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1981年美国加利福尼亚大学柏克莱分校波纳教授海斯教授一枚琥珀切片4000万年前一只蚊子的细胞细胞结构惊人地完整 基因工程(重组DNA)相关技术及应用genetic engineering 基因诊断 疾病相关基因克隆、印迹技术、探针技术、PCR技术、DNA序列分析、生物芯片技术等 基因治疗 生物制药 转基因动物和植物 Supermouse Super tomato 地球上会出现吗? 土豆番茄烟 教学重点 中心法则 DNA复制的概念、特点 参与复制的主要物质及其作用 一、中心法则 The Central Dogma 二、DNA的复制 DNA Replication DNA双螺旋结构模型中的重要知识点? 方向相反碱基配对规则 (A=T G≡C) 2.DNA复制的方式(特征) 半保留复制 半不连续复制 1)模板(template):解开成单链的DNA母链 2)底物(substrate)或称原料:dATP、dGTP、dCTP、dTTP 3)引物(primer):复制需要一小段RNA作引物 4)能源:需ATP供能,原料dNTP本身也是高能化合物 5)酶和蛋白质因子:DNA聚合酶(polymerase)等 需要 模板 起始:形成复制叉replication fork需解决两个问题 DNA解开成单链,提供模板 合成RNA引物,提供 3? -OH末端 延长: DNA-pol Ⅲ ( DDDP-Ⅲ )的5? → 3?的聚合活性使核苷酸之间生成3?,5?磷酸二酯键 模板 以DNA单链为模板 底物 dNTP(dATP、dGTP、dCTP、dTTP) 引物 以小片段RNA为引物,在 RNA引物的 3? -OH末端上开始逐个添加dNTP 按碱基配对原则 (A = T G ≡ C) 按5? → 3? 方向 4.DNA复制的过程 解链酶 拓扑异构酶 SSB 引物酶 DDDP-Ⅲ DDDP-Ⅰ 连接酶 起始 延长 终止 5 3 5 dATP dGTP dTTP dCTP dTTP dGTP dATP dCTP OH 3 3 DNA-polⅢ 目 录 4.DNA复制的过程 解链酶 拓扑异构酶 SSB 引物酶 DDDP-Ⅲ DDDP-Ⅰ 连接酶 起始 延长 终止 5? 5? 5? DNA-pol Ⅰ OH P 5? DNA-pol Ⅰ dNTP 5? 5? P ATP ADP+Pi 5? 5? DNA连接酶 终止:随从链上不连续性片段的连接 * * DNA的复制 谭红军 “鱼人”新人种 爱因斯坦 2. 中心法则(The Central Dogma) —— 遗传与进化中的信息流 转 录 翻 译 逆转录 复 制 M. Temin 1.复制(replication) 是指以亲代DNA为模板合成子代DNA的过程。即遗传物质的传代。 复制 亲代DNA 子代DNA A G G T A C T G C C A C T G G T C C A T G A C G G T G A C C C C A C T G G G G T G A C C A G G T A C T G T C C A T G A C T C C A T G A C A G G T A C T G A G G T A C T G C C A C T G G T C C A T G A C G G T G A C C A G G T A C T G C C A C T G G T C C A T G A C G G T G A C C + 母链DNA 复制过程中形成的复制叉 子代DNA 半保留复制 解链方向 半不连续性复制(复制叉) 3? 5? 3? 5? 3′ 5′ 3′ 5′ 3′ 5′ 领头链 ( leading strand ) 随从链 ( lagging strand ) 冈崎片段(Okazaki fragment) 领头链 leading strand —— 合成方向与复制叉解链方向相同,并可连续合成的子链。 随从链 lagging strand —— 合成方向与复制叉解链方向相反,并且是不连续合成的子链。 岡崎片段 okazaki fragment —— 在DNA复制过程中,随从链上初合成的不连续的DNA片段。 半不连续性复制 —— 在DNA复制过程中,领头链连续复制而随从链不连续复制。 3.参与DNA复制的物质及作用 复
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