第11章 黄酮类化合物(2014526剖析.ppt

大豆异黄酮 进入20世纪90年代，国内外的生物学家、化学家、医学家被一种神奇的物质所吸引，这存在于大豆中的神奇物质被称作“大豆异黄酮”。 流行病学资料表明，长期食用大豆的东南亚人群中，癌症、动脉粥样硬化等心血管病症的发病率明显低于西方。在日本，乳腺癌的发病率是美国的1/4；妇女更年期综合症的发病率只有美国的1/3；这个现象已引起科学家的注意。经研究发现，大豆中含有一种结构与雌激素相似的物质叫异黄酮，它是大豆中的一种非营养成份，具有生理活性，能产生类似雌激素的效应，而被称之为“植物雌激素”。 对身体雌激素的双向调节作用。当人体内雌激素水平低时，大豆异黄酮占据雌激素受体，发挥弱雌激素效应，表现出提高雌激素水平的作用。当人体内雌激素水平高时，大豆异黄酮以“竞争”方式占据受体位置，同样发挥弱雌激素效应，但由于它的活性仅为体内雌激素的2%，因而从总体上表现出降低体内雌激素水平的作用，这就是著名的大豆异黄酮对雌激素的双向调节作用机制。 大豆异黄酮 对身体雌激素的双向调节作用 抗癌作用 降低胆固醇，预防动脉硬化 改善骨质疏松 预防冠心病 美国的食品药物管理局（FDA）把大豆列为能够“真正降低心脏病危险的食品”之一 大豆异黄酮 三、紫外及可见光谱在黄酮类鉴定中 的应用 紫外及可见光谱一般程序： 1．测定样品在甲醇中的UV光谱 2．测定甲醇+诊断试剂后的UV光谱 3．苷类→水解，或甲基化后→水解 测苷元或衍生物的UV光谱 （一）柱色谱法 1．硅胶柱色谱 适于分离异黄酮、二氢黄酮（醇）及 高度甲基化（或乙醚化）的黄酮（醇）类 常用的分离方法有柱层析法、萃取法、 铅盐法、HPLC法、薄层层析法等。 常用的吸附剂或载体有硅胶、聚酰胺及纤维 素粉等。也有用氧化铝、氧化镁及硅藻土等。 ?（1）分离对象：酚、醌、硝基化合物 2．聚酰胺柱色谱 （2）原 理：氢键吸附 （3）影响因素： 黄酮类分子中羟基的数目与位置 溶剂与黄酮类 溶剂与聚酰胺 之间形成氢键缔合 能力的大小 （4）洗脱规律（先→后顺序） 叁糖苷＞双糖苷＞单糖苷＞苷元 ① 苷元相同： ③ -OH位置： C=O 邻位-OH黄酮＞C=O对位 （或间位）-OH黄酮 ② -OH多少：酚羟基少＞羟基多 ＞ ④ 黄酮类型： 异黄酮＞二氢黄酮醇＞黄酮＞黄酮醇 ⑤ 芳香程度： 芳香程度高，共轭双键多吸附力 ＞芳香程度高，共轭双键少 二氢黄酮＞查耳酮 ⑥ 溶剂影响： ＞ 聚酰胺的双重色谱性 以含水移动相（如甲醇一水）作洗脱剂，苷比苷元先洗下来。 以有机溶剂作洗脱剂 （如氯仿一甲醇）苷元比 苷先洗脱下来。 极性移动相（含水 溶剂系统）洗脱时 有机溶剂（如氯仿一甲醇）洗脱时 聚酰胺— 非极性固定相 极性固定相 色谱行为 类似反相分配色谱 正相分配色谱 苷极性＞苷元 苷元极性＜苷 苷先洗脱 苷元易洗脱 3．葡聚糖凝胶柱色谱 分离黄酮类化合物的机理：双重性 分离黄酮苷元——靠吸附作用 羟基少，极性小，吸附力弱，先被洗脱。 分离黄酮苷时——分子筛性质起主导作用 糖数量多，分子量大，分子筛时，先洗脱 下来。 （二）梯度pH萃取法 ——酸性不同的黄酮苷元的分离 酸性： 7,4’- OH＞7-或 4’-OH＞ 一般Ar-OH ＞5-OH 5%NaHCO3 5%Na2CO2 0.2%NaOH 4%NaOH 溶解 的碱水 （三）根据分子中某些特定官能团进 行分离 H3BO3络合反应（邻二酚羟基） 2. Pb(Ac)2沉淀反应（邻二酚羟基） 3. 碱性醋酸铅（不具邻二酚羟基黄酮） 注意脱铅 第四节 黄酮类化合物的检识与结构测定 测定一般步骤： （1）化学反应— （2）PC、TLC— （3）UV光谱— （4）1H-NMR （5）MS （6）13C-NMR 一 化学反应——确定化合物的类别 二、色谱法在黄酮类鉴定中的应用 ——确定黄酮的种类与数量 （一）纸色谱（PPC）—— 分离黄酮类化合物及其苷的混合物 1．原理— 分配色谱 2．溶剂选择： 黄酮苷元—酸性醇溶剂 花色苷元—酸性水溶剂 HCl或HOAc 苷类—双向展开 第一向展开剂：采用醇性溶剂 第二向展开剂：采用水或水溶液 如：n-BuOH-HOAc-H2O(4:1:5 上层） 如：2%～6%HOAc 等 3．在不同展开剂中，苷、苷元的Rf值不同 醇性溶剂：Rf 苷元 ＞单糖苷＞ 双糖苷 水溶剂：Rf 三