生化13转录重点.ppt

第三节 RNA的转录后加工 ? RNA编辑作用说明，基因的编码序列经过转录后加工，是可有多用途分化的，因此也称为分化加工(differential RNA processing)。 RNA pol RNA pol 3′ 5′ ρ因子解螺旋，使RNA脱落 RNA pol失活 RNA转录后，形成特殊的结构，以终止转录。 2. 不依赖ρ因子的转录终止 特点： (1) RNA单链内部接近终止区域有富含 G-C配对区，形成稳定的二级结构。 (2) 在发夹结构的下游有poly U结构。 茎环 (stemloop)或发夹 (hairpin)结构 UUGCAGCCUGAGAAAUCAGGCUGAUGG… 5 ′ 3 ′ … 5 ′ 3 ′ 自发形成发夹结构 （E.coli rpl-L 3 ′末端） AUGGCUGGUGACUUUUUAGUCACCAGCCUU 5 ′ 3 ′ UUUU…… 5 ′ 3 ′ 自发形成茎环结构 UUUU…… ….. 5 ′ 3 ′ 1.茎环结构改变RNA pol的构象，使其失活。 2.茎环结构的形成使转 录复合物趋于解体， poly U加速这一过程。 GpN 结构基因 RNA pol识别结合 生成起始复合物 转录延长 转录终止 启动子 终止区 pppG pppG 原核生物的转录过程 （一）转录起始 转录起始点上游多数有共同的5′-TATA序列，称为Hogness盒或TATA盒。 不同物种、不同细胞、不同的基因，可以有不同的上游DNA序列，但都可统称为顺式作用元件(cis-acting element)。 与基因表达调控有关的DNA非编码序列，统称为顺式作用元件。 二、真核生物的转录过程 真正转录终止点 GCGC-CAAT-TATA-ATG AATAAA 修饰点 外显子 内含子 翻译起始 转录起始 TATA盒(Hogness box) CAAT盒 GC盒 增强子 切离加尾 真核生物RNA pol Ⅱ转录的基因 翻译终止 1. 转录起始前的上游区段 能直接或间接辨认、结合顺式作用元件或RNA聚合酶，从而调节基因表达的一类蛋白质因子。 反式作用因子中，直接或间接结合RNA聚合酶的蛋白质因子。 反式作用因子 (trans-acting factor) 转录因子 (transcriptional factor, TF) 2. 转录因子 参与RNA-pol Ⅱ转录的TFⅡ 转录因子 功 能 TF ⅡA 稳定TF ⅡD复合物 TF ⅡB 促进pol Ⅱ结合 作为桥梁 TF ⅡD 辨认TATA盒 TF ⅡE ATPase TF ⅡF 解旋酶 TF ⅡH 蛋白激酶活性，使CTD磷酸化 TF ⅡJ 促进TF ⅡD的结合 3. 转录前起始复合物 (pre-initiation complex, PIC) 真核生物RNA-pol不与DNA分子直接结合，而需依靠众多的转录因子。 ⅡA ⅡB 由RNA-Pol Ⅱ催化转录的PIC POL-Ⅱ TFⅡF ⅡH ⅡE TBP TAF TFⅡD-ⅡA-ⅡB-DNA复合物 TATA POL-Ⅱ TFⅡF ⅡH ⅡE CTD- P PIC组装完成，TFⅡH使CTD磷酸化 ⅡA ⅡB TBP TAF TATA 4. 拼板理论 (piecing theory) 一个真核生物基因的转录需要3至5个转录因子。转录因子之间互相结合，生成有活性，有专一性的复合物，再与RNA聚合酶搭配而有针对性地结合、转录相应的基因。 （二）转录延长 真核生物转录延长过程与原核生物大致相似；无转录与翻译同步的现象。 RNA-pol前移处处都遇上核小体。 转录延长过程中可以观察到核小体移位和解聚现象。 转录延长中的核小体移位 RNA-Pol RNA-Pol 核小体 RNA-Pol 转录方向 5?------AAUAAA- 5? ------AAUAAA-- 核酸酶 -GUGUGUG RNA-pol AATAAA GTGTGTG 转录终止的修饰点 5? 5? 3? 3? 3?加尾 AAAAAAA······ 3? mRNA （三）转录终止 —— 和转录后修饰密切相关 一、真核生物新生mRNA的剪接和修饰 （一）首、尾的修饰 5?端形成 帽子结构(cap sequence) 3?端加上多聚腺苷酸尾巴(poly A tail) 5′GpppG… 鸟苷酸转移酶 5′…m7GpppG…RNA 甲基转移酶 磷酸酶 PPi 5′pG… 5′pppG…RNA GTP SAM SAH hnRNA + nATP poly A聚合酶 Mg2+ RNA-(A)n +nPPi Pi 加帽 加尾 G 加帽加尾的意义 1.蛋白质翻译起始所需