本和尿液标本 标本采集的记录 所有采集到的标本都要有记录，最好使用标准化实验室表格。下表中提供了一个标准的实验室表格范例。标准的实验室表格应至少包含以下信息： 唯一的识别码（采用统一格式）； 实验室编码； 病人姓名； 年龄（或者用标准格式标明出生日期）； 省份（或地区）； 县或区； 国家编码； 麻疹和（或）风疹疫苗的最后接种日期； 出疹日期； 病人是否符合病例定义？ 标本类型； 标本采集日期； 标本送出日期。 用于抗体检测的血清学标本采集与处理 采集方法与采集量：静脉穿刺取血收集于无菌管中，儿童和成人取5ml，婴儿取2ml，幼儿取适量 处理：全血在进行血清分离前可置4–8 ℃保存24小时，但不可冷冻保存。待全血凝集后，于1500rpm/20分钟分离血清 ，在无菌条件下，将血清移至外螺旋盖带垫圈的无菌管中，避免吸到红血球 保存和运输：无菌分离的血清在运输之前应置于4–8℃保存，保存时间不能超过7天。如果需要保存更长时间，则应置于-20℃或更低温度冷冻保存，运送过程中要放置冰袋保温。 要求保存所有血清学标本以备复核 咽拭子标本采集 避免在进食后两小时内取标本； 患者对光而坐，头部上仰口张大； 口腔进入伸向鼻咽部，到达咽后壁涂擦取标本； 用无菌棉签适