第二章菌种选育与扩大培养ppt.ppt

目前发现的抗生素的生物来源如下： （三）霉菌（mould） 超净工作台 3.原生质体的融合与再生 聚乙二醇（PEG）－脱水剂 助融剂 Ca2+－提高融合频率 4.融合子的选择 控制传代次数 选择合适的培养条件 选择合适的保藏方法 菌种稳定性检查 分离复壮 通过寄主体进行复壮 对于寄生性微生物如苏云金杆菌、白僵菌、多角体病毒等，由于长期使用，其毒力会下降，导致杀虫效率降低等衰退现象。这时可以用菌种去感染菜青虫幼虫等，然后从致死的虫体上重新分离，经过几次重复感染与分离，就可以逐步恢复和提高毒力。 2.原理： 低温、干燥、缺氧、缺营养物质 菌种保藏主要是根据菌种的生理生化特点人工创造条件使孢子或菌体的生长代谢活动尽量降低，以减少其变异。一般可通过保持培养基营养成分在最低水平，缺氧状态，干燥和低温，使菌种处于“体眠”状态，抑制其繁殖能力。 一种好的保藏方法首先应能长期保持菌种原有的优良性状不变，同时还需考虑到方法本身的简便和经济，以便生产上能推广使用。 复习题 End Thanks! 3、方法 1、斜面冰箱保藏法 4 ?C ； 3-6个月 2、沙土管保藏法 产孢子或芽孢微生物，1年 3、菌丝速冻法 甘油或二甲基亚砜作为保护剂，-20 ?C 4、石蜡油封存法 1年左右 不产芽孢微生物 5、真空冷冻干燥保藏法 任何微生物；一般5年以上 6、液氮超低温保藏法 -196 ?C ；保护剂；保存期长 新陈代谢终止，化学反应消失 4、国内外重要菌种保藏机构 1、ATCC (American Type Culture Collection) 美国标准菌种收藏所， 马里兰州，罗克维尔市 2、CSH (Cold Spring Harbor Laboratory) 冷泉港研究室， 美国 3、IAM (Institute of Applied Microbiology,University of Tokyo) 日本东京大学应用微生物研究所， 日本东京 4、IFO (Institute for Fermentation, Osaka) 发酵研究所，日本大阪 5、普通微生物菌种保藏管理中心 （CCGMC ） 中科院微生物所，北京 6、工业微生物菌种保藏管理中心 (CICC) 轻工部食品发酵工业科学研究所，北京 第四节 种子的扩大培养 种子扩大培养：是指将保存在砂土管、冷冻干燥管中处于休眠状态的生产菌种接入试管斜面活化后，在经过扁瓶或摇瓶及种子罐逐级放大培养而获得一定数量和质量的纯种过程。这些纯种培养物称为种子。 种子的要求： 总量及浓度能满足要求 生理状况稳定：个体与群体 活力强，移种至发酵罐后，能够迅速生长 无杂菌污染 菌种扩大培养的目的：接种量的需要。 为每次发酵罐的投料提供相当数量的代谢旺盛的种子。 目前工业规模的发酵罐容积已达几十、几百甚至上千立方米；如按5%接种量计，就需投入大量的种子； 保藏菌种 试管斜面活化 摇瓶 种子罐 一、种子制备过程 2、葡萄汁酵母 (Saccharomyces uvarum) ?与酿酒酵母相似，主要的区别在于葡萄汁酵母能发酵棉子糖和蜜二糖 ? 葡萄汁酵母常用于啤酒酿造的底层发酵，也可食用、药用或作饲料。 3、汉逊酵母 (Hansenula) ? 此属酵母多能产生乙酸乙酯，从而增加产品的香味，可用于酿酒和食品工业。 ? 但由于它能利用酒精作碳源，又能在饮料表面产生干皱的菌膜，所以又是酒精生产的有害菌。 4、球拟酵母 (Toruiopsis) 此属酵母有些种能产生不同比例的甘油、赤藓糖、阿拉伯糖；有的能利用烃类生产蛋白质。 5、假丝酵母 (Candida) ? 能形成假丝，液体培养时能形成浮膜 ? 可生产SCP、甘油、脂肪酶 6、红酵母 (Rhodotorula) ? 有明显的红色或黄色色素，很多种因生荚膜而形成粘质状菌落 ? 可由菌体提取大量脂肪、?-胡萝卜素 7、毕赤氏酵母 ( Pichia ) ? 能利用石油或农副产品及工业废料产生菌体蛋白，有些菌株能生产麦角固醇、苹果酸、磷酸甘露聚糖 ? 近年来其在基因工程中的作用日益得到重视 （五）其它微生物 1.担子菌（basidiomyce