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第三章 生物信息的传递(上) Transcription——从DNA到RNA ● 基本概念 ● 转录起始:RNA聚合酶、启动子 ● 转录的基本过程 ● 转录后加工 ● 原核生物与真核生物mRNA的特征比较 ● RNA合成与DNA合成异同点 RNA的复制 一、基本概念与基本特征 生物体以DNA为模板合成RNA的过程 。 参与转录的物质 原料: NTP (ATP, UTP, GTP, CTP) 模板:DNA 酶: RNA聚合酶 其他蛋白质因子 转录的不对称性: 在RNA的合成中,DNA的二条链中仅有一条链可作为转录的模板,称为转录的不对称性。 转录单元(transcription unit) 二、参与转录起始的关键酶与元件 (一) RNA聚合酶 (二) 启动子(promoter) (一) RNA聚合酶 大肠杆菌RNA聚合酶的组成分析 ● 真核生物RNA聚合酶 RNA聚合酶与DNA聚合酶的区别 (二) 启动子(promoter) ● 原核生物启动子结构 典型启动子的结构 -35 -10 转录起点 TTGACA 16-19bp TATAAT 5-9bp ● 真核生物启动子 真核有三种不同的启动子和有关的元件 启动子Ⅱ最为复杂,它和原核的启动子有很多不同 真核生物启动子的结构 1、核心启动子 ●定义:指保证RNA聚合酶Ⅱ转录正常起始所必需的、最少的DNA序列,包括转录起始位点及转录起始位点上游TATA区 2、上游启动子元件 ●包括CAAT盒(CCAAT)和GC盒(GGGCGG)等 SV40 早期启动子 组蛋白H2B (三) 转录起始复合物 ● 原核生物转录起始复合物 转录因子 转录复合体 TBP TAFs TFIIA TFIIB TFIIF Pol II TFIIE RNA pol Ⅱ的转录起始 三、转录的基本过程 1、起始位点的识别:RNA聚合酶与启动子DNA双链相互作用并与之相结合的过程。 2、转录起始 3、RNA链的延伸 ● ?亚基脱落,RNA–pol聚合酶核心酶变构,与模板结合松弛,沿着DNA模板前移; ●在核心酶作用下,NTP不断聚合,RNA链不断延长。 4、转录终止 不依赖?因子的终止 终止位点上游一般存在一个富含GC碱基的二重对称区,RNA形成发夹结构; 终止效率与二重对称序列和寡聚U的长短有关,长度 效率 依赖?因子的终止 四、转录后加工 5’端加帽 3’端加尾 RNA的剪接 RNA的编辑 5’端的一个核苷酸总是7-甲基鸟核苷三磷酸(m7Gppp)。mRNA5’端的这种结构称为帽子(cap)。 帽子结构功能: ①能被核糖体小亚基识别,促使mRNA和核糖体的结合; ②m7Gppp结构能有效地封闭mRNA 5’末端,以保护mRNA免受5’核酸外切酶的降解,增强mRNA的稳定。 2、3’端加尾 多聚腺苷酸尾巴功能: 提高了mRNA在细胞质中的稳定性。 3、RNA的剪接 生物体内内含子的主要类型:GU-AG、AU-AC、Ⅰ类内含子、Ⅱ类内含子 参与RNA剪接的物质: snRNA(核内小分子RNA) snRNP(与snRNA结合的核蛋白) Ⅰ类内含子的自我剪接 4、RNA的编辑 编辑(editing)是指转录后的RNA在编码区发生碱基的突变、加入或丢失等现象。 尿苷酸的缺失和添加 1986.R.Benne在研究锥虫线粒体mRNA转录加工时发现mRNA的多个编码位置上加入或丢失尿苷酸,1990年在高等动物和病毒中也发现了编辑现象。 锥虫coxII 基因的编辑 五、原核生物与真核生物mRNA的特征比较 1、原核生物mRNA的特征 ● 半衰期短 ● 多以多顺反子的形式存在 ● 5’ 端无“帽子”结构, 3’ 端没有或只有较短的poly(A )结构。 2、真核生物mRNA的特征 原核生物和真核生物mRNA结构的比较 六、RNA合成与DNA合成异同点 相同点: 1、都以DNA链作为模板 2、合成的方向均为5’→3’ 3、聚合反应均是通过核苷酸之间形成的3’,5’-磷酸 二酯键,使核苷酸链延长。 不同点: 中国科学院2001年硕士研究生入学考试 : 名词解释:Transcription; Reverse transcription 1、下列有关TATA盒(Hognessbox)的叙述,哪个是正确的: A
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