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To study Urumqi Municipality Uighur different caries sensitive children of Streptococcus mutans clinical isolates adhesion , synthesize exopolysaccharides and related gene polymorphism 乌鲁木齐市维吾尔族不同龋敏感儿童变形链球菌临床分离株黏附、产糖及相关基因多态性研究 目录 乳牙龋病是儿童口腔常见疾病，严重影响儿童身心发育及健康。 我国儿童乳牙患龋率很高，远远超过发达国家。 技 术 路 线 图 二、研究内容与方法 主要实验试剂与培养基 研 究 内 容 样本含量计算公式： 指标一 不同龋敏感儿童变链菌黏附能力比较 指标二 不同黏附能力菌株表面蛋白遗传多态性分析 引物序列表 指标三 不同龋敏感儿童变链菌生物膜状态下合成EPS能力的比较 指标四 变链菌不同WIG合成能力菌株糖代谢相关基因遗传多态性的比较 实验菌株 引物序列表 统 计 方 法 采用SPSS19.0软件包进行统计分析。其中两组均数比较采用t检验；各组基因型分布采用卡方检验。α=0.05时比较差异是否具有统计学意义。 三、结 果 1. 变链菌复苏、传代 2. 高龋及无龋组变链菌玻壁黏附比（%） 3.1 DNA定量 抽提变链菌临床株全菌基因组DNA浓度为500-700μg/mL，共获得30-50μg的纯化基因组DNA。所有实验菌株OD260nm/OD280nm比值均在1.7-1.9之间。说明抽提产物无蛋白质、酚污染。 3.2 spaP-a PCR扩增产物电泳结果 3.3 PCR-RFLP结果分析 3.4 spaP-pv,spaP-c PCR扩增产物电泳结果 3.5 PCR-RFLP结果分析 4. 蒽酮法测定胞外多糖含量 5.1 gtfB PCR扩增产物电泳结果 5.2 PCR-RFLP结果分析 5.3 gtfC PCR扩增产物电泳结果 5.4 PCR-RFLP结果分析 5.6 PCR-RFLP结果分析 四、讨 论 黏附能力及其基因多态性 合成胞外多糖及其基因多态性 黏附能力及其基因多态性 黏附能力及其基因多态性 4. Renata等同样利用这两种酶分别对gtfB，gtfC基因片段进行酶切分析，发现它们经酶切后分别出现10种和5种基因型。与本研究结果相差较大，分析原因可能与研究人群的差异有密切关系。本研究对象在这两个酶切片段内可能存在更多的保守区域。 展 望 课题着手居住于城市中的维吾尔族儿童进行了研究，实验结果可以为今后该民族儿童高发龋病群体的早期防治干预工作做好铺垫，提供龋病个性化治疗的基础。为了得到更加全面的维吾尔族儿童龋病致病机制，需要更进一步对全疆该民族儿童进行调查研究，尤其是对于封闭型维吾尔族儿童龋病发病病因的研究会更具实际意义。为进一步探索其龋病致龋毒力因子水平及预防龋病的发生提供实验基础。 攻读硕士学位期间发表的学术论文 致 谢 衷心感谢我的导师赵今教授三年来对我的精心培养和悉心教导，我的点滴进步，无一不凝结着导师辛勤的汗水！ 赵老师学识渊博、临床技能精湛、科研思维敏捷，给予我无尽地启迪，是我终身学习的楷模。她热情开朗、平易近人的人格魅力与严谨求实、一丝不苟的治学态度都将使我终身受益！ 感谢一附院临床检验中心张朝霞主任、季萍老师等各位老师在实验过程中的帮助与包容！ 感谢一附院科研中心的刘涛老师、郑树涛老师在实验技术环节给予的宝贵意见和建议！ 感谢新疆医科大学口腔系及一附院研究生科、科研科、统计教研室的各位领导和老师们对我长期以来的帮助与教诲！ 感谢牙体牙髓科及其他口腔科室老师们在临床技能方面的耐心指导和帮助！ 最后，感谢我的家人，朋友和同学们一直以来默默无闻的奉献，给予我莫大的支持与鼓励！我衷心的祝福你们永远健康、快乐！ 内切酶BsrI 识别5’- ACTGGN↓- 3’ ，B基因型1422bp位点碱基由A→G，导致1419-1424bp片段由5’- ACTAGC- 3’突变为5’- ACTGGC↓- 3’而产生B基因型 5.5 srV+ PCR扩增产物电泳结果 内切酶DdeⅠ 识别5’-C ↓ TNAG-3’ ，B基因型710-714bp片段由5’-ATCAG-3’突变为5’-C ↓ TCAG-3’ 1.高黏附力的菌株大部分来自高龋组，推测维吾尔族高龋儿童变链菌非蔗糖依赖性黏附能力强于无龋儿童。 表面蛋白 功能区 A区 C末端 V区 P区 2. spaP-a基因在高黏附力组主要为A基因型，低黏附