生化复习——核酸的化学-2013重点.ppt

2.噬菌体感染大肠杆菌实验 A.Hershy和M.Chase 1952年发表 1969年获诺贝尔生理医学奖 （二）是遗传信息的载体 通过基因表达决定蛋白质的结构和功能 二、RNA的生物学功能 1. 是一些病毒的遗传物质:如流感病毒等 2.mRNA：遗传信息的中间载体 3.tRNA：转运氨基酸，识别密码子 4.rRNA：蛋白质合成的场所 5. 某些RNA具有催化作用：核酶(80年代,切赫） 6.一些小分子RNA：调控基因的表达（ 如microRNA） “RNA的世界”学说： 1.在生命进化中先有核酸，后有蛋白质 2.生命可能始于ＲＮＡ，而非ＤＮＡ 理论依据：RNA既是信息分子，又是功能分子 RNA组：研究细胞的全部RNA基因、RNA分子的结构与功能。 第四节 核酸的性质 一、两性性质 含磷酸基和氨基 等电点为酸性： DNA 4～4.5 RNA 2～2.5 （2′-OH） 二 、核酸的水解 1.酸或碱水解 核酸链的磷酸二酯键在酸或碱性条件下水解断裂。 DNA与RNA对酸或碱的耐受程度有很大的差别： RNA有 2′-OH 2. 酶解 酶解：在核酸酶（DNase或RNase）催化下的水解 核酸外切酶和核酸内切酶 5′ACGCTGTA 3′ DNase:需要二价阳离子激活 RNase：不需要二价阳离子激活 限制性内切酶:由某些细菌合成的,可以在特殊的序列区降解外源DNA的核酸内切酶。 三 、 DNA的变性和复性 1. 变性（denaturation）：在温度升高、极端pH值、变性剂等条件下，DNA双链中的氢键被破坏，两条单链部分或全部分开，这一过程称为变性。 熔解温度（Tm,熔点）： 双链DNA ?的链变为单链DNA时的溶液温度。 一般DNA分子Tm范围70-850C 增色效应：DNA在变性后，紫外吸收值增加的现象 2.复性 在变性条件消除后，两条彼此分开的单链可以重新形成双螺旋DNA的过程 热变性的DNA在溶液冷却后的复性称为退火 减色效应： 3.影响DNA复性的因素 温度 浓度 碱基组成 片段大小 复性温度：约为60℃（Tm-250C） 4.核酸杂交 具有互补序列的不同来源的两条单链核酸分子，按碱基配对原则结合在一起形成双链分子称为杂交（hybridization） DNA-DNA RNA-RNA DNA－RNA 应用：Southern 杂交（DNA杂交） 、Northern杂交（RNA杂交）、原位杂交、基因芯片等 本章要点 一、概念：DNA 双螺旋、DNA的三级结构、超螺旋、基因、基因组、核内不均一ＲＮＡ、增色效应、DNA变性（复性）、退火、核酸杂交、DNA的熔解温度 二、符号解释：HnRNA、Tm 三、主要内容 1、DNA与RNA在组成、结构和生物学功能上的区别； 2、DNA B型双螺旋模型的要点； 3、DNA碱基组成的Chargaff法则； 4、染色体的基本包装单位核小体的组成；组蛋白的特点； 5、tRNA及mRNA的结构特点； 6、核酸的变性和复性，以及核酸杂交原理。 长度压缩为原来的1/7-10 2)核小体的组成 (1)核心颗粒：由8聚体蛋白质复合体（H2A、H2B、H3和H4各2个）与缠绕在蛋白质8聚体上的146bp DNA构成。 (2)连接DNA：约54bp (3)1分子H1 3)染色质的主要蛋白质成分为组蛋白（histone） 5种：H1、H2A、H2B、H3和H4 碱性蛋白（正电荷） ：含大量的赖氨酸和精氨酸残基。 2、30nm纤维 10nm纤维卷曲形成的螺线圈 1/40 3.30nm纤维进一步压缩成染色质 1/1000 4.分裂期：1/8000-10 000 高度压缩：染色体 约1m的DNA分子容纳于几微米的细胞核中 线圈 莲座 放射环 四、 基因与基因组 1．基因（gene）:编码某一多肽链或RNA所必需的全部核苷酸序列。 A gene is all the DNA that encodes the primary sequence of some final gene product. Coding segments +purely regulatory sequences 蛋白质基因和RNA基因 2．基因组（genome）:一个生物所携带的遗传信息总和。 病毒：一个核酸分子 原核生物：一条染色体 多细胞真核生物:单