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2，6-二氯酚靛酚法测定Vc 的含量 一．实验目的 掌握2，6-二氯酚靛酚法测定Vc 的含量 二．实验原理 Vc具有还原性，可以还原2，6-二氯酚靛酚（由玫瑰色至无色），所以可以用2，6-二氯酚靛酚滴定样品溶液中的Vc。 抗坏血酸+2，6-二氯酚靛酚 → 脱氢抗坏血酸+2，6-二氯酚靛酚 （还原型） （氧化型）玫瑰色 （氧化型） （还原型）无色 滴定终点：出现浅玫瑰色时，表明样品液中的维生素c全部被氧化。 计算公式：维生素c毫克数/100g 样品=（Va-Vb）*s/w*100 Va:滴定样品中提取液所用的2，6-二氯酚靛酚的平均毫克数。 Vb:滴定空白对照所用的2，6-二氯酚靛酚的平均毫克数。 S:1ml2，6-二氯酚靛酚溶液相当于维生素c的毫克数。 W：10ml样品提取液中含样品的克数。 三．实验试剂与仪器： 菜花 10%盐酸溶液 偏磷酸-醋酸溶液 2，6-二氯酚靛酚溶液 50ml容量瓶 滤纸 漏斗 滴定管 铁架台 分析天平 研钵 实验步骤： 1、30g菜花在研钵中研磨后，用滤纸过滤，滤液置50毫升容量瓶中，用偏磷酸溶液定容，至50毫升，备用。 2、量取10毫升滤液，用2，6-二氯酚靛酚溶液滴定至玫瑰色5s不退色为滴定终点（滴定过程不超过2分钟），记录2，6-二氯酚靛酚溶液用量。 3、空白取偏磷酸溶液10ml，滴定 4、侧S值。取5ml标准抗坏血酸溶液加入5ml偏磷酸-醋酸溶液，然后用2，6-二氯酚靛酚溶液滴定，以生成微玫瑰红色持续15s不退为终点，计算2，6-二氯酚靛酚溶液的浓度，以每毫升2，6-二氯酚靛酚溶液相当于抗坏血酸的毫克数（S）来表示。 5、计算结果。 五.数据处理: m=30.07g; VA=2.0mL; VB=0.18mL; w=6.014g; s=0.171mg/ml 维生素C毫克数/100g样品 =(2.0-0.18)*0.171*100/6.014=5.17 (mg/100g样品) 六、注意事项 提取时，滤液过度浑浊会影响滴定终点的判断，纱布过滤时，要尽可能滤干净抽提液，以免有残留的Vc 。 终点时玫瑰色要持续15s. 滴定速度要尽可能快一点，以免杂质干扰反应。 碘量法测定维生素C的含量 实验目的 掌握碘量法测定维生素c的含量的方法。 实验原理 2CuSO4+4KI-------2CuI2+2K2SO4 2CuI2 ---------Cu2I2+I2 抗坏血酸(还原型)+I2→2HI+抗坏血酸（氧化型） 终点：声誉的微量碘与淀粉指示剂生成蓝色。 仪器与试剂 锥形瓶、滴定管、移液管 菜花提取液、淀粉指示剂溶液、0.01mol/L标准CuSO4溶液，偏磷酸溶液。 实验步骤： 1、取5ml菜花溶液，加10mlKI,加入2滴淀粉指示剂，用标准硫酸铜溶液进行滴定，至出现蓝色/红棕色，记录滴定量。 2、空白试验 取5ml偏磷酸溶液于锥形瓶中，加入10ml 30%KI溶液，滴入数滴淀粉指示剂，摇匀。对其进行滴定，记录滴定体积。 结果计算： Vc mg/100g样品=V0滴定液消耗量 *c*100/W c :一毫升0.01M标准硫酸铜相当于 0.88毫克抗坏血酸，即c=0.88 数据处理: V1=0.4mL; V2=0.1mL; L-抗坏血酸含量(mg/份)=0.3*0.88=0.264mg/份 L-抗坏血酸含量(mg/g)=0.264*100/6.028=4.4mg/g 课后思考题 1.碘量法中，所用KI浓度为什么高达30%，相对于维生素C的浓度要高出许多？ 答：高浓度的KI溶液可以使与CuSO4溶液反应得更彻底，反应终点判断更准确。高浓度的KI与CuSO4反应，生成CuI2；CuI2再因不稳定分解为Cu2I2和I2；I2遇淀粉变蓝，反应更彻底也会使这一现象更明显。同时也可提高反应的速率。 2、根据实验结果，你判断这两个方法中那一个精确度更高？原因如何？ 答：用2，6-二氯酚靛酚测定比较精确，如试验数据可知，测定等体积、等浓度菜花提取液10mL中的Vc 含量。用二氯酚靛酚法测定，需滴二氯酚靛酚2.3mL. 用碘化法测定则需滴硫酸铜溶液0.3mL，若待测样品Vc的浓度减少五倍，则需滴加二氯酚靛酚0.46mL，而滴加硫酸铜溶液0.015mL,而滴管每滴约0.1mL，半滴约0.05mL,因此Vc浓度减少五倍后，用碘化法测误差较大，或根本无法测定，而用二氯酚靛酚法误差较小，由此可知，二氯酚靛酚法可测定低浓度的Vc含量，精确度比碘化法高。 06级生物科学2班 小组成员: 刘录蝉 张园 郑玉琼 何娟