分解尿素的细菌;分解纤维素微生物的分离讲述.ppt

2、制备培养基的操作排序 ①溶化（使各种原料、琼脂等加热溶化） ②灭菌 ③调PH值 ④计算（各成分用量） ⑤称量 ⑥倒平板(培养基冷却至50℃,倒入培养皿) 正确的操作顺序：___________________ ④ ⑤ ① ③ ② ⑥ 为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度？测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释范围相同吗？ 原因：土壤中各类微生物的数量（单位：株/kg）是不同的。例如在干旱土壤中的上层样本中：好氧及兼性厌氧细菌数约为2 185万，放线菌数约为477万，霉菌数约为23.1万。 结论：为获得不同类型的微生物，就需要按不同的稀释度进行分离，同时还应当有针对性地提供选择培养的条件。 接种环 接种针 结果：培养一定时间后，该菌数量上升，再通过平板稀释等方法对它进行纯化培养分离。 思考： 1、所有的培养基都必须含碳源、氮源、水、 无机盐吗？ 2、培养基中的营养要素，除了水以外的无机 物只能是无机盐？ 3、CO2既自养型生物的碳源也是能源物质？ 4、利用动物细胞培养液培养病毒，行吗？ 否；可以无碳源，也可无氮源 否；碳源和氮源也可能是无机物 否；光能或化学能 病毒无细胞结构，只能寄生在活细胞中生存。所以，要利用活细胞培养病毒。 一、微生物概念及种类 1、概念：是指自然界中那些形态微小、 结构简单，通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看清楚的生物。 2、种类：无细胞结构病毒、原核生物界（细线支蓝衣）、真菌界（酵母菌、霉菌、蘑菇等）、原生生物界（草履虫、变形虫等） 3、代谢特点：异常旺盛 微生物所需的营养要素 碳源 氮源 水 无机盐 无机碳源：CO2等—自养型 有机碳源：葡萄糖等—异养型 N2：固氮菌（根瘤菌等） NH3：硝化细菌 其他：铵盐、硝酸盐、尿素、蛋白胨 特殊营养物质（维生素、氨基酸和碱基等）、PH、温度、氧气等 练习：（10全国）某细菌固体培养基的组成成分是KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4、葡萄糖、尿素、琼脂和蒸馏水，其中凝固剂是＿＿＿＿＿，碳源是＿＿＿＿＿＿，氮源是＿＿＿＿＿。已知只有能合成脲酶的细菌才能在该培养基上生长，故该培养基属于＿＿＿＿培养基。按照化学成分分类，该培养基属于＿＿＿培养基。从同化作用类型上看，用该培养基培养的细菌属于＿＿＿＿。 葡萄糖 尿素 琼脂 选择 合成 异养型 无菌技术 1、获得纯净培养物的关键是？ 防止外来杂菌的入侵 2、消毒与灭菌的区别？ 消毒是杀死部分对人体有害的微生物；灭菌 是杀死所有微生物。 3、对培养基灭菌的方法是_______________，对接种针灭菌的方法是_________，对玻璃器皿灭菌的方法是________，对实验操作者的手用酒精_______处理，实验操作结束需不需要灭菌？_________ 高压蒸汽灭菌法 灼烧灭菌 干热灭菌 消毒 需要 2、实验操作——大肠杆菌的纯化培养 1）制备培养基： 计算 称量 溶化 调PH值 灭菌 倒平板 * * * * 讲完第1点后讲课本P22中间楷体字内容引出2、3、4、内容 * 之后讲课本P22的最上面内容 讲完后讲P23楷体字部分 之后讲课本P22的最上面内容 * * * 3）常见的分解尿素的微生物 芽孢杆菌、小球菌、假单胞杆菌、克氏杆菌、棒状杆菌、梭状芽孢杆菌，某些真菌和放线菌也能分解尿素。 4）课题目的 ① 从土壤中分离出能够分解尿素的细菌 ② 统计每克土壤样品中究竟含有多少这样的细菌 如何从土壤中分离能够分解尿素的细菌（目的菌）并对其进行计数？试通过小组讨论写出实验设计的基本思路。 讨论： 思考：如何寻找目的菌？ 思考：如何寻找和分离某种微生物？ 实例1： 启示：寻找目的菌种时要根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。 多聚酶链式反应是一种在体外将少量DNA大量复制的技术，此项技术要求使用耐高温（930C）的DNA聚合酶。如果让你寻找这种耐高温的酶，你会去哪找？ 启示：分离菌种要人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物生长，即用选择培养基来分离菌种。 原因：因为热泉温度70～800C，淘汰了绝大多数微生物，只有耐热菌被筛选出来。 思考：为什么耐热菌能从热泉中被筛选出来？ 分离微生物原理：选择培养基分离 培养基的唯一氮源为尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。 4) 培养基选择分解尿素的微生物的原理 15.0g 琼脂 1.0g 尿素 10.0g